1、,尿液检验,福建医科大学省立临床医学院 临床检验基础教研室 陈金花,第五章 尿液一般检验,尿液分析的组成,第三节、尿液分析仪检查,一 、 尿干化学分析仪,尿干化学分析仪又称尿液分析仪,是用干化学方法检测尿中某些成分,有半自动和全自动两类,“浸入即读”,操作方便、测定快速、结果准确、目测自动化兼宜。,尿中化学成分使试剂膜块颜色变化,在比色槽中受光源照射后产生反射光,该原理的本质为光的吸收和反射。,(一) 酸碱度pH,酸碱指示剂法,检测范围为pH4.5-9.0 1.了解体内酸碱平衡情况,监测泌尿系统患者临床用药情况。2.了解尿pH变化对试带上其它膜块区反应的干扰作用。,(二)比密:,多聚电解质离子
2、解离法 1.了解尿液中固体物质的浓度,估计肾脏的浓缩功能。2.pH7.0,结果应增加0.005。3.蛋白或糖浓度增加使结果增加,尿素10g/L或pH6.5使结果减低,(三) 尿糖:,葡萄糖氧化酶-过氧化物酶法 1.只与葡萄糖起反应2.假阳性: 被过氧化物、次氯酸盐、强氧化性清洁剂污染3.假阴性:Vit C500mg/L、 酮体0.4g/L、 尿比重过高.,(四)蛋白质,pH指标剂蛋白质误差法 1.仅对清蛋白敏感,对球蛋白不敏感(1/50100),本周蛋白假阴性2.pH9可假阳性,pH40%,二 流式尿有形成分分析,尿有形成分分析仪能解决的问题1、快速筛选2、荧光染色能检出破碎、变形细胞,3、可
3、以质控4、定量准确5、新参数,22,UF-100/UF-50检测原理,23,脉冲信号处理过程,24,测量信号,测量参数,UF-100检测流程,25,流式细胞术分析,前向散射光由共振发出的二次光波组成与颗粒直径和入射光波长有关前向散射光强度Fsc细胞膜横切面大小前向散射光脉冲宽度Fscw细胞长度,前向荧光与细胞膜、核膜、线粒体、DNA有关前向荧光强度FL细胞染色程度前向荧光脉冲宽度Flw细胞染色部分长度,26,9-氮杂菲(Phenanthridine)(菲啶)染色DNA和RNA发射荧光为: 橙色对死细胞胞膜穿透性强羧花青(Carbocyanine)细胞膜、核膜以及线粒体等膜性物质被染色发射荧光为
4、:绿色,UF-100/UF-50 检测原理,SYSMEX,27,LASER,Flowcell,Intensity of signal,SYSMEX,28,LASER,Flowcell,Intensity of signal,SYSMEX,29,LASER,Flowcell,Intensity of signal,SYSMEX,30,LASER,Flowcell,Intensity of signal,SYSMEX,31,LASER,Flowcell,Intensity of signal,SYSMEX,32,LASER,Flowcell,Intensity of signal,SYSMEX,3
5、3,LASER,Flowcell,Intensity of signal,SYSMEX,34,LASER,Flowcell,Intensity of signal,SYSMEX,35,LASER,Flowcell,Intensity of signal,SYSMEX,36,LASER,Flowcell,Intensity of signal,SYSMEX,37,LASER,Flowcell,Intensity of signal,SYSMEX,38,Intensity of signal,FL,Fsc,FL:Intensity of stainFLW : Length of stained p
6、art,FSC:Size of particleFSCW : Length of particle,SYSMEX,39,信号分析,Fsc,FL,FLLW2,FLLW,Path.CAST 病理管型的检测,40,分析流程,1. 尿中颗粒分成2类: 红细胞、白细胞细菌分布在Fsc和FL的散点图上 管型和上皮细胞分布在Fscw和Flw的散点图上2. 显示屏上显示2幅散点图和5种有形成分计数结果,以定量和定性方式报告结果,41,分析参数,红细胞红细胞没有核,所以荧光染色很弱分布在散点图上的低荧光区域分析血尿来源,42,43,红细胞信息 RBC- Information,形态均一性红细胞,Isomorph
7、ic,44,红细胞信息 RBC- Information,形态非均一性红细胞,Dysmorphic,2009-4-16,Sysmex Corporation (IHQ),红细胞信息 提示的产生过程,RBC-P70 Fsc: 反映红细胞大小,2009-4-16,Sysmex Corporation (IHQ),红细胞信息 提示的产生过程,RBC-Fsc DW: 反映红细胞大小变化,2009-4-16,Sysmex Corporation (IHQ),信息提示分析图,小细胞,正常大小细胞,红细胞信息 提示的产生过程,2009-4-16,Sysmex Corporation (IHQ),正常红细胞?
8、,亮视野显微镜法,Fsc/Fl散点图,2009-4-16,Sysmex Corporation (IHQ),正常红细胞?,2009-4-16,Sysmex Corporation (IHQ),小红细胞?,Fsc/Fl 散点图,暗视野显微镜法,2009-4-16,Sysmex Corporation (IHQ),小红细胞?,RBC Fsc 直方图,2009-4-16,Sysmex Corporation (IHQ),未分类?,Fsc/Fl 散点图,暗视野显微镜法,2009-4-16,Sysmex Corporation (IHQ),未分类?,RBC P70 Fsc,红细胞信息判断,用于鉴别血尿来
9、源,Dysmorphic?非均一型小红细胞,红细胞形态信息对肾内科诊断很有价值,Dysmorphic?非均一型小红细胞,分析参数,白细胞 白细胞形态变化很大,所以Fsc和FL分布变化很大。 活的白细胞,染色淡,体积和密度比较恒定,分布在散点图高Fsc和低FL区域 受损的或死亡的白细胞,染色深,分布在散点图低Fsc和高FL区域,FL2,Fsc,WBC,分析参数,细菌(BACT) 细菌体积小,染色性强,分布在散点图低Fsc和高FL区域。 死细菌的染色性较强,荧光较强体积小细菌(球菌)由H-BACT参数表示,Fsc,分析参数,管型 透明管型(CAST)内含物很少,荧光染色很弱。 病理性管型(Path
10、.CAST):含上皮细胞、白细胞、颗粒或其它内含物管型和蜡样管型,染色力较强,分布在散点图高Fscw和高Flw区域。,Fscw,Flw,Path.CAST,CAST,分析参数,上皮细胞(EC)1.鳞状上皮细胞体积大,核密度和白细胞类似,分布在散点图低Fscw和高Flw区域2.移行上皮细胞和鳞状上皮细胞一样,分布在低Fscw和高Flw区域3.肾小管上皮细胞或小圆上皮细胞,与白细胞类似,部分分布在低Fscw和高Flw区域,Fscw,Flw,分析参数,结晶(XTAL)结晶分布在比红细胞更低Fsc和低FL区域草酸钙结晶,分布在散点图低Fsc和低FL区域3.尿酸结晶比草酸钙结晶大,分布在较高Fsc区域,Fsc,分析参数,酵母样菌和精子(YLC、SPERM)1.酵母样菌分布在散点图红细胞和白细胞区域之间2.精子染色性和酵母菌类似,分布区域类似,但Fsc比酵母样菌小,Fscw比酵母样菌大,Fsc,(YLC/SPERM),WBC,RBC,BACT,CAST,(Path.CAST),EC,(SRC),通过Fsc 和 Fl 的信号进行分类,问题思考,1、试述UF-100的检测原理。2、试述UF-100如何区分血尿的来源。,呵护肾脏大自然神奇的馈赠,,Thank You !,