1、36 种微生物常用培养基配制1.牛肉膏蛋白胨培养基（用于细菌培养）牛肉膏 3g，蛋白胨 10g，NaCl 5g，水 1000mL，pH7.47.6。2.高氏 1 号培养基(用于放线菌培养)可溶性淀粉 20g，KNO3 1g，NaCl 0.5g，K2HPO43H2O 0.5g，MgSO4 7H2O0.5g，FeSO47H2O0.01g，水 1000mL，pH7.47.6。配制时注意：可溶性淀粉要先用冷水调匀后再加入到以上培养基中。3.马丁氏（Martin）培养基（用于从土壤中分离真菌）K2HPO41g，MgSO4 7H2O0.5g，蛋白胨 5g，葡萄糖 10g，1/3000 孟加拉红水溶液 10
2、0mL，水 900mL，自然 pH，121湿热灭菌 30min。待培养基融化后冷却 5560 时加入链霉素(链霉素含量为 30g/mL) 。4.马铃薯培养基(PDA)(用于霉菌或酵母菌培养)马铃薯(去皮)200g，蔗糖(或葡萄糖 )20g，水 1000mL，配制方法如下：将马铃署去皮，切成约 2cm2 的小块，放入 1500mL 的烧杯中煮沸 30min，注意用玻棒搅拌以防糊底，然后用双层纱布过滤，取其滤液加糖，再补足至 1000mL，自然 pH，霉菌用蔗糖，酵母菌用葡萄糖。5.察氏培养基(蔗糖硝酸钠培养基)(用于霉菌培养)蔗糖 30g，NaNO3 2g，K2HPO4 1g，MgSO47H2O
3、0.5g ，KCl 0.5g，FeSO4 7H2O0.1g，水1000mL，pH7.07.2。6.Hayflik 培养基(用于支原体培养)牛心消化液(或浸出液)1000mL，蛋白胨 10g，NaCl 5g，琼脂 15g，pH7.88.0 ，分装每瓶70mL，121湿热灭菌 15min，待冷却至 80左右，每 70mL 中加入马血清 20mL，25%鲜酵母浸出液 10mL，15 醋酸铊水溶液 2.5mL，青霉素 G 钾盐水溶液(20 万单位以上)0.5mL，以上混合后倾注平板。*注意：醋酸铊是极毒的药品，需特别注意安全操作。7.麦氏(McCLary)培养基( 醋酸钠培养基)葡萄糖 0.1g, K
4、Cl 0.18g，酵母膏 0.25g，醋酸钠 0.82g，琼脂 l.5g，蒸馏水 l00mL。溶解后分装试管，1l5湿热灭菌 15min。8.葡萄糖蛋白胨水培养基(用于 V.P.反应和甲基红试验)蛋白胨 0.5g，葡萄糖 0.5g，K2HPO4 0.2g，水 100mL，pH7.2 ，1l5湿热灭菌 20min。9.蛋白胨水培养基(用于吲哚试验)蛋白胨 10g，NaCl 5g，水 1000mL，pH7.27.4，121湿热灭菌 20min。10.糖发酵培养基(用于细菌糖发酵试验)蛋白胨 0.2g，NaCl 0.5g，K2HPO4 0.02g，水 100mL，溴麝香草酚蓝(1%水溶液)0.3mL
5、，糖类lg。分别称取蛋白胨和 NaCl 溶于热水中，调 pH 至 7.4，再加入溴麝香草酚蓝(先用少量 95%乙醇溶解后，再加水配成 1%水溶液) ，加入糖类，分装试管，装量 45cm 高，并倒放入一杜氏小管(管口向下，管内充满培养液 )。115湿热灭菌 20min。灭菌时注意适当延长煮沸时间，尽量把冷空气排尽以使杜氏小管内不残存气泡。常用的糖类，如葡萄糖、蔗糖、甘露糖、麦芽糖、乳糖、半乳糖等(后两种糖的用量常加大为 1.5%)。11.RCM 培养基(强化梭菌培养基) 、(用于厌氧菌培养)酵母膏 3g，牛肉膏 l0g，蛋白胨 10g，可溶性淀粉 lg，葡萄糖 5g, 半胱氨酸盐酸盐0.5g，N
6、aCl 3g，NaAc 3g，水 l000mL，pH8.5 ，刃天青 3mg/L，l2l 湿热灭菌 30min。12.TYA 培养基(用于厌氧菌培养)葡萄糖 40g，牛肉膏 2g，酵母膏 2g，胰蛋白胨(bacto-typetone)6g，醋酸铵 3g，KH2PO4 0.5g，MgSO4 7H2O0.2g，FeSO47H2O0.01g，水 1000mL， pH6.5，121湿热灭菌30min。13.玉米醪培养基(用于厌氧菌培养)玉米粉 65g，自来水 1000mL，混匀，煮 10min 成糊状，自然 pH，121 湿热灭菌 30min。14.中性红培养基(用于厌氧菌培养)葡萄糖 40g，胰蛋白
7、胨 6g，酵母膏 2g，牛肉膏 2g，醋酸铵 3g，KH2PO4 5g，中性红0.2g，MgSO4 7H2O0.2g，FeSO47H2O0.01g, 水 1000mL，pH6.2，121湿热灭菌 30min。15.CaCO3 明胶麦芽汁培养基(用于厌氧菌培养)麦芽汁(6 波美)1000mL，水 1000mL，CaCO310g，明胶 10g，pH6.8,121 湿热灭菌 30min。16.BCG 牛乳培养基( 用于乳酸发酵)(A)溶液：脱脂乳粉 100g，水 500mL，加入 1.6%溴甲酚绿(B.C.G)乙醇溶液 1mL，80灭菌 20min。(B)溶液：酵母膏 10g，水 500mL，琼脂
8、20g, pH6.8,121湿热灭菌 20min。以无菌操作趁热将(A)、(B)溶液混合均匀后倒平板。17.乳酸菌培养基(用于乳酸发酵)牛肉膏 5g，酵母膏 5g，蛋白胨 10g，葡萄糖 10g，乳糖 5g，NaCl 5g，水1000mL，pH6.8，121湿热灭菌 20min。18.酒精发酵培养基(用于酒精发酵)蔗糖 10g,MgSO47H2O 0.5g,NH4NO30.5g,20%豆芽汁 2mL，KH2PO4 0.5g，水 100mL，自然pH。19.柯索夫培养基(用于钩端螺旋体培养)优质蛋白胨 0.4g, NaCl 0.7g,KCl 0.02g, NaHCO3 0.01g，CaCl 0.
9、02g，KH2PO40.09g ，NaH2PO40.48g，蒸馏水 500mL，无菌兔血清 40mL。制法：除兔血清外的其余各成分混合，加热溶解，调 pH 至 7.2，121湿热灭菌 20min，待冷却后，加入无菌兔血清，制成 8%血清溶液，然后分装试管（5 10mL/管） ，56水浴灭活 lh 后备用。20.豆芽汁培养基黄豆芽 500g，加水 1000mL，煮沸 lh，过滤后补足水分，121湿热灭菌后存放备用，此即为 50%的豆芽汁；用于细菌培养：10%豆芽汁 200mL，葡萄糖(或蔗糖)50g ，水 800mL，pH7.27.4。用于霉菌或酵母菌培养：10%豆芽汁 200mL，糖 50g，
10、水 800mL，自然 pH。霉菌用蔗糖，酵母菌用葡萄糖。21.LB(LuriaBertani)培养基(细菌培养，常在分子生物学中应用)双蒸馏水 950mL，胰蛋白胨 l0g，NaCl l0g，酵母提取物(bacto- yeast extract)5g，用 lmol/L NaOH (约 l mL) 调节 pH 值至 7.0，加双蒸馏水至总体积为 1L，121湿热灭菌 30min。含氨苄青霉素 LB 培养基：待 LB 培养基灭菌后冷至 50 左右加入抗生素，至终浓度为 80100mg/L 。22.复红亚硫酸钠培养基(远藤氏培养基)、( 用于水体中大肠菌群测定)蛋白胨 10g，牛肉浸膏5g，酵母浸膏
11、 5g，琼脂 20g，乳糖 10g，K2HPO40.5g，无水亚硫酸钠 5g，5%碱性复红乙醇溶液 20mL，蒸馏水 1000mL。制作过程：先将蛋白胨、牛肉浸膏、酵母浸膏和琼脂加入到 900mL 水中，加热溶解，再加入 K2PO4，溶解后补充水至 l000mL，调 pH 至 7.27.4。随后加入乳糖，混匀溶解后，于 115湿热灭菌 20min。再称取亚硫酸钠至一无菌空试管中，用少许无菌水使其溶解，在水浴中煮沸10min 后，立即滴加于 20mL 5%碱性复红乙醇溶液中，直至深红色转变为淡粉红色为止。将此混合液全部加入到上述已灭菌的并仍保持融化状态的培养基中，混匀后立即倒平板，待凝固后存放冰
12、箱备用，若颜色由淡红变为深红，则不能再用。23.乳糖蛋白胨半固体培养基( 用于水体中大肠菌群测定)蛋白胨 10g，牛肉浸膏 5g，酵母膏 5g，乳糖 10g，琼脂 5g，蒸馏水 1000mL，pH7.27.4，分装试管(l0mL/管)，115湿热灭菌 20min。24.乳糖蛋白胨培养液(用于多管发酵法检测水体中大肠菌群)蛋白胨 10g，牛肉膏 3g，乳糖 5g，NaCl 5g，蒸馏水 l000mL，1.6% 溴甲酚紫乙醇溶液 lmL。调 pH 至 7.2，分装试管(l0mL/ 管) ，并放入倒置杜氏小管，l15湿热灭菌 20min。25.三倍浓乳糖蛋白胨培养液( 用于水体中大肠菌群测定)将乳糖
13、蛋白胨培养液中各营养成分以扩大 3 倍加入到 l000mL 水中，制法同上，分装于放有倒置杜氏小管的试管中，每管 5mL，1l5 湿热灭菌 20min。26.伊红美蓝培养基(EMB 培养基)(用于水体中大肠菌群测定和细菌转导)蛋白胨 l0g，乳糖 10g，K2HPO4 2g，琼脂 25g，2%/ 伊红 Y(曙红) 水溶液 20mL,0.5%美蓝(亚甲蓝)水溶液 l3mL，pH7.4 。制作过程：先将蛋白胨、乳糖、K2HPO4 和琼脂混匀，加热溶解后，调 pH 至 7.4，1l5湿热灭菌20min，然后加入已分别灭菌的伊红液和美蓝液，充分混匀，防止产生气泡。待培养基冷却到 50左右倒平皿。如培养
14、基太热会产生过多的凝集水，可在平板凝固后倒置存于冰箱备用。在细菌转导实验中用半乳糖代替乳糖，其余成分不变。27.加倍肉汤培养基(用于细菌转导)牛肉膏 6g，蛋白胨 20g，NaCl 10g，水 1000mL，pH7.47.6。28.半固体素琼脂(用于细菌转导)琼脂 1g，水 100mL，121湿热灭菌 30min。29.豆饼斜面培养基(用于产蛋白酶霉菌菌株筛选)豆饼 100g 加水 56 倍，煮出滤汁 100mL，汁内加入 KH2PO4 0.1%，MgSO4 0.05%,(NH4)2SO4 0.05%，可溶性淀粉 2%，pH6，琼脂 2%2.5%。 30.酪素培养基(用于蛋白酶菌株筛选)分别配
15、制 A 液和 B 液。A 液：称取 Na2HPO47H2O 1.07g。干酪素 4g，加适量蒸馏水，并加热溶解。B 液：称取 KH2PO4 0.36g，加水溶解。A、B 液混合后，加入酪素水解液 0.3 mL，加琼脂 20g，最后用蒸馏水定容至 1000mL。酪素水解液的配制：1g 酪蛋白溶于碱性缓冲液中，加入 1%的枯草芽孢杆菌蛋白酶 25mL 加水至 100mL，30水解 l h。用于配制培养基时，其用量为 1000mL，培养基中加入 100mL 以上水解液。31.细菌基本培养基(用于筛选营养缺陷型) Na2HPO47H2O 1g，MgSO47H2O0.2g，葡萄糖 5g，NaCl 5g，
16、K2HPO4lg，水l000mL， pH7.0，1l5湿热灭菌 30min。32.YEPD 培养基( 用于酵母原生质体融合)酵母粉 10g，蛋白胨 20g，葡萄糖 20g，蒸馏水 1000mL，pH6.0 ，115湿热灭菌 20min。33.YEPD 高渗培养基( 用于酵母原生质体融合)在 YEPD 培养基中加入 0.6mol/L 的 NaCL，3% 琼脂。34.YNB 基本培养基(用于酵母原生质体融合)0.67%酵母氮碱基(YNB, 不含氨基酸，Difco),2% 葡萄糖，3%琼脂，pH6.2。另一配方为：葡萄糖 10g(NH4)2SO4 1g，K2HPO40.125g，KHPO4 0.87
17、5g，KI 0.0001g，MgSO47H2O0.5g，CaCl22H2O0.lg，NaCl0.1g ，维量元素母液 lmL，维生素母液lmL(母液均按常规配制 )，水 1000mL，pH5.86.0 。35.YNB 高渗基本培养基(用于原生质体融合)在 YNB 基本培养基中加入 0.6mol/LNaCl。36.酚红半固体柱状培养基(用于检查氧与菌生长的关系)蛋白胨 1g，葡萄糖 10g, 玉米浆 10g，琼脂 7g，水 1000mL，pH7.2。在调好 pH 后，加入1.6%酚红溶液数滴，至培养基变为深红色，分装于大试管中，装量约为试管高度的1/2， 1l5灭菌 20min。细菌在此培养基中利用葡萄糖生长产酸，使酚红从红色变成黄色，在不同部位生长的细菌，可使培养基的相应部位颜色改变,但注意培养时间太长，酸可扩散以致不能正确判断结果。以上各种培养基均可配制成固体或半固体状态，只需改变琼脂用量即可，前者为 1.5%2.0% ，后者为 0.3%0.8% 。
