1、临床意义及开发方案,乙肝病毒耐药基因检测试剂盒,临床意义,概况耐药情况耐药处置市场容量市场分析开发方案,临床意义-概况,目前国内97.3%的肝病患者长期不能得到正确有效的治疗。核苷类药物是乙肝主要治疗药物。个别种类核苷类物药耐药比例较高（连续服用拉米呋啶药物一年耐药率超过20%）204与180等位点耐药突变之后，会加大其它药物的耐药突变机率。治疗初期了解病人基本耐药位点突变情况，有利于正确确立治疗方案,临床意义-耐药情况,拉米呋啶（一年耐药率20%,五年耐药70%）替比呋啶（一年耐药率7%）恩替卡韦（一年耐药率2%,三年耐药约17%）阿德福韦酯（一年耐药率1%,五年耐药29%）替诺福韦酯（一年
2、耐药率1%）恩曲他滨（一年耐药率1%）,临床意义-耐药处置,因前期用拉米呋啶类药物产生耐药而转用恩替卡韦等非呋啶类药物时，会因为基因屏障被打破而大幅度加大恩替卡韦类药物的耐药机率。故对临床医生来讲，从病人开始治疗就知道其乙肝耐药基因突变情况，对其正确确立治疗方案意义重大。相关检测产品是其日常工作中需要的有意义的工具。,临床意义-市场容量,2000万,300万,40万,4 万,1000万,全国HBVPCR总测试数,慢性乙肝病人数,需要药敏实验的例数,现存乙肝耐药检测数,现存测序法检测乙肝耐药测试数,临床意义-市场分析,如上图，因耐药无法进行正确治疗而不得不做测序检测的测试数现存4万例每年（无证状
3、态）因耐药无法进行正确治疗而不得不做耐药检测的测试数现存40万例每年（两家公司有证，非主营产品）理论值，需要药敏实验的乙肝病人300万每年每人需要做两次耐药检测，即有600万测试每年按每测试150元出货到渠道的价格来算，总体市场容量有9亿人民币。,试剂盒开发方案,开发方案-原理与流程,核酸提取,柱式,磁珠法,核酸提取,柱式,磁珠法,PCR扩增,引物设计,纯化,测序反应,Sanger法,纯化,上机测序,3500Dx,数据分析,开发方案,方案一设计思路因主要几种药物的耐药位点都集中在P区，故方案一中，会选取P区相应区域进行测序检测。达到相关耐药检测需要。覆盖6种市场上主流乙肝治疗药物的耐药基因突变
4、位点立菲达安方案按照现有医疗收费物价体系，该方案可收费600-1200元（即按照1-2个测序收费）,方案一,测序片段的选择：选取P区包括204，180等热点位点的片段，进行引物设计，预设多套引物方案，选取综合效率最高组。核酸提取：DNA提取采用成熟技术。（柱式）反应体系优化：包括Taq酶的选用，缓冲体系的选择，相应离子浓度的调节等。,相关指标,产品名称：乙型肝炎病毒耐药基因突变检测试剂盒包装规格：20人份/盒用途：本试剂盒适用于定性检测HBV患者血液中HBV耐药基因突变，并判断因突变导致的耐药情况。主要组分：DNA提取试剂（成熟技术柱式），PCR检测试剂（引物，盐酸，酶等），产物纯化试剂（建议
5、用户现配现用），质控品（阴性质控，阳性质控等），测序试剂（Bigdye，Hi-Di等）。适用标本类型：血清或血浆采用20ul反应体系。,相应成本初测,以单次生产5000人份试剂为例（不同品牌原料成本有差异）DNA提取试剂（成熟技术柱式），约1万元-5万元PCR检测试剂（引物，盐酸，酶等），约2000元-2万元纯化试剂（建议用户现配现用），约200元-2万元质控品（阴性质控，阳性质控等），约1800-3000元测序试剂（Bigdye，Hi-Di等）。约1万2-12万元采用20ul反应体系。约2000元包装，人工，杂费。约5000-1万元即确认不同品质水准的试剂制造方针后，单次生产5000人份试剂
6、的成本在3万3-22万5之间。分摊到每个测试成本为6.6元-45元。,成本分析,由上可知，工业成本+基本生产成本分摊到5000人份试剂生产之时，成本为6.6元-45元每个测试。经验得知，成本在10元左右的成本是可以实现临床基本稳定使用的方案，18元左右的成本是可以实现临床无障碍使用的方案。成本从25元开始到45元或以上没有显著检测品质提升。建议方案采用20元工业成本的方案。也可适当加大每次生产规模压低成本。,开发方案,方案二设计思路除P区外，C区的基因突变检测可以指导干扰素在乙肝治疗过程中的应用。在部分临床医师治疗过程中也会做相应关注。此方案会选取C区和P区相应序列进行测序检测。相比立菲达安方
7、案，测序区域更大，检测位点更多，除了方案一中的6种药物，还可指导干扰素在乙肝治疗的应用按照现有医疗收费物价体系，该方案可收费1200-1800元（即按照2-3个测序收费）,方案二,测序片段选择：选取P区包括204，180等热点位点的片段，C区对干扰素敏感的片段进行引物设计，预设多套引物方案，选取综合效率最高组。核酸提取：DNA提取采用磁珠法提取（便于以后自动化集成）反应体系优化：包括Taq酶的选用，缓冲体系的选择，相应离子浓度的调节等,相关指标,产品名称：乙型肝炎病毒耐药基因突变检测试剂盒包装规格：20人份/盒用途：本试剂盒适用于定性检测HBV患者血液中HBV耐药基因突变，并判断因突变导致的耐
8、药情况。主要组分：DNA提取试剂（成熟技术磁珠法），PCR检测试剂（引物，盐酸，酶等），产物纯化试剂（建议用户现配现用），质控品（阴性质控，阳性质控等），测序试剂（Bigdye，Hi-Di等）。适用标本类型：血清或血浆采用20ul反应体系。,相应成本初测,以单次生产5000人份为例DNA提取试剂（成熟技术磁珠），约3万元-15万元PCR检测试剂（引物，盐酸，酶等），约4000元-4万元产物纯化试剂（建议用户现配现用），约200元-2万元质控品（阴性质控，阳性质控等），约1800-3000元测序试剂（Bigdye，Hi-Di等）。约1万2-12万元采用20ul反应体系。约2000元包装，人工，杂
9、费。约5000-1万元即确认不同品质水准的试剂制造方针后，单次生产5000人份试剂的成本在4万8-34万5之间。分摊到每个测试成本为9.6元-69元。,成本分析,由上可知，工业成本+基本生产成本分摊到5000人份试剂生产之时，成本为9.6元-69元每个测试。经验得知，成本在15元左右的成本是可以实现临床基本稳定使用的方案，25元左右的成本是可以实现临床无障碍使用的方案。成本从40元开始到69元或以上没有显著检测品质提升。建议方案采用30元工业成本的方案。也可适当加大每次生产规模压低成本。,成本比较,和目前市面已经获CFDA认证的试剂相比，两套方案中的建议方案的成本均低于已获证试剂方案。,开发费用与其他,产品开发方案结果仅为试剂盒组份配方、实验操作说明等书面材料，不包括试剂盒外包装。开发费用： 方案二：总研发费用100万，启动资金和尾款各50万，周期2个月，付款条件同方案一,thanks,
