1、科研思路与方法,新疆医科大学中医学院陈阳,科研概述,科研：又称科学研究，是指运用科学的理论和方法，探索自然界未知领域中物质运动现象及其规律，创造新理论、新技术的认知活动。探索是手段，创新是目的。医学研究是以人为对象。,科研的类型,基础研究应用研究开发研究基础研究、应用研究、开发研究是整个科学研究系统三个互相联系的环节。,案例（一）,1、黄帝内经预测死亡时间的理论研究 论文分为四部分,并附结语：第一部分是中医预测死亡时间研究概况。本部分分别考察了内经以前古医经医案、内经、难经、内经注家及现代研究者、后世有代表性的医家对预测死亡时间理论的认识。指出中医预测死亡时间的理论,在内经之前已有学术渊源,内
2、经中有较为系统的论述,后世医家对其传承、发展、丰富,并验之于临床实践。第二部分是内经预测死亡时间的文献分析及理论探讨。本部分对内经预测死亡时间的条文进行了梳理,提出内经预测死亡时间是以天人相应为法则,以四时阴阳、五行生克、运气理论为指导,强调人体正气在疾病发展中的作用,对病机的把握是预测死亡时间的关键；方法是色、脉、症诸诊参合,诊察脏腑经脉气血盛衰,尤其是胃气与神的有无。,案例（二）,清热通络法对早期糖尿病肾病大鼠蛋白尿的作用及其机制研究 本论文选用清热通络中医治法,重点观察其对链脲佐菌素诱导DN大鼠模型蛋白尿的干预作用及其机制研究。目的：观察清热通络法对实验性糖尿病肾病大鼠蛋白尿的干预作用及
3、其机制研究。方法：采用链脲佐菌素(STZ)腹腔注射法制备1型糖尿病肾病大鼠模型。实验分为4组：正常对照组、模型对照组、清热通络组、厄贝沙坦对照组。造模成功12周后,观察大鼠一般状态、体重、空腹血糖、24小时尿量及尿蛋白定量、肾功能的变化;采用光镜和电镜观察肾小球及肾小管间质形态学改变；采用原位杂交方法检测大鼠肾小球足细胞Nephrin和Podocin mRNA表达的变化,并半定量分析其阳性表达面积和表达强度的变化。结果：实验结束时,与正常对照大鼠比较,DN模型大鼠体重均下降,空腹血糖、24h尿量均增加,DN大鼠与正常大鼠之间比较,以上指标差异有统计学意义。,案例（三）,逆转肿瘤MDR的新药开发
4、研究 本实验进行了新型肿瘤MDR逆转剂的开发研究,采用四氮唑盐（MTT）法、RT-PCR、免疫组化和FCM等方法对新型中药逆转剂-敏药碱的体外逆转活性及逆转机制进行了探讨,并对其体内抗肿瘤作用及其对化疗药的增效作用进行了研究。本结果提示:敏药碱具有较强的体外逆转肿瘤MDR活性,在10gmL-1的浓度下使K562/ADM细胞对ADM的敏感性增加2.31-4.81倍,使MCF-7/ADM细胞对ADM的敏感性增加1.40-2.54倍;敏药碱能增加MDR肿瘤细胞凋亡率;敏药碱使MDR肿瘤细胞内罗丹明蓄积增加,外排减少;敏药碱对MDR肿瘤细胞MDR1 mRNA转录和P-gp表达无明显影响;敏药碱具有体内
5、抗肿瘤活性,并对某些化疗药有增效作用。,中医药学科研的类型,动物实验临床试验预防医学研究新药研究（包括临床前研究、临床研究、售后调研）调查研究（为观察性研究、分为横向调查研究和纵向调查研究）文献研究名医学术思想研究,案例（一）,番荔枝总提取物防治肝癌作用和机理研究全文第一部分阐述了目前肝癌防治研究现状、中药抗肿瘤治疗作用及番荔枝科植物抗肿瘤作用的研究概况，揭示了番荔枝科植物在防治肝癌方面的可喜前景。 全文第二部分为实验研究。首先，通过建立移植性肝癌的实体瘤模型，研究了圆滑番荔枝叶乙醇提取物(LAG)对小鼠肝癌HepS瘤体生长的抑制作用。观察了抑瘤率、脾指数、胸腺指数、实体瘤的病理变化，及其对荷
6、瘤鼠外周血细胞、肝肾功能和bcl-2bax基因蛋白表达水平的影响。结果显示圆滑番荔枝叶之醇提取物高、中、低剂量组抑瘤率分别达48.48、47.72、40.91；光镜和电镜检测均发现给药组有较多的肿瘤细胞凋亡，发生特征性形态学改变，其bcl-2基因蛋白表达水平降低而bax基因蛋白表达水平提高。,案例（二）,加味镇眩方降压作用的药效学、临床研究及其对高血压微血管稀疏的影响本研究的主要目的在于：一、探讨加味镇眩方在动物实验研究和临床试验研究中的降压作用,二、探讨加味镇眩方对高血压微血管系统的影响及其他作用机制。第一章加味镇眩方降压作用的实验研究目的加味镇眩方的降压作用。方法将50只SHR大鼠随机分为
7、加味镇眩方高剂量组、加味镇眩方中剂量组、加味镇眩方低剂量组、卡托普利组、对照组,经过12周的干预,分别测定基础血压、心率和2周、4周、6周、8周、10周、12周的血压及心率,以及干预结束后血浆Ang含量。第二章加味镇眩方对SHR血管内皮功能的影响目的：通过对自发性高血压大鼠(SHR)内皮依赖的耳廓微血管反应,以及NO的生物合成和生物利用途径的研究,探讨加味镇眩方的降压机制。方法：将50只SHR大鼠随机分为加味镇眩方高剂量组、加味镇眩方中剂量组、加味镇眩方低剂量组、卡托普利组、对照组,12周干预结束,SHR大鼠麻醉后,用激光多普勒系统分别测定耳廓微血管基础血流量以及温热刺激下的耳廓微血管血流量；
8、处死SHR大鼠,分别测定其血浆NO含量、主动脉NOS活性、主动脉cGMP含量。第二部分临床部分加味镇眩方治疗原发性高血压的疗效观察目的：通过加味镇眩方对原发性高血压患者血压及中医证侯的疗效观察,探讨其降低血压的临床有效性及安全性。,案例（三）,新疆居民西北燥证与生存质量关系的研究 研究目的:1.揭示新疆哈密、伊犁和乌鲁木齐地区汉族、维吾尔族、哈萨克族和锡伯族居民西北燥证罹患率的地区、民族、城乡等分布规律;2.分析评价新疆哈密、伊犁和乌鲁木齐地区汉族、维吾尔族、哈萨克族和锡伯族居民的生存质量状况,同时探讨其影响因素;3.分析新疆哈密、伊犁和乌鲁木齐地区汉族、维吾尔族、哈萨克族和锡伯族居民西北燥证
9、罹患者生存质量的特点,以探讨西北燥证与生存质量的内在联系。研究内容与方法:应用流行病学的现场调查技术对新疆哈密、伊犁和乌鲁木齐地区汉族、维吾尔族、哈萨克族和锡伯族四个民族及作为对照的上海市汉族共2691例城乡居民的西北燥证罹患情况及生存质量状况进行问卷调查及评价,并探讨西北燥证罹患者生存质量的地区、民族、城乡等分布规律及其影响因素,医学科研的特点,创造性探索性积累性继承性,中医药学科研的特点,复杂性伦理性整体性实践性重视证候研究,中医药文献研究,意义：1、是丰富和发展中医药学术理论的重要途径2、是提高中医临床水平的必要条件。3、是中医科研决策的重要依据。,中医药文献研究主要内容,1、中医药文献
10、整理研究2、中医药文献学术研究：中医药史文献研究；中医医案文献研究；中医各家学说和学派文献研究,中医药文献研究常用方法,1、文献资料的收集2、文献资料的整理3、文献资料的利用和研究4、文献资料的开发,案例,哮喘病的古代中医文献研究从文献研究的角度系统地对古代哮喘病的中医文献进行收集梳理、发掘和研究,揭示哮喘病的病因病机、发病机制和演变过程,总结其辨治经验,为中医预防和治疗哮喘病提供依据,并在此基础上提出了哮喘病的一体化分期,即发作前期(或称前驱期)、发作期和缓解恢复期三期辨治的构想。 哮喘病是一种反复发作,缠绵难愈的慢性呼吸 道疾患,元朱震亨丹溪心法始以“哮喘”作为独立 病名论述。中医学早在内
11、经时代对其症状特点就 有记载,本文从文献研究的角度,全面系统地对有关 哮喘病的中医文献进行了梳理,希冀从中能为中医 预防和治疗哮喘病提供较为全面的资料。,中医基础理论的现代研究主要内容,1、藏象理论的现代研究：内涵研究；外在表征研究；机理研究；内在联系的研究；与自然环境关系的研究；与社会因素关系的研究。2、气血理论的现代研究3、经络理论的现代研究4、中药理论的现代研究,中医基础理论的现代研究常用方法,1、现代生理学的研究方法2、现代病理学的研究方法3、现代药理学的研究方法4、分子生物学的研究方法,案例,中医肾脏实体研究安徽省级教学研究重点资助项目 (JYKM 2 0 0 3 0 3 6) 主要
12、进行中医时间医学研究 ,对按时针刺的几种取穴法的质疑及其研究思路与方法的研究 ,在国内时间医学研究领域产生一定的影响。提出了人体生物节律针灸法 ,发现了定时发病的形成与演变规律 ,比较了中医时间医学与现代时间医学之间的异同 ,编写专著构筑了中医时间学基本框架,证候规范与标准研究,1、主要内容：症状、体征名称的规范；症状、体征轻重程度的规范；证候的规范。2、常用方法：文献调研、临床流行病方法、循证医学方法、数理统计分析方法、计算机模拟法、以方测证。,案例,隐结构模型及其在中医证候研究中的应用用隐结构法研究中医证候的基本思想是运用隐结构模型对临床流行病学调查获取的、未经过医生事先辨证的症状数据进行
13、多维聚类分析,为证候的规范化、标准化研究提供较为客观的依据。在系统阐述隐结构分析及隐结构模型诠释的原理和工具的基础上,提出了隐结构法应用于中医证候研究的意义及步骤,并以抑郁症的隐结构模型为例,示范了隐变量和隐类诠释的方法和步骤,以期为今后从病证结合角度进行类似的研究提供参考。,中医临床经验总结,意义：名老中医是中医学术和临床发展最高水平的代表。成效：积累了丰富的资料；课题研究不断深化内容：历代医家临床经验总结；现代中医临床经验总结方法：从思维方法着手；从学术思想着手；从诊法特点着手；从辨证规律着手；从用药特点着手；从总结医论医案着手；以流行病学方法观察；传承名老中医学术思想。,中医药科研的意义
14、,提高健康水平发展中医学理论促进现代生命科学理论的发展,医学科研的基本程序,选题,选择所要研究的课题，确立研究目标和方向。第一步初始意念，查阅文献，分析对比，建立科学假说，科学构思，确立题目。,课题设计,立项依据研究计划（包括研究目标、研究内容、拟解决的关键性问题，拟采取的研究方法、技术路线、实验方案及可行性分析）课题实施计划,案例,1、合谷穴与口面部功能联系人脑功能磁共振成像研究2、应用蛋白芯片技术对电针足阳明经（穴）促胃黏膜损伤修复过程中相关蛋白磷酸化的研究3、基于1H NMR代谢组学的针刺治疗功能性消化不良的经穴效应特异性研究,课题研究的实施,观察实验（重复实验结果是衡量实验是否成功的标准）调查,研究资料的整理分析,统计分析,提出研究结论,研究报告是各类研究课题最基本的、标志着课题完成的通用表现形式。包括工作报告、技术报告。,中医药科研的发展概况,古代科研研究概况,1、自身探索-神农尝百草2、动物实验3、解剖学研究,现代中医科研的研究概况,1、将现代医学方法应用于中医的科研中。（包括脏象学说本质研究、病因动物模型制作、证候机制研究）2、建立证治规范,中医药科研需注意的问题,1、注重以中医学理论为指导2、正确处理中医学理论与西医理论的关系,
