1、血液生化检验及其意义,伊犁职业技术学院 高 亮,目 录,一、生化仪的介绍（以IDEXX 为例）二、样本采集与制备三、检测指标及临床选择四、主要检测指标临床意义,一、生化仪的介绍（以IDEXX 为例）,生化仪 干式 时间：8分钟 项目任意（单次最多12项） 多种动物不同年龄模式试剂片,将绿色盒子存放在冰箱冷藏室，紫色盒子存放在冰箱冷冻室里。,二、样本采集与制备,全血、血清、血浆的区别？如何根据标准流程收集和制备全血、血清、血浆样本？样品如何保存？采多少样本？血浆样本的检查？,血浆=血清+纤维蛋白原血浆=全血- 血细胞,二、样本采集与制备,如何根据标准流程收集和制备全血、血清、血浆样本？全血样本收
2、集血清样本收集血浆样本收集,建议头皮针：静脉采血，小动物多用紫色,采血管：红帽、绿帽、紫帽分别指示无抗凝剂、肝素锂、EDTA，根据需求自行选择，采集的血液需立即放入其内。,无菌采血管：一般用2mL注射器，针头过细易造成溶血,计数娴熟的专业人员进行操作,禁食、安静的动物：应激可导致血糖显著升高，镁离子（Mg）、天门冬氨酸氨基转移酶（AST）、乳酸脱氢酶（LDH）、肌酐酸激酶（CK）磷酸酶（PHOS）可能升高。,采血视频点击播放,如何根据标准流程收集和制备全血、血清、血浆样本？血清样本收集 全血样本加入无抗凝剂或促凝管中，凝固取上清液血浆样本收集 全血样本加入肝素锂抗凝管中离心，取上清液,二、样本
3、采集与制备,为何建议使用血浆样本进行检测？ 比血清来的更快，血清凝固期间会造成乳酸、氨等指标的升高，葡糖糖和总蛋白指标的降低。血浆可实现快速、简便、准确的效果。,抗凝管为何选择肝素锂而非其他？ EDTA、枸橼酸钠会影响Ca、K等指标的偏差,二、样本采集与制备,样品如何保存？,全血保存含肝素锂的全血样本必须马上检验。无法在1小时内完成检验时，样本必须离心后，并将血浆转移出保存。,建议您于采血后立即处理及分析样本，可得到最佳结果。,血清、血浆保存血清或血浆必须先与血细胞分离后才能保存。移液管小心的移至新的采血管，关紧管盖避免污染及蒸发。不要有任何气泡存在，会影响血清蛋白。若您无法在4小时内完成检验
4、，冷藏保存。若您无法在48小时内完成检验，冷冻保存。,二、样本采集与制备,采多少样本？依据：做多少项目公式：试剂片 8，样本总量(uL)=50uL基本量+10uLx试剂片数 试剂片 8，样本总量(uL)=100uL基本量+10u1x试剂片数,0.5 CC的全血可以得到225u1血浆，足矣！,血浆样本的检查？为何检查？指示什么？,二、样本采集与制备,不同情况下可能会影响结果，如:溶血。您可藉由这些肉眼观察离心后的样本，以修正您的检测组合。,黄疽视觉:样本呈透明淡黄色到不透明的棕色。象征:阻塞或肝脏疾病，血管内的溶血。额外测试项目:肝脏相关酶，总胆红素，PCV(红细胞压积)。,溶血视觉:样本呈透明
5、的淡到深红色。象征:红细胞在采血中损坏或是血管内的溶血。额外测试项目:总胆红素，PCV(红细胞压积),厚的白血细胞层视觉:白细胞层(介于血浆或血清和浓缩红细胞之间)特别宽。象征:白细胞和/或血小板过多。额外测试项目:总白细胞计数和分类，血小板计数。,二、样本采集与制备,血浆样本的检查？指示什么？,血脂视觉:样本呈苍白色，牛奶状，甚至有浮游的脂肪球状颗粒。象征:最近食用脂类食物或脂肪代谢功能不足。额外测试项目:血脂和肝脏相关酶。,三、检测指标及临床选择,内分泌：碱性磷酸酶（AKP）肌酸激酶（CK-NAC）葡萄糖(GLU-0X)胆固醇（CHOL）钙（Ca）磷（P）钠（Na）钾（K）镁（Mg）,白蛋
6、白（ALB）总蛋白（TP）总胆红素（TB）总胆汁酸（TBA）直接胆红素（DBB）谷草转氨酶（AST）谷丙转氨酶（ALT）r-谷氨酰转移（r-GT）胆碱酯酶（CHE）碱性磷酸酶（AKP),尿素氮（BUN）肌酐（Cr）尿酸（UA）,乳酸脱氢酶（LDH）血钾（K）血钙（Ca）肌酸激酶（CK-NAC）,血糖血脂：葡萄糖(GLU-0X)甘油三脂(TG)酮体胆固醇（CHOL）果酸胺（FMN）高密度脂 蛋白胆固醇（HDC-C)低密度脂蛋白胆固醇（LDC-C）,电解质：钠（Na）氯（Cl）碳酸氢盐镁（Mg）无机磷（P）钙（Ca）,淀粉酶（AMY）脂肪酶(LIPA),三、检测指标及临床选择,四、主要检测指标临床
7、意义,同时，在有些病例中，不要忘记正常的体液平衡机制干扰的影响。,如何分析测定指标？,参考值（点击查阅）,增高临床意义：脱水-呕吐、腹泻、休克-相对增多慢性和免疫介导的疾病-细菌性传染病和自体免疫疾病，特别是猫传染性腹膜炎-球蛋白，特别是-球蛋白的升高。多发性骨髓瘤、淋巴肉瘤、浆细胞瘤,总蛋白（TP）,四、主要检测指标临床意义-蛋白,检测目的：总蛋白与其他检查肝肾功能、脱水程度、有无蛋白质流失性肠道疾病或免疫球蛋白疾病一起检测时，可提供有用的讯息。此项目单独检测时无法提出具体诊断意义，因为它缺乏特异性。,降低临床意义：水相对增多（少见）多为医源性过多的蛋白丢失-低白蛋白血症最常见（最小，易丢失
8、） 肾蛋白丢失 见于肾病综合征、肾小球性肾炎、淀粉性样变等。这可通 过检查尿中是否存在蛋白来证实。 肠蛋白丢失(蛋白丢失性肠病) 在小动物中，要考虑的疾病有淋巴癌、绒毛萎缩、大肠炎和嗜酸性肠炎。 出血 当全血丢失时，血浆蛋白的丢失会引起低蛋白血症，同时存在贫血。这是评估再生性贫血，出血性贫血，还是溶血性贫血最容易的方法(如果是后者，血浆蛋白不会下降)。 烧伤 大面积皮肤烧伤渗出血清，可引起低蛋白血症。蛋白合成的下降-营养不良、吸收障碍、肝衰,白蛋白（ALB）,。,球蛋白（GLOB）,球蛋白（GLOB）=总蛋白（TP）-白蛋白（ALB）隐藏项目，当同时检查TP与ALB时，结果会自动生成,四、主要
9、检测指标临床意义-蛋白,四、主要检测指标临床意义-酶,谷丙转氨酶/丙氨酸氨基转移酶（ALT）,来源：主要存在于肝脏(犬猫)、心脏和骨骼肌中（大动物）。,在犬猫方面，此酶对肝脏具有特异性。A LT存在于细胞质中，当细胞膜通透性改变或细胞坏死时它会被释放到血液中。,检验目的：犬猫的肝脏有无受损。,作用：催化丙氨酸和酮戊二酸转氨生成丙酮酸和谷氨酸。,检查适应症：腹泻、黄疸、腹水、精神不振和厌食，以及难以诊断的疼痛时。,ALT值升高：肝病：见于肝坏死、肝肿瘤、脂肪肝及肝炎、肝硬化、肝脓肿和肝胆炎时。肝脏损伤（自然、手术、外伤）药物：氯丙嗪 、利福平 、红霉素、氯霉素、四环素、庆大霉素、皮质类固醇抗惊厥
10、药（扑癫酮、苯巴比妥）等药物。中毒：四氯化碳，铅、汞等重金属，砒霜等中毒传染病：犬传染性肝炎、猫传染性腹膜炎、钩端螺旋体病。ALT值降低：没有意义。,四、主要检测指标临床意义-酶,谷草转氨酶/天门冬氨酸氨基转移酶（AST）,作用：AST催化天门冬氨基酸和酮戊酸转氨生成草酰乙酸和谷氨酸。来源：广泛地分布于机体中，特别是骨骼肌、心肌、肝脏和红细胞。,检验目的：检查肝脏，心肌或骨骼肌有无受损。此酶对任何器官或组织受损都不是一项专一或敏感的指标。,AST升高：心肌疾病、骨骼肌疾病、肝细胞受损、人为误差（溶血）AST降低：没什么意义,四、主要检测指标临床意义-酶,ALP（ALKP）：碱性磷酸酶,ALP是
11、体内分布最广泛的酶之一，主要存在于肝脏和骨骼中；血浆ALP正常值的范围非常广；成骨细胞活性较高的幼年动物，其ALP水平较高。,骨源性ALP的升高，通过肝实质性酶的不升高和黄疸缺乏，很容易与肝胆疾病区别。胆道疾病，特别是阻塞，会引起血浆ALP的大量升高，可通过ALP的显著升高而肝实质性酶不发生任何变化来鉴别。,四、主要检测指标临床意义-酶,（CK）CPK：肌酸激酶,存在于骨骼肌、心肌和脑等组织的细胞浆和线粒体中。检验目的是检查骨骼肌或心肌有无受损。最常见的异常原因是外伤或过度运动造成骨骼肌的病变。增高：心肌炎、心肌梗塞；脑血管意外、脑膜炎、脑梗死、脑缺血；皮肌炎、肌营养不良、肌肉损伤、甲状腺机能
12、减弱、肺水肿、肺梗死、肌肉物理性损伤。降低：血样放置时间过长（2小时）,AMYL：淀粉酶,主要存在于胰腺中，通常通过肾脏排泄。临床上主要用于诊断急性坏死性胰腺炎。在该疾病中，淀粉酶从细胞中漏出，并开始消化自己的组织。有急性腹痛和呕吐的症状，可能会被误认为是小肠内有异物，如果不能确定的话，就应该检查淀粉酶(和脂肪酶)。,轻度到中度的非特异性的升高，可见于其它急性的腹部疾病(包括肠梗阻)和肾衰。,四、主要检测指标临床意义,检验此项目的主要目的：检测碳水化合物的代谢情形。,葡萄糖（GLU）,增高：生理性高血糖：餐后 紧张 兴奋 疼痛 注射可的松病理性高血糖：糖尿病、胰腺炎、酸中毒、癫痫、抽搐、颅外伤
13、、颅内出血、脑膜炎、肾上腺皮质机能亢进、甲状腺和脑垂体前叶功能亢进以及频死期降低：生理性低血糖：饥饿病理性低血糖：胰岛B细胞增生或瘤，垂体前叶功能减退、肾上腺功能减退、肝病后期、甲状腺和脑垂体前叶功能减退、坏死性肠炎、消化吸收不良、慢性贫血。,胆固醇（CHOL）,检验目的：是甲状腺功能低下的指针。最常见的异常原因：甲状腺功能低下。,四、主要检测指标临床意义,肌酐（CREA）,肌酐是肌肉代谢过程中肌胺酸降解的产物。每天产生的量是相当稳定的，不会随年龄、饮食、运动或损伤作用而改变。经肾脏过滤及肾小管分泌排出体外。血浆肌酐浓度的变化只与肌酐的排泄有关，也就是说，它更准确反映了肾的功能。,既然肌酐比尿
14、素对肾衰更特异更敏感，为什么还要同时测定尿素呢？1、肌酐在血浆样品中易变质。2、有些物质容易干扰肌酐的检测，胆红素降低肌酐浓度，头孢增加肌酐的浓度。3、由于尿素受许多因素影响，故尿素的测定也可以为病畜提供比肌酐更多的信息。,降低没有临床意义；增加到250mol/L左右时，可能是肾前性的原因引起的(脱水或心衰)；超过该值时，肾是有问题的(除非存在膀胱破裂或尿道阻塞)；当血浆肌酐的浓度超过500mol/L时，情况就十分严重了；浓度超过1000mol/L的情况，见于肾衰后期、膀胱破裂和尿道阻塞。,四、主要检测指标临床意义,尿素氮（BUN）,蛋白质分解后产生的氨具有相当的毒性，它会在肝脏中转变成尿素并
15、由肾小管滤过后排出体外。,检验主要目的是肾脏疾病的指标。肾衰实际上只是可以影响血浆尿素浓度的疾病之一，当心基于尿素浓度升高把心脏疾病误诊为肾衰的情况。还是监测慢性心衰治疗效果的一种有效方法。当血浆尿素水平高于60mmol/L时，治愈希望很小(除非进行肾移植技术)，建议安乐死。治疗肾衰方法主要是喂低蛋白、低钾、低镁、低磷的食物，从而降低肾脏的排泄压力；多饮水，防止脱水的发生。,四、主要检测指标临床意义,胆红素（TBIL）,检验主要目的：检测阻塞型肝病。注意：健康的犬猫总胆红素的浓度相当低。通常先用肉眼观察样本后可决定是否需要检验胆红素。,四、主要检测指标临床意义,钙（Ca）,四、主要检测指标临床
16、意义,磷（PHOS）,与Ca一样，血浆浓度也是被甲状旁腺激素和维生素D调控的。检验主要目为判读肾脏疾病严重程度的指标。最常见的异常原因为肾衰竭及胃肠炎。,血清磷受食物、体内激素及肾脏机能的影响。 体内大量的磷存在于红细胞内，故采血时的溶血可导致血磷值的假性升高，应加以避免和判读上的注意。 甲状旁腺激素使磷在肾脏细曲尿管重吸收减少。,意义 血磷升高见于甲状旁腺机能低下、营养性、继发性甲状旁腺机能亢进、肾功能不全、肾性继发性甲状旁腺机能亢进等时。 由于甲状旁腺激素降低磷在肾脏的重吸收，故甲状旁腺机能亢进和假性甲状旁腺机能亢进时，血磷均下降。 血清磷值和血清肌酐值一起在肾脏病持续期间，在评价肾病严重程度上具有重要作用。血清磷和肌酐值的升高是长期及严重肾病的特征。,
