1、目的要求：1、了解细菌菌落及其在各种培养基中的培养特性。 2、了解细菌菌落及其培养特性对细菌鉴别的意义。 3、掌握细菌生化反应的原理、方法和意义。实验内容： 一、细菌培养特性观察 在液体培养基中生长 在固体培养基中生长 在半固体培养基中生长 在血液培养基溶血现象 鉴别培养基中的生长特性,实验四 细菌在培养基中的生长表现及细菌的生化试验,在液体培养基中生长情况：大多数细菌在液体培养基生长繁殖后呈现均匀混浊状态；少数链状的细菌则呈沉淀生长；枯草芽胞杆菌、结核分枝杆菌等专性需氧菌呈表面生长，常形成菌膜。,在固体培养基中生长情况：各种细菌在固体培养基上形成的菌落，在大小、形状、颜色、气味、透明度、表面
2、光滑或粗糙、湿润或干燥、边缘整齐与否，以及在血琼脂平板上的溶血情况等均有不同表现，这些有助于识别和鉴定细菌。,在半固体培养基中生长情况半固体培养基粘度低，有鞭毛的细菌在其中仍可自由游动，沿穿刺线呈羽毛状或云雾状混浊生长。无鞭毛细菌只能沿穿刺线呈明显的线状生长。,细菌在血液培养基的溶血现象,鉴别培养基中的生长特性,E。Coli 鉴别：麦康凯培养基上形成红色菌落；伊红美蓝平板：黑色带有金属光泽菌落;远腾琼脂平板：红色带有光泽菌落。,普通平板,实验四 细菌在培养基中的生长表现及细菌的生化试验,二、细菌的常用生化反应 糖发酵试验 V P 试验 甲基红试验 枸橼酸盐试验 吲哚试验 硫化氢试验 尿素酶试验
3、,糖发酵试验不同细菌分解糖类的能力和代谢产物不同。例如大肠埃希菌能发酵葡萄糖和乳糖；而伤寒沙门菌可发酵葡萄糖，但不能发酵乳糖。,VP（Voges-Proskauer）试验大肠埃希菌和产气杆菌均能发酵葡萄糖，产酸产气，两者不能区别。但产气杆菌能使丙酮酸脱羧生成中性的乙酰甲基甲醇，后者在碱性溶液中被氧化生成二乙酰，二乙酰与含胍基化合物反应生成红色化合物，为VP试验阳性。大肠杆菌不能生成乙酰甲基甲醇，故VP试验阴性,甲基红（methyl red）试验产气杆菌分解葡萄糖产生丙酮酸，后者经脱羧后生成中性的乙酰甲基甲醇，故培养液pH5.4，甲基红指示剂呈桔黄色，是为甲基红试验阴性。大肠埃希菌分解葡萄糖产生
4、丙酮酸，培养液pH 4.5，甲基红指示剂呈红色，则为甲基红试验阳性。,枸橼酸盐利用试验当某些细菌（如产气杆菌）利用铵盐作为唯一氮源，并利用枸橼酸盐作为唯一碳源时，可在枸橼酸盐培养基上生长，分解枸橼酸盐生成碳酸盐，并分解铵盐生成氨，使培养基变为碱性，是为该试验阳性。大肠埃希菌不能利用枸橼酸盐为唯一碳源，故在该培养基上不能生长，是为枸橼酸盐试验阴性。,吲哚（indol）试验有些细菌如大肠埃希菌、变形杆菌、霍乱弧菌等能分解培养基中的色氨酸生成吲哚（靛基质），经与试剂中的对二甲基氨基苯甲醛作用，生成玫瑰吲哚而呈红色，为吲哚试验阳性。,硫化氢试验有些细菌如沙门菌、变形杆菌等能分解培养基中的含硫氨基酸（如胱氨酸、甲硫氨酸）生成硫化氢，硫化氢遇铅或铁离子生成黑色的硫化物。,尿素酶试验变形杆菌有尿素酶，能分解培养基中的尿素产生氨，使培养基变碱，以酚红为指示剂检测为红色，是为尿素酶试验阳性。,
