1、出生缺陷和先天性代谢异常及其新生儿疾病筛查,浙江大学医学院附属儿童医院杨建滨,E-mail: ,主要内容,出生缺陷,出生缺陷,概念： 因先天性因素、遗传因素和不良环境因素等 原因，引起患儿出生时有体格残缺或智能落 后等疾病的总称。 出生缺陷有些出生时即可发现， 有些不能立即发现。,全球出生缺陷现状,全世界每年大约有790万的出生缺陷儿出生 最高为820/万（苏丹），最低为397/万(法国） 每年有数十万因为母亲暴露环境因素导致的出生缺陷， 如酒精、风疹病毒、梅毒、 碘缺乏等 全球死于出生缺陷的5岁 以下儿童每年大约为330万 每年大约有320万 存活儿童有残疾,全球前五位的常见严重出生缺陷,先
2、天性心脏病 神经管缺陷 血红蛋白病（地贫、镰状细胞贫血） Down综合征 葡萄糖6磷酸脱氢酶缺乏症（G6PD)这五种缺陷占所有出生缺陷的25%（全部或部分来源于遗传）7000多种出生缺陷被确认（全部或部分来源于遗传）,中国出生缺陷现状,80-120万/年出生缺陷儿，发生率达4%-6% 每30至40秒出生一名出生缺陷儿 给社会和家庭带来沉重负担 严重公共卫生和社会问题,出生缺陷率增高的原因,与我国的监测水平提高有关 遗传因素：最常见的疾病有21-三体综合症、18-三体综合症等 环境因素：生物因素、化学因素、物理因素、药物因素等 生物因素：细菌、病毒等病原体通过胎盘绒毛屏障或子宫颈上 行感染胎儿
3、化学因素：农药、苯氧酸类除草剂，铅、镉、汞、铝等重金属 和氯乙烯、丙烯晴等高分子化合物等 物理因素：辐射引起染色体畸变而导致胎儿发生畸形 药物因素：抗肿瘤药在较低剂量时就对胎儿产生较大的损害。抗 菌素类以及大部分抗结核药、激素类和活疫苗等在 孕早期及致畸敏感期使用均有致畸危险 其他因素：烟、酒等，大量使用后胎儿发生畸形的危险很大,出生缺陷的干预,出生缺陷干预分三级一级预防防止出生缺陷儿的发生: 婚检、健康教育 二级预防减少出生缺陷和残疾胎儿的出生； 产前诊断 三级预防新生儿疾病筛查、外科矫正 （早发现、早治疗）,主要内容,出生缺陷,细胞遗传学检查诊断染色体病 染色体的形态和类型 染色体的显带技
4、术 染色体的异常 数目的改变和结构的畸变,染色体的形态和类型,染色体的形态和类型,染色体核型：46，XY,染色体显带技术,G-显带（胰酶处理后，Giemsa染色） 常规染色体分析 高分辨染色体分析 荧光Q-带: Quinacrine Mustard N-带（银染） C-显带: CentromereR-显带: ReverseT 带: Terminal,染色体G-带分析,高分辨染色体分析 常规染色体分析 检测范围 全染色体组 全染色体组 G-显带 550条带以上 300-400条带 分辨率 3Mb 10Mb 判定标准 10q21/q23/q25的亚带、15q12 染色体的主要特征带 临床应用 多用
5、于染色体结构异常 多用于染色体数目异常,染色体G-带分析,高分辨染色体分析的适应征,反复多次流产或胚胎停育的夫妻双方 有过畸形儿分娩史的夫妻双方 确认染色体畸变的起源（遗传/新发生） 验证其它检测平台的检测结果,反复多次流产或胚胎停育的夫妻双方 有过畸形儿分娩史的夫妻双方 确认染色体畸变的起源（遗传/新发生） 验证其它检测平台的检测结果,染色体的异常,染色体异常达400余种，全国约有360万病儿 -21-三体：Downs 综合征 -13-三体：Patau 综合征 -18-三体：Edwards 综合征 -性染色体异常：Turners 综合征、 Klinefelter 综合征等 重度智力低下、多发
6、畸形,染色体的异常,染色体数目的改变 单倍体(n)、多倍体(3n或4n) 非整倍体(单体、三体)染色体结构的畸变 缺失、重复、易位、倒位 环状染色体、等臂染色体 标记染色体、双着丝粒染色体等,染色体数目的改变,染色体核型：47，XX, +21,染色体结构的畸变,易位 (translocation, t),重复 (duplication, dup),染色体结构的畸变,缺失 (deletion, del),倒位 (inversion, inv),染色体结构的畸变,片段插入,46, XX, ins(7; 2)(q11.23; q33q35),染色体结构的畸变,片段缺失,46, XY, del(10)
7、(q22.3q23.1),21-三体综合征,“先天愚型”或“唐氏综合征（Downs syndrome） ” ，在新生儿中的发病率约为1/600。 临床上有明显的智力和生长发育障碍、特殊面容和多发畸形，其共同的典型特征： 眼距宽、外眼角上斜、鼻根低平、伸舌等痴呆面容和特异的皮肤纹理(通贯手等)。,Down氏综合征,全国约有60万以上每年新增2.66万例每个患者医疗支出45.4万元每年用于抚养、治疗和护理 费用超过100亿元， 我省年耗资达5亿,分子细胞遗传学诊断技术,荧光原位杂交技术 (Fluorescent In Situ Hybridization, FISH）染色体微阵列技术 (Chrom
8、osome Microarray Analysis ,CMA),荧光原位杂交技术原理,荧光原位杂交技术实验步骤, 染色体制备和变性 探针制备 原位杂交 杂交后洗涤 染色 荧光检测和荧光显微镜检查,FISH 探针分类,按核酸性质分类 根据探针的核酸性质不同可分为： DNA探针（临床使用的探针都是以DNA 为主） cDNA探针 RNA探针 寡核苷酸探针,FISH 探针分类,按染色体上位置分类,着丝粒探针 （CEP: Chromosome Enumeration DNA Probes） 位点特异性探针 LSI （Locus Specific Identifier） 染色体涂染探针 （WCP: Who
9、le Chromosome Paints） 端粒探针,着丝粒探针（CEP）,高度重复序列DNA , 重复数百次至数千次，其靶序列通常是在染色体的p11-q11区域及异染色质区域 特点： 信号强 应用： (a) 标记染色体识别 (b) 染色体数目异常检测 (c) 间期细胞遗传学研究和临床诊断,着丝粒探针（CEP）,位点特异型探针（ LSI）,标记了荧光信号的DNA片段代表了某一个或几个基 因位点的全部序列。主要用于染色体DNA 克隆序列 的定位和靶DNA 序列拷贝数及结构变化的检测 特点： 信号较小 应用： （a）定位DNA片段 （b）确定染色体微小缺失与重复 （c）间期细胞染色体数目异常诊断,
10、位点特异型探针（ LSI）,染色体涂染探针（WCP）,涂染探针是针对某一整条染色体设计探针，能对整条染色体进行荧光标记，主要用于常规显带技术无法确定的染色体重排和标记染色体的确定特点： 结果容易判读。然而，整条染色体涂染探针不能 分辨同一染色体臂间易位及染色体倒位 应用: （a）染色体数目和结构异常分析 （b）白血病及其它肿瘤的染色体诊断和研究,Identification of a Balanced Translocation,t (6;7),24 colour karyotype,Complex rearrangements in cancer cells,FISH的优点, 快速、简便 敏
11、感性和特异性高 杂交和检测效率高 能够分析分裂相和间期核 采用生物素、荧光素标记, 更安全 可确定恶性细胞的克隆起源或鉴别良恶性细胞 多色FISH,FISH的局限性, 染色体异常的检测取决于能否获得相应的探针 不能对整个基因组的染色体数目和结构异常同时进行检测 对三体检测的敏感性高于对单体或缺失的检测 对实体瘤或淋巴结的石蜡包埋或冰冻切片处理较难 要求较高, 需要荧光显微镜和图像分析系统,William 综合征, 发病率: 1/20,000 7q11.23微缺失 弹性蛋白基因(ELN) LIMK1基因 临床表现: 主动脉瓣上狭窄(SVAS) 智力: 轻到中度智力迟缓 特征性个性: 对人友善 健
12、谈多语 喜欢社交 生长发育障碍 身高低于正常人 颅面部: 小头 、眉间潮红、眼裂小、眼周围皮下组 织丰满、低鼻梁 、人中长、 唇厚张口、 齿釉质发育不良,DiGeorge 综合征, 发病率: 1/3,000-1/4,000 22q11.21-q11.23微缺失 临床表现: 先天性心脏病 、免疫缺陷 、低血钙 心血管: 动脉干狭窄、法乐氏四联症、室间隔缺损 胸腺: 发育不良或缺如导致细胞免疫缺陷， 容易患严重感染性疾病 甲状旁腺: 发育不良或缺如导致婴儿患者早期严重 低钙、 抽搐 智力: 轻到中度智力低下 其他: 人中短、 小颌、 耳廓异常,染色体微阵列(CMA)技术,根据芯片设计与检测原理的不
13、同，CMA技术可分为两大类：基于微阵列的比较基因组杂交(aCGH)技术和单核苷酸多态性微阵列(SNP array)技术。 前者需要将待测样本DNA与正常对照样本DNA分别标记、进行竞争性杂交后获得定量的拷贝数检测结果；而后者则只需将待测样本DNA与芯片杂交，将芯片数据与一整套正常基因组对照资料进行对比即可获得诊断结果。 而设计涵盖CNV+SNP检测探针的芯片，可同时具有CNV和SNP芯片的特点。,SNP芯片检测结果的解读,全染色体组模拟核型图,异常染色体详图,按照人类细胞遗传学国际命名体制（ISCN）规范描述检测结果： 正常女性：arr(1-22, X)x2 正常男性：arr(1-22)x2,
14、(XY)x1 正常胎儿：arr(1-22)x2,(XN)x1 异常结果：arr 10p15.3p12.33(100,047-18,286,639)x3 arr 10q26.2q26.3(130,581,093-135,426,386)x1,主要内容,出生缺陷,新生儿疾病筛查,新生儿疾病筛查 (neonatal screening)是指医疗保健机构在 新生儿群体中，用快速、简便、敏感的检验方法，对一些危及儿童生命，危害儿童生长发育，导致儿童残疾的一些先天性疾病、遗传性疾病进行群体筛检，从而使患儿在临床上尚未出现疾病表现，而其体内生化、代谢或者功能已有变化时就作出早期诊断，并且结合有效治疗，避免患
15、儿重要脏器出现不可逆性的损害，保障儿童正常的体格发育和智能发育，提高出生人口质量。,新生儿疾病筛查,新生儿遗传 代谢病筛查,避免生长发育障碍,早期确诊早期治疗,进行群 体筛检,先天性疾病遗传代谢性疾病,用快速、简便、敏感的检测方法,新生儿群体,新生儿疾病筛查,意义：对危害严重的先天性、遗传性代谢病，在新生儿早期， 临床症状未表现之前进行普查，通过及时治疗，避免或 降低智能落后及残疾发生新生儿疾病筛查是当今国际上早期发现遗传病患儿的有效措施，在降低出生缺陷的三级预防措施中， 新生儿疾病筛查是预防效果显著， 成本效益最好的一项措施,选择筛查的疾病一般符合以下几个标准,疾病危害严重 有一定的发病率
16、疾病早期无特殊症状，但有 实验室指标能显示阳性 有可靠的、适合于大规模进行 的筛查方法 筛查疾病可以治疗 筛查费用低廉,我国新生儿疾病筛查疾病谱,先天性甲状腺功能减低症（CH）苯丙酮尿症（PKU）先天性肾上腺皮质增生症（CAH）半乳糖血症G-6-PD缺乏症听力筛查其他遗传代谢性疾病,新生儿疾病筛查历史,六十年代 Guthrie 教授 细菌抑制法 PKU 新生儿疾病筛查历史以苯丙酮尿症筛查为起点七十年代 放射免疫分析法 CH 日本采用滤纸血片测定新生儿TSH，筛查先天性甲低八十年代 酶联免疫法 荧光法 发达国家大都建立了较完善的体系，把新生儿筛查 纳入国家卫生管理，覆盖率接近100%九十年代 W
17、allac发明时间分辨荧光免疫技术2000年后 串联质谱技术（MS/MS）应用于新生儿疾病筛查,1970,1980,1990,2000,2001,2010,新生儿疾病筛查技术的发展趋势,传统技术筛查,串联质谱技术是后基因时代对功能性蛋白检测、研究的有效手段,检测方法,时间分辨荧光分析法 促甲状腺素(TSH) 17-羟孕酮(17-OHP)荧光分析法 苯丙氨酸(Phe) 葡萄糖-6-磷酸脱氢酶（G-6-PD),串联质谱新生儿筛查(氨基酸、有机酸、脂肪酸),串联质谱新生儿筛查基本原理,质谱法将被测物质离子化，按离子的质荷比分离，测量各种离子谱峰的强度而实现分析目的的一种分析方法 串联质谱两级质量分析
18、器（MS1和MS2）串联形成的二级质谱技术 检测指标滤纸干血片中的血中氨基酸、游离肉碱和酰基肉碱水平,仪器控制及数据处理系统,1525 二元梯度高效液相泵,2777c高通量样品管理器,Acquity TQD串联四级杆质谱仪,串联质谱新生儿筛查的特点,串联质谱筛查-关键部分,标本采集样品制备及标准品与质控串联质谱仪器检测分析结果解释报告,新生儿遗传代谢病筛查的质量控制,确保新筛实验顺利进行,确保筛查数据准确可靠,确保及时发现可疑样本,筛查网络,分析前质量控制样品采集,采血时间管理出生72小时后、7天之内，并充分哺乳各种原因（早产儿、低体重儿、正在治疗疾病的新生儿、提前出院者等）未采血者，采血时间
19、一般不超过出生后20天采血人员要求医学相关的中专以上学历，从事医学临床工作2年以上接受相关知识和技能的培训并取得技术合格证书每年开展质控员会议, 加强技术培训和督导,分析前质量控制样品采集,采血工作质量管理血片滤纸与试剂盒标准品、质控品血片所用滤纸一致均为S&S 903滤纸遵循血片采集规范，一人一针自然渗透，至少采集3个血斑临床高危患儿：叮嘱临床治疗干预前采血,分析前质量控制样品采集,血片质量管理信息完整自然晾干，避免污染自然渗透，滤纸正反面血斑一致血斑直径大于8毫米，无污染，无渗血环,分析前质量控制样品转运,及时递送，不超过5个工作日使用专用物流，冷链运输不可与化学品及其他类型的标本在同一容
20、器装运。,包装应不会导致滤纸压缩按照血源性传染病标本对待特殊传染病标本应当作标识并单独包装。（生物安全标识包装）,分析前质量控制样品验收,信息录入,检查血片质量检查采血时间检查信息完整,退片重采补全信息,样品编号 待检测,合格,不合格,分析后质量控制实验结果分析,实验数据审核质控检查数据检查结果判读阳性截断值设置 根据60万新生儿筛查数据计算所得，并定期校验 超出预设的截断值即视为初筛阳性，实验室应对原血片复查两次实验结果均为阳性的，应立即电话召回患儿重新采样或做确诊实验,分析后质量控制临床医生审核,新筛结果处理阳性报表判读阳性召回确认召回阳性病人确诊试验、出具诊断性报告，与临床实验室沟通分析
21、评估确诊阳性患儿治疗随访，建立病历档案（电子档案）排除可疑婴儿，结果存档备查,串联质谱开展情况,美国、一些欧洲国家、加拿大、澳大利亚、日本、韩国、台湾等已使用串联质谱技术扩大了新生儿疾病筛查的种类国内上海、浙江、广东等多地开展扩展遗传代谢病筛查和临床诊断手段，包括氨基酸代谢病、脂肪酸氧化代谢病和有机酸代谢病,美国健康与人类服务部公布新生儿疾病筛查病种研究报告（2006年）,2006年，美国医学遗传学会在对新生儿疾病筛查的效果进行分析的基础上，公布了新生儿疾病筛查：朝着统一病种和统一系统努力的研究报告 Neonatal Screening Toward a Uniform Screening P
22、anel and System ,串联质谱开展情况,利用专家意见和文献评阅方法对84种新生儿先天性疾病的重要程度进行了评分 筛查实验有无 筛查出疾病是否有有效治疗方法 是否对疾病自然史有比较透彻理解 该疾病是否是另一种疾病鉴别诊断一部分 筛查实验是否与某一严重疾病有关首要筛查疾病29种，次要筛查25种，现阶段不宜筛查的疾病30种,在29种首要筛查疾病中，9种属于有机酸代谢疾病，5种属于脂肪酸代谢疾病，6种属于氨基酸代谢疾病，3种属于血红蛋白病，6种其他不同类型的疾病29种疾病中的22种需通过MS/MS检测核心名单中的29种疾病都有以下相似点： 有特异、敏感的筛查检测方法 清楚了解疾病的自然进程
23、 有有效的治疗方法,MCAD举例,2001年，美国只有6个州筛查MCAD，40万新生儿中发现 16例，比例为千分之0.039至2006年，此病筛查扩大到超过半数的 州，筛查超过350万新生儿，发现 222例病人，发现比例上升至千分之0.063筛查推广后，死亡率从不知情时的25% 下降至知道后的接近零,可以和正常孩子一样生活,首发症状为“猝死”,确诊后保证及时进食，避免因饥饿动员身体里的脂肪酸代谢,遗传性代谢病,遗传性代谢病（Inborn Errors of Metabolism, IEM） ：是 遗传性生化代谢缺陷的总称。由于基因突变导致蛋白质分 子在结构上发生缺陷，或者在蛋白质合成、分解速度
24、上有 异常，使得蛋白质功能发生改变，导致出现相应的病理生 理改变和临床表现。 目前针对该类疾病没有有效的预防方法。但通过早期筛查、诊断后对症治疗处理，可以逆转或减慢疾病发展，或者改善其预后。因此，早期诊断至关重要。,病理生理改变特征,某些代谢途径的终末产物缺乏，如过氧化酶体病、溶酶体病等受累代谢途径的中间产物或旁路代谢产物增加，如PKU,MMA某些代谢途径受阻，引起组织功能不足，如糖代谢障碍，线粒体病等物质的生物合成障碍，如21-羟化酶缺乏致皮质醇合成障碍造成先天性肾上腺皮质增生症（CAH)物质转运功能障碍，如肾小管性酸中毒,Archibald E. Garrod,1908年 Garrod I
25、EM 概念单基因缺陷所致代谢通路阻断目前已发现500余种疾病80%属常染色体隐性遗传单病发生率低，群体患病率高基因突变与临床表型复杂多样表现非特异性，有赖遗传学或生化方法确诊及时诊断处理，挽救生命，减少伤残系谱分析，遗传咨询，优生优育,遗传代谢病的分类,生 化 物 质 疾 病 举 例 糖代谢障碍 半乳糖血症、G6PD缺乏症、糖原累积病 氨基酸代谢障碍 苯丙酮尿症、枫糖尿症、酪氨酸血症等 尿素循环代谢障碍 各型先天性高氨血症 有机酸代谢障碍 丙酸血症、甲基丙二酸血症、异戊酸血症 线粒体代谢障碍 高乳酸血症、线粒体脑病、线粒体肌病 核酸代谢障碍 着色性干皮病 金属元素代谢障碍 肝豆状核变性 内分泌
26、代谢障碍 先天性肾上腺皮质增生症 维生素代谢障碍 遗传性维生素D依赖性佝偻病 溶酶体沉积病 粘多糖病 其他 胆红素等,家族史,父母近亲婚配 同胞不明原因病史（“脑病”、“败血症”） 同胞不明原因死亡 家族性疾病（进行性神经病变、营养障碍） 母亲多次自然流产史,临床表现及病史,总 的 临 床 特 征,发病时期：多在新生儿期、幼儿或儿童期发病，某些可至成人期开始发病发病形式： 新生儿、婴儿早期急性起病，常于生后2、3日起出现哺乳困难、 反应差、呼吸急促，惊厥、呕吐、意识障碍等 儿童期发病：可表现为全身多器官受累，以神经肌肉系统、 呼吸系统、消化系统等症状为主。乏力、智力发育落后、 肌张力增高或降低
27、、癫痫、黄疸、肝脾肿大、呼吸困难、 代谢性酸中毒、容貌异常、毛发皮肤色素改变、特殊体味等 饮食、应激反应、体能消耗等为疾病急性发作诱因,临 床 特 征-神经系统损害,几乎所有遗传代谢病都有不同程度神经系统症状智力运动落后或倒退惊厥意识障碍，严重时昏迷部分疾患伴有小脑、椎体外系、脊髓或外周神经损害精神行为异常：烦躁、多动、孤独症倾向肌张力异常,代谢紊乱 每类疾患均有其特异的代谢改变 如： 有机酸尿症 低血糖、代谢性酸中毒、高氨血症等 消化系统 长期食欲不佳、喂养困难、慢性呕吐（与进食蛋白有关）、肝功 能不全或肝脏肿大 如： 瓜氨酸血症II型 肝内胆汁淤积综合征 肌肉及其他脏器受损 肌张力低下、进
28、行性肌病、心肌及肾脏受损 如： 同型半胱氨酸血症 晶体脱位、骨骼发育异常和血管损害,临 床 特 征,特殊气味 枫糖尿症 尿带甜味 异戊酸血症 汗脚味 苯丙酮尿症 鼠尿味 皮肤、毛发异常 毛发色素减少：PKU，IVA，同型半胱氨酸血症 湿疹，口角糜烂及脱发: 生物素酶缺乏症容貌及五官畸型 甲基丙二酸尿症某些类型 容貌异常 脂肪酸代谢病 听力障碍 戊二酸尿症 型 大头 同型半胱氨酸血症 眼部异常(角膜浑浊，白内障， 青光眼，晶体半脱位),临 床 特 征,临床调查，发现高危儿,一般检查尿常规、血常规、电解质、肝肾功能、心肌酶谱、血气分析、脑电图、脑CT、磁共振成像,一般代谢检查血糖、血氨、血乳酸、丙
29、酮酸、酮体,特殊检查 血苯丙氨酸负荷试验 ，尿喋呤谱分析，同型半胱氨酸测定 ，生物素及生物素酶测定，肉碱谱分析，氨基酸分析，GC/MS ， MS/MS， 组织活检、酶活性测定、DNA分析,诊断流程,氨基酸代谢病(amino acid disorder),疾 病 分 析 物1) PKU(苯丙酮尿症) Phe, Tyr2) Tyrosinemia（酪氨酸血症） Tyr3) MSUD（枫糖尿病） Leu/Ile, Val4) Homocystinuria（高胱氨酸尿症） Met5) Citrullinemia（瓜氨酸血症） Cit6) Argininemia(精氨酸血症) Arg 7) Hypera
30、mmonemia(高氨血症) Orn,疾 病 分 析 物1) GA-I（戊二酸血症I） C5DC2) PA（丙酸血症) C3 ，C3/C2 3) MMA(甲基丙二酸血症) C3，C3/C2 ,C4DC4) IVA（异戊酸血症） C55) 3-MCC(3-甲基巴豆醯輔酶羧化酶缺乏症 ) C5OH 6) HMG(3-羥基-3-甲基戊二酸症) C5OH 7) EA(乙基丙二酸血症) C4，C5 8) MA（丙二酸血症） C3DC 9) 异丁酰基CoA 脱氫酶缺乏症 C4,有机酸代谢病,疾 病 分 析 物1) MCAD（中链酰基-辅酶A脱氢酶缺乏） C6, C8, C10, C10:1, 2) VLC
31、AD C14, C14:1, C163) SCAD C4, C64) LCHAD(长链羟酰基-辅酶A脱氢酶缺乏） C16OH, C18OH, C18:1OH5) TFD(三功能蛋白缺乏） C16OH, C18OH, C18:1OH6) CPT I H: C0 L: C16，C187) CPT II(肉碱棕榈酰基转移酶缺乏） C16, C18, C14 8) CUD(肉碱吸收障碍） C0，C2 (lower),脂肪酸氧化代谢病（fatty acid oxidation disorder）,串联质谱技术检测遗传代谢病,苯丙酮尿症高胱氨酸尿症枫糖尿症酪氨酸血症,瓜氨酸血症 精氨酸血症 高氨血症,10
32、种,串联质谱技术检测遗传代谢病,戊二酸血症型 甲基丙二酸血症 丙酸血症 异戊酸血症,3-甲基巴豆酰辅酶羧化酶缺乏症 3-羟基-3-甲基戊二酸尿症 三功能蛋白缺乏症 乙基丙二酸血症 丙二酸血症 异丁酰基辅酶A 脱氢酶缺乏症,串联质谱技术检测遗传代谢病,极长链脂肪酸代谢异常 长链脂肪酸代谢异常 中链脂肪酸代谢异常 短链脂肪酸代谢异常,肉碱穿透障碍肉碱结合酶缺乏症型 肉碱结合酶缺乏症 型 肉碱吸收障碍 戊二酸血症型,10种,IEM治疗原则,治疗的关键是尽早发现、尽快治疗 新生儿筛查早期发现、早期治疗，防止脑损伤 总原则：禁其所忌，去其多余，补其所缺 治疗方法：代谢水平、蛋白质水平和基因水平 对不能除
33、外遗传代谢病的昏迷、抽搐、黄疸、呕 吐患儿慎用白蛋白、丙种球蛋白、氨基酸、脂肪 乳及脑蛋白水解液等制剂，以免加重病情，甚至 导致死亡,治疗基本方法,减少毒性物质来源，减少蓄积 - 饮食治疗：特殊饮食清除代谢毒物 - 维生素B12 - 甲基丙二氨酸尿症 - 左旋肉碱 - 清除有机酸补充生理活性物质 - 左旋肉碱：促进脂肪酸、有机酸、糖代谢 - 生物素：几种羧化酶的辅酶酶替代治疗 - 溶酶体病干细胞移植、器官移植基因治疗,高苯丙氨酸血症（HPA） 血苯丙氨酸浓度120mol/L（2mg/dl）HPA的类型1、苯丙氨酸羟化酶（PAH）缺乏 经典型PKU：血Phe1200mol/L（20mg/dl）
34、轻度PKU：血Phe 360-1200mol/L（6-20mg/dl） 轻度HPA：血Phe360mol/L（6mg/dl）2、PAH辅酶-四氢生物蝶呤（BH4）缺乏,苯丙酮尿症筛查,苯丙酮尿症（phenylketonuria, PKU),发病机理：Phe是人体必需氨基酸，食入体内的Phe一部分用于蛋白质的合成，一部分通过PAH羟化作用转变为酪氨酸，仅有少量的Phe经过次要的代谢途径在转氨酶的作用下转变成苯丙酮酸。 PKU患者由于PAH基因突变导致PAH活性降低或丧失，酪氨酸和正常代谢产物减少，血Phe含量增加，刺激转氨酶发育，次要代谢途径增强，生成苯丙酮酸、苯乙酸、苯乳酸等。 智力低下、行为
35、异常和癫痫是本病的主要症状。,苯丙氨酸代谢异常途径,苯丙酮尿症筛查,典型PKU临床特点出生3个月出现症状发黄、皮肤颜色浅淡尿、汗等分泌物有鼠臭味智能发育落后伴有点头样或婴儿痉挛样抽痉,苯丙酮尿症筛查,BH4缺乏症的临床特点PKU一般的临床表现躯干肌张力低下，瘫软，眼睑下垂，嗜睡，表情淡漠顽固性抽痉，口水多智能障碍，严重小头畸形,苯丙酮尿症筛查,苯丙酮尿症遗传特点,常染色体隐性遗传性疾病 PAH基因上发生突变 患儿父母都是致病基因携带者（杂合子） 患儿从父母各得到1个致病基因，是纯合子 患儿母亲每次生育有1/4可能为PKU患儿 近亲结婚的子女发病率较一般人群为高 致病基因在常染色体上，男女发病机
36、会均等,苯丙酮尿症临床表现和诊断,出生时正常，新生儿期无明显特殊的临床症状，部分患儿可能出现喂养困难、呕吐、易激惹等现象，未经治疗的患儿3-4个月后逐渐表现出症状。随着年龄增长，患儿智力低下越来越明显，年长儿60%有严重的智能障碍。2/3患儿有轻微的神经系统体征，约1/4患儿伴有癫痫发作，常在18个月龄前出现。 症状除智力低下外，经饮食治疗及纠正苯丙氨酸浓度后，均可恢复正常或好转，只有早诊断、早治疗，才能预防智力低下的发生。诊断：新生儿疾病筛查是早期诊断的有效方法。全球已有数以千万计的新生儿接受了PKU的筛查，数千名患儿得到了早期诊断和及时治疗，避免或减轻了智力发育障碍。,苯丙酮尿症治疗和预后
37、,饮食治疗：1953年德国Bickel医生首先应用低苯丙氨酸饮食疗法治疗本症获得成功。治疗原则是即控制患儿食物中Phe摄入量，将血Phe水平控制在理想范围内，又要提供足够的蛋白质、热卡及其他各种营养素，以保证患儿体格和智能的正常发育，只能使用含低或无Phe的特殊奶粉。酶的治疗基因治疗,新生儿筛查是医学基因组学的典范,数量最大的遗传学检测项目可在新生儿发病前，通过群体筛查检测出疾病，并且通过饮食治疗或者药物治疗，纠正代谢异常可以使疾病预测，发病前诊断可以预防，通过干预预防发病基因组医学已经成为生化遗传的一部分，推动了对以前认为是不治之症的遗传性代谢病治疗和预防,结 论,遗传代谢病并不少见，需要足
38、够重视诊断需结合临床、一般实验室、一般代谢实验室检 查 及特殊代谢检查部分疾病仅需串联质谱或气相质谱结果即可诊断，部分疾病需要串联质谱或气相质谱(氨基酸测定）2种技术结合分析才能诊断串联质谱检测的疾病大部分可以治疗，且效果较好，早期的诊断和治疗可降低死亡率和致残率,结 论,串联质谱检测采用干血滤纸片法，具有快速、特异、灵 敏的优点，符合新生儿遗传代谢病筛查的技术要求，可用于新生儿遗传代谢病筛查由于疾病本身的空窗期，所以当特殊代谢检查结果阴性时不代表未来没问题，当孩子临床表现及一般实验室检查提示身体出现状况时，需多次相应检查排外IEM筛查阳性结果不一定真正阳性，新生儿会出现暂时性阳性结果,参考书,谢 谢！,我们要健康，做更多的疾病筛查！,
