1、血型鉴定方法及报告错误原因分析,十堰市妇幼保健院检验科 杨业伟,主要内容一.血型系统概述二.ABO血型及Rh血型鉴定方法三.血型鉴定注意事项四.血型报告错误原因分析,1 . ABO血型系统概述,血型是指一个人红细胞上带有或者缺乏一些特异性的物质。这些特异性的物质称为抗原。ABO血型分类原则：红细胞上有A抗原、血清中有抗B者称为A型；红细胞上有B抗原、血清中有抗A者称为B型 ；红细胞上有A和B抗原、血清中无抗A和抗B者称为AB型;红细胞上无A和B抗原、血清中有抗A和抗B者称为O型。,2 . Rh血型系统概述,Rh血型系统内有45种不同的抗原，主要以 D、E、C、c、e为主要，其中D抗原最重要，根
2、据红细胞上D抗原的有无，可分类红细胞为Rh阳性或Rh阴性。,鉴定原理：常用盐水凝集法检测红细胞上存在的血型抗原，以及血清中存在的血型抗体，依据抗原抗体存在的情况判定血型。常规的方法有：正向定型：用已知抗体的标准血清检查红细胞上未知的抗原。反向定型：用已知血型的标准红细胞检查血清中未知的抗体。结果判定：凡红细胞出现凝集者为阳性，呈散在游离状态为阴性,3. ABO血型鉴定方法,生理盐水凝集法： 玻片法：操作简单，适于大量标本检查，但反应时间长；被检查者如血清抗体效价低，则不易引起红细胞凝集，因此，不适于反向定型。 试管法：由于离心作用可加速凝集反应，故反应时间短，而且，借助于离心力可以使红细胞接触
3、紧密，促进凝集作用，适于急诊检查。红细胞亚型抗原性弱，如抗A抗B标准血清效价低时，易造成漏检或误定。如加用O型（抗A、B）血清和反向定型，可避免此类错误。,ABO血型鉴定,凝胶微柱法 是红细胞抗原与相应抗体在凝胶微柱介质中发生凝集反应的免疫学方法。血型抗体为单克隆抗体，加入试剂、标本，用专用离心机离心后可直接用肉眼观察结果或用血型仪分析。此法操作标准化，定量加样，确保结果准确性,ABO血型鉴定,4. Rh血型鉴定,Rh血型血清不含天然抗体， Rh血型的抗体是通过免疫产生的免疫抗体，根据免疫抗体的特性，在鉴定Rh 血型时，要用检测免疫抗体的方法进行测定，用酶法、聚凝胺法等，如有单克隆的IgM型的
4、抗D，才可用盐水法。,Rh血型鉴定方法,一、酶介质法 二、盐水法 三、聚凝胺法 四、抗人球蛋白法,Rh血型鉴定,一、酶介质法 Rh血型抗体因其分子量小，在结合了具有相应抗原的红细胞后，并不能将相邻的红细胞彼此连接起来，使红细胞发生凝集。酶（木瓜酶、菠萝酶等）可破坏红细胞表面带负电荷的唾液酸，降低红细胞表面负电荷，使红细胞之间排斥力减小，红细胞间距缩小，在不完全抗体的作用下发生凝集。,二、盐水法 又称为人源盐水介质抗D试验，是采用二硫苏糖醇等物质作为免疫球蛋白化学变性剂，处理采自人源的IgG 抗D血清，使小分子的IgG 抗体“转变”成类似大分子的“IgM”抗体的作用。这种IgM型抗D血清可用于R
5、h血型系统D血型的快速检测。,Rh血型鉴定,Rh血型鉴定,三、聚凝胺法 聚凝胺是一种高价阳离子季胺盐多聚物，溶解后能产生很多阳离子，可以中和红细胞表面的负电荷，使红细胞间距缩小，发生可逆性的非特异性凝集；低离子强度溶液可降低红细胞的Zate电位，可进一步增强抗原抗体间的引力。,Rh血型鉴定,四、抗人球蛋白法 不完全IgG类抗D抗体结合了含有相应抗原的红细胞后，因其分子量小，在盐水介质中只能与红细胞结合，使红细胞致敏，即在D红细胞包被一层IgG抗体，而不能使其连接起来发生凝集。加入经一定稀释的抗人球蛋白血清后，抗人球蛋白可与红细胞上结合的不完全抗体结合，将致敏红细胞连接，发生肉眼可见的凝集。,血
6、型鉴定注意事项,1.,所用器材必须干燥清洁、防止溶血，凝集，避免交叉污染，标准血清从冰箱取出后，应待其平衡至室温后再用，用毕后应尽快放回冰箱保存。 加试剂顺序：一般先加血清，然后再加红细胞悬液，以便核实是否漏加血清。虽然，IgM抗A和抗B与相应红细胞的反应温度以4最强，但为了防止冷凝集现象干扰，一般在室温2024内进行试验，而37条件，可使反应减弱。,血型鉴定注意事项,1.,幼儿红细胞抗原未发育完全、老年体弱者抗原性较弱，最好采用试管法鉴定血型。玻片法反应时间不能少于10min，否则较弱凝集不能出现，造成假阴性。正、反定型结果一致才可发报告。反定型法：先天性免疫球蛋白缺陷，长期大量应用免疫抑制
7、，血型抗体可减弱或消失；血清中存在自身免疫性抗体、冷凝集素效价增高、多发性骨髓瘤、免疫球蛋白异常均可造成反定型困难；新生儿体内可存在母亲输送的血型抗体，且自身血型抗体效价又低，因而出生6个月以内的婴儿不宜做反定型。老年人血清中抗体水平大幅度下降或被检者血清中缺乏抗A及（或）抗B抗体，可引起假阴性或血型鉴定错误。,5.临床血型报错常见原因分析,操作错误 用试管法检测血型时，红细胞浓度与抗原抗体比例不适，如红细胞悬液过浓，标准血清中抗体全部被吸收，呈后带现象不明显凝集或者凝集；红细胞悬液太浅，抗体浓度过高，呈前带现象而不易凝集或凝集很弱，若未经显微镜检测很难发现，造成定型报告错误。 用玻片法检测时
8、，玻片清洗不彻底，或者反应时间不够（反应时间不得少于10分钟），造成假阴性或者假阳性。 忽略溶血现象，不能正确识别和解释结果。,检验人员责任性错误 在工作中，由于精力不集中，比如要鉴定一号标本时， 错拿2号或者3号的标本，或者发报告时，将鉴定的血型结果输入电脑时，由于鼠标点击错误而造成血型输入错误。 鉴定血型时，抗a、抗b试剂对调，结果a型跟b型结果也对调，造成错误。在滴定血型试剂的时候，少量滴到相邻试管，造成污染等。,5.临床血型报错常见原因分析,护理人员采集标本错误 住院患者血液标本由护士采集，若果其责任心不强，精力不集中，极容易将患者标本张冠李戴，或者多人抽血未及时贴标签，或者贴标签时贴
9、错化验单，导致标本错混现象等,5.临床血型报错常见原因分析,临床医生的错误临床医生在填写输血申请时，没有做血型检测，单凭印象或者听信患者的口述血型而造成血型错误.因病历上输血检验报告单夹错，医生在填写输血申请单时，未校对患者姓名和床号，照单抄错.,5.临床血型报错常见原因分析,试剂原因引起 试剂每天使用过后，未及时放入冰箱保存，长期放置在较高气温下，容易使血型试剂效价降低或失效；或者使用已过期试剂，效价较低，若使用前未作质控，可造成血型鉴定错误。,5.临床血型报错常见原因分析,疾病导致血型结果的错误 某些疾病可使受检者血液中含有较高的冷凝素，而产生自凝现象或由于疾病使患者红细胞上的抗原减弱而造成血型的检测错误。高球蛋白血症的标本常见红细胞缗钱状排列，而干扰血型判断。,5.临床血型报错常见原因分析,谢谢大家！,
