1、,医 学 微 生 物 学(Medical Microbiology),第一篇 细菌学,第十二章 厌氧性细菌anaerobic bacterium,掌握：厌氧芽胞杆菌的致病性（致病条件，致病物质，所致疾病），防治原则。无芽胞厌氧菌感染的致病条件，感染特征，及所致疾病。了解：厌氧菌的种类、分布。,教学目标,思考：,产生芽孢的细菌是G+还是G-菌？刮骨疗伤甚至高位截肢对治疗产气荚膜梭菌的感染有用吗？他们致病的条件是什么？,概 述,一、厌氧性细菌（anaerobic bacteira） 是一群生长和代谢不需要氧气（必须在无氧环境下），利用发酵而获取能量的细菌。二、分类：根据能否形成芽胞 厌氧芽胞的梭菌
2、属 无芽胞厌氧菌,第一节 厌氧芽胞梭菌属,(Clostridium),共同特性,1.严格厌氧菌，G+大杆菌2.芽胞比菌体粗，菌体膨大呈梭状，3.主要分布于土壤、人和动物肠道，多为腐生菌，少数为致病菌4.产生外毒素致病，病情严重,一岁男孩因张口困难，肌肉酸痛而就诊；三天前开始感到不适、头痛发热；就诊检查过程中逐渐发生四肢僵直、牙关紧逼、角弓反张。追问亲属证实周前脚底有深外伤，现已基本愈合。讨论：最可能的诊断是什么？如何抢救？,一新生儿，出生时由老人在家庭内接生，未经严格消毒，用剪刀剪断脐带。一周后出现发热，不能用口吸奶，肢体肌肉僵直。讨论：可能的诊断是什么？如何救治？,一、破伤风梭菌,（Ctet
3、ani）,（一）生物学性状,形态与染色菌体细长，G+芽胞正圆，位于菌体顶端，使细菌呈鼓槌状有周鞭毛,抵抗力 芽胞抵抗力很强,（二）致病性与免疫性,所致疾病 破伤风（tetanus）感染途径 由深部伤口或分娩时使用不洁器械剪断脐带,致病条件 伤口形成厌氧微环境,致病物质,1.破伤风溶血素(tetanolysin)：2.破伤风痉挛毒素(tetanospasmin)：主要致病物质质粒编码属神经毒(neurotoxin)，毒性极强(对人致死量1g)，仅次于肉毒毒素阻止抑制性神经冲动的传递,伤口感染,增殖并产生毒素,厌氧环境,神经纤维、淋巴液或血液,苦笑面容牙关紧闭颈项强直角弓反张等,免疫性(1)外毒素
4、免疫(2)感染患者不能有效刺激免疫应答(3)人工主动免疫,（三）微生物学检查 临诊依据：创伤史、典型症状 一般不作涂片镜检和培养,非特异性防治 正确清洗伤口，及时清创扩创； 手术器械应严格灭菌；甲硝唑抑菌 特异性预防人工主动免疫：类毒素；百白破三联苗人工被动免疫：TAT； 治疗 早期足量注射抗毒素和红霉素 对症治疗：镇静药、解痉药,防治原则,一岁男孩因张口困难，肌肉酸痛而就诊；三天前开始感到不适、头痛发热；就诊检查过程中逐渐发生四肢僵直、牙关紧逼、角弓反张。追问亲属证实周前脚底有深外伤，现已基本愈合。讨论：最可能的诊断是什么？如何抢救？,一新生儿，出生时由老人在家庭内接生，未经严格消毒，用剪刀
5、剪断脐带。一周后出现发热，不能用口吸奶，肢体肌肉僵直。讨论：可能的诊断是什么？如何救治？,一战士在训练中受伤，伤口被泥土污染。该伤员青少年期曾接受过白百破三联疫苗注射；入伍后多次接种过破伤风类毒素疫苗。为了防止发生破伤风，欲给其注射破伤风抗毒素。但皮试为阳性。讨论：为防止发生破伤风，应采取什么措施？,病案六：男，8岁，因左小腿、左足外伤，于当地医院简单包扎处理后转入上级医院，转院过程中患肢疼痛、肿胀、活动受限进行性加重，13小时后入院。患儿高热，急性痛苦病容，面色蜡黄，左小腿中下段前外侧、左外踝、左足背有一广泛皮肤软组织挫伤，缺损区域约为9cm*30cm，创口周围皮肤，肌肉组织呈暗紫色，水肿明
6、显，伤口内可见较多血性渗出液，有腐臭味，并附有大量泥土，沙粒等异物。入院急诊手术，术中见左小腿中下段肌肉呈腐肉样改变，切割时不出血、不收缩，有明显腐臭味。组织间抽出淡红色液体，送厌氧菌培养，证实有产气荚膜梭菌生长。立即为患者行左小腿高位截肢术，伤口一期愈合出院。,某单位发生了以急性胃肠炎症状为主的食物中毒。防疫医师检查时发现是切猪肉时生熟不分而造成食物污染。食物中发现有大量的革兰阳性杆菌，每克食物含菌量在105个以上，腹痛腹泻者每克粪便中含菌量在10个以上。讨论：可能的病原菌是什么？引起食物中毒的常见细菌有那些？,二、产气荚膜梭菌,(Cperfringens ),又称魏氏杆菌,两端几乎平切粗大
7、杆菌G+，芽胞位于次极端，呈椭圆形，不大于菌体，体内有明显的荚膜,（一）生物学性状,1.形态与染色,2.培养特性,厌氧，代谢活跃血平板：双层溶血环 内环完全溶血-毒素 外环不完全溶血- 毒素蛋黄平板： 菌落周围出现乳白色浑浊圈牛奶：“汹涌发酵”,（二）致病性 1、致病物质 外毒素有10余种 有些外毒素就是胞外酶 如 卵磷脂酶、-毒素、-溶血素、胶原酶、蛋白酶、透明质酸酶、DNA酶等,2.所致疾病,气性坏疽 主要由A型产气荚膜梭菌引起致病条件：与破伤风梭菌同病理特征：组织坏死、气肿和全身中毒临床表现：潜伏期短，一般仅为8-48h典型症状： 局部水肿、组织坏死、恶臭、气肿、 捻发感（水气夹杂），严
8、重者毒血症休克、死亡,气性坏疽：局部水肿、气肿，大面积组织坏死，全身中毒症状,食物中毒 C型食入被大量细菌污染的食物（肉类）临床表现：腹痛、腹胀、水样腹泻；无热、无恶心和呕吐，12天后可自愈,（三）微生物学检查法,直接涂片镜检3个初步诊断要点：G+大杆菌、白细胞甚少且形态不典型、伴有其它杂菌早期诊断能避免病人最终截肢或死亡,气性坏疽发展急剧，后果严重，应尽早作出细菌学报告。,分离培养及动物实验,生化反应,在发病后一日内，检出大于105病菌/克食品或106病菌/克粪便可确立诊断,接种血平板 牛奶培养基 庖肉培养（双层溶血环）（汹涌发酵）（大量气体）,取坏死组织制成悬液,染色镜检,动物实验,食物中
9、毒：,（四）防治原则,预防及时处理伤口，破坏厌氧微环境预防性的使用抗生素治疗局部感染的处理-尽早实施扩创手术必要时行高位截肢术，以防病变扩散抗生素、多价抗毒素、高压氧舱法,男，8岁，因左小腿、左足外伤，于当地医院简单包扎处理后转入上级医院，转院过程中患肢疼痛、肿胀、活动受限进行性加重，13小时后入院。患儿高热，急性痛苦病容，面色蜡黄，左小腿中下段前外侧、左外踝、左足背有一广泛皮肤软组织挫伤，缺损区域约为9cm*30cm，创口周围皮肤，肌肉组织呈暗紫色，水肿明显，伤口内可见较多血性渗出液，有腐臭味，并附有大量泥土，沙粒等异物。入院急诊手术，术中见左小腿中下段肌肉呈腐肉样改变，切割时不出血、不收缩
10、，有明显腐臭味。组织间抽出淡红色液体，送厌氧菌培养，证实有产气荚膜梭菌生长。立即为患者行左小腿高位截肢术，伤口一期愈合出院。,某单位发生了以急性胃肠炎症状为主的食物中毒。防疫医师检查时发现是切猪肉时生熟不分而造成食物污染。食物中发现有大量的革兰阳性杆菌，每克食物含菌量在105个以上，腹痛腹泻者每克粪便中含菌量在10个以上。讨论：可能的病原菌是什么？引起食物中毒的常见细菌有那些？,三 肉毒梭菌（Cbotulinum）,肉毒梭菌主要存在于土壤中，在厌氧情况下产生肉毒毒素，若污染食品，如罐头、腊肠、火腿、发酵豆制品，食后引起食物中毒，最常见的为肉毒中毒和婴儿肉毒病。本病为单纯性毒素中毒。,发生一起购
11、买某店加工的禽肉类熟食者多人食物中毒的事件。病人有发热、呕吐、腹痛、腹泻。潜伏期小时。讨论：该类食物中毒可能有哪些细菌引起？如何明确病原学诊断？,一病人在食入未经加热的罐头食品后小时开始眼睑下垂，吞咽困难，发声嘶哑，以后又出现语言障碍，四肢麻痹，最后心跳呼吸停止而死亡。讨论：请分析病人死亡的原因，并提出明确的诊断意见。,（一）生物学特性,G+，粗短杆菌，有芽胞、鞭毛，无荚膜严格厌氧 根据神经毒素的抗原性分7个型，我国报告的多为A肉毒毒素不耐热，煮沸1分钟即可被破坏,（二）致病性,致病物质-肉毒毒素 剧毒（对人致死量为0.1g),作用于脑神经、运动神经、自主神经末梢突触， 抑制神经末梢释放乙酰胆
12、碱，导致弛缓性麻痹,作用机制,所致疾病,食物中毒进食毒素污染食物潜伏期越短病情越重临床表现：胃肠道症状少见， 主要为神经末梢麻痹（松驰型）,先期：全身乏力、头痛眼肌麻痹咽部肌肉麻痹膈肌麻痹、心肌麻痹神志清楚，无发热,婴儿肉毒病 2w-8m进食含毒素的食品（如蜂蜜）后而致病症状：与食物中毒相似，另有便秘、吸乳、啼哭无力创伤感染中毒,（三）微生物学检查法,标本食物中毒患者：食物或呕吐物厌氧培养分离细菌毒素检查食物上清分成两份，其中一份与抗毒素混合，然后分别注射小鼠腹腔，如果抗毒素处理小鼠得到保护表明有毒素存在。,（四）防治原则,加强食品卫生管理和监督低温保存食物，高温破坏毒素尽早根据症状作出诊断，
13、迅速注射A、B、E三型多价抗毒素，同时加强护理和对症治疗，特别是维持呼吸功能，可显著降低死亡率。,一病人在食入未经加热的罐头食品后小时开始眼睑下垂，吞咽困难，发声嘶哑，以后又出现语言障碍，四肢麻痹，最后心跳呼吸停止而死亡。讨论：请分析病人死亡的原因，并提出明确的诊断意见。,是一大类寄生于人和动物体内的正常菌群，包括G+和G-的球菌和杆菌在人体正常菌群中占有绝对优势在某些特定状态下，这些厌氧菌作为条件致病菌可导致内源性感染,第二节 无芽胞厌氧菌,（non-spore-forming anaerobes）,与人类疾病相关的主要无芽胞厌氧菌 包括10个菌属,常见的致病菌,G-杆菌：脆弱类杆菌(Bfr
14、agilis)最为重要，直肠部位的正常菌群临床上常见的无芽胞厌氧菌分离株多形性，有荚膜G-球菌：韦荣菌属咽喉部主要厌氧菌为混合感染者之一,G+球菌：消化链球菌属临床分离率仅次于脆弱类杆菌主要寄居于阴道，多为混合感染,G+杆菌丙酸杆菌属：寄居皮肤，痤疮丙酸杆菌双歧杆菌属：齿双歧杆菌真杆菌属：肠道，迟钝真杆菌，混合感染。,致病性,（一）致病条件,条件致病菌引起内源性感染感染条件 寄居部位改变、宿主免疫力下降、菌群失调+厌氧微环境,（二）致病物质,菌毛、荚膜多种毒素、胞外酶和可溶性代谢物产生SOD，增强细菌对氧的耐受性，有利于细菌在局部组织致病,（三）感染特征,内源性感染，遍及全身，多呈慢性；无特定
15、病型，大多为化脓性感染，也可形成败血症；分泌物或脓液粘稠，乳白色、粉红色、血色或棕黑色，有恶臭，有时有气体；使用氨基糖苷类抗生素长期无效；分泌物直接涂片可见细菌，但普通培养法无细菌生长。,（四）所致疾病,败血症 中枢神经系统感染 呼吸道感染 口腔与牙齿感染 腹部和会阴部感染 女性生殖道感染其他 皮肤和软组织感染、心内膜炎,防治原则,破坏其成为条件致病菌的条件合理使用抗生素对分离株进行抗生素敏感性测定,总结,厌氧菌种类与分布破伤风梭菌、产气荚膜梭菌、肉毒梭菌无芽胞厌氧菌,思考题,1、梭状芽胞杆菌属中重要的致病菌的生物学特点、主要引起哪些疾病？试述其发病机理。2、试述破伤风的防治原则。,下次课预习内容,第十三章 分枝杆菌属,第一篇 细菌学,Thanks for Your Attention,
