1、浅谈临床对ASC-US病人的管理 -子宫颈癌E6/E7癌基因筛查,2014.06.16,目录,病例分析1-30岁已婚女性,2013.12.3体检： E6/E7mRNA(+) 低度风险,未进行干预性治疗，3个月复查,2014.3.25 细胞学：ASC-US E6/E7mRNA(+) 高度风险,术后病检结果：宫颈1点、6点慢性宫颈炎，部分区域呈湿疣性改变；12点处小灶区域CIN2,LEEP,病例分析2-50岁已婚女性,2007年前绝经，后无阴道异常排液、出血及白带中带血等不适，就诊前10天无诱因出现阴道出血，量少（每天护垫一张），色鲜红，有异味。,2013.12.9 门诊细胞学及B超检查，同时病人
2、自行口服妇炎康胶囊。2天后，出血少但仍腰骶部疼痛，无尿频、排尿困难、畏寒、发热等症状。,细胞学检查ASC-H,E6/E7mRNA(+) 高风险，B超结果示子宫内膜厚0.6cm,行子宫+双附件+盆腔淋巴结切除术,术后病检结果：宫颈非角化鳞状细胞癌，癌灶环状累及宫颈1/2周（癌灶最大径约2.5cm），间质浸润深约0.8cm，水平扩散约2cm，可见脉管癌栓；萎缩性子宫内膜。阴道断端部分区域VIN；,病例分析小结,2例ASC细胞学结果的病人，都在接受干预性手术前筛查过癌基因E6/E7mRNA检测，及早的发现了癌前病变。我们乐见病人的细胞学筛查管理又多了一个高特异性的分流手段，通过进一步的筛查确认，尽量
3、采取保守的干预治疗手段，从而大大提高了患者的生活质量。,目录,E6/E7mRNA是癌基因致癌活动的必由之路,E6/E7癌蛋白: 外源性高危HPV病毒核酸片段插入正常人类基因组引入的癌蛋白；E6蛋白能与人体自身抑癌蛋白P53结合，而E7癌蛋白能与另一种人体抑癌蛋白Rb结合，二者综合作用导致细胞分裂机制的破坏，进而引起宫颈基底层细胞无限制恶性增生,HPV致癌过程图示：,E6/E7mRNA是癌基因活跃的直接产物,E6/E7 mRNA检测： 提示病毒癌基因转录表达情况。 评估宫颈癌变的风险与发展趋势；,明确锁定关键风险因素：活跃的HPV癌基因,E6/E7mRNA检测意义,HPV E6/E7mRNA在宫
4、颈组织中表现癌基因活性，是宫颈癌变开始和进展的必要条件。E6/E7癌基因E6/E7mRNA筛查对于常规细胞学束手无策的ASC-US病人拥有更高的特异性检出率。E6/E7 mRNA与子宫颈癌癌前病变程度呈正相关。,E6/E7mRNA检测意义,E6/E7 癌基因筛查： 相较于液基细胞学筛查又积极了一些， 相比于HPV DNA检测，E6/E7mRNA癌基因检测又更为保守一些。感染了HPV并不一定会患宫颈癌： E6/E7mRNA大大削减了女性患者在接受治疗时的心理压力。,我院1-4月份门诊数据分析,共1629例进行 E6/E7 mRNA检测，30岁以下的女性有691例，占总量的42.4%。共59例进行
5、了组织学诊断，其中细胞学ASCUS女性有10例，占总量的16.9%。细胞学ASCUS的10例患者： 30岁以下的女性有5例； HPV E6/E7 mRNA检测阳性的有9例。细胞学ASCUS且E6/E7 mRNA（+）的9例： CIN1的女性有3例，CIN2+的女性有2例，鳞状细胞癌的女性有1例。,病例所用E6/E7mRNA检测介绍,HPV癌基因E6/E7mRNA检测试剂盒（宫颈稳态检测试剂盒）检测靶标：WHO公布的14种高危HPV的癌基因E6/E7的转录 产物-E6/E7mRNA。检测技术：分支链DNA(b-DNA) 德国西门子的核心专利技术； 无需检测靶标的扩增，而是对检测信号进行放大。,A
6、mplification calculation: amplifier no. (6,20) x label probe no. (4; 20) x tree no. (3; 6-8),实验原理（分支链DNA技术,branched DNA, bDNA),检测优势： 1、无需PCR实验室, 可做分子检测实验。 2、检测准确：无需靶标的提取、纯化、反转录、扩增，特 异性探针捕获靶序列后，仅进行信号级联放大，检测更 准确。 3、操作相对简单：细胞裂解后，直接加入探针，进行靶标捕获、 信号放大后，通过仪器读取数据。 4、检测标本多样：细胞样本（单独取样、TCT剩余标本等） 组织样本（石蜡切片、新鲜组织
7、等）。 5、临床使用范围广：可用于宫颈癌变的早期筛查、辅助诊 断、术后随访。,病例所用E6/E7mRNA检测介绍,ASCUS/LSIL随访中被诊断为CIN2+的可能性: E6/E7 mRNA(+) 是E6/E7 mRNA(-)的69.8倍 DNA(+)是DNA(-)的5.7倍。,E6/E7mRNA检测具有较高的预测功能,细胞内E6/E7mRNA量化，与巴氏细胞学相比，可以更好的预测CIN2+ 病变,结论指出E6/E7mRNA定量，可以有效地对ASC-US/LSIL进行分流，包括30岁以下女性。,E6/E7mRNA检测有效对细胞学筛查分流,E6/E7mRNA检测有效对细胞学筛查分流,用HPV R
8、NA 和DNA 检测预测CIN2+:对巴氏筛查为ASCUS或LSIL的那行进行2年跟踪随访,本文显示HPV RNA 检测与DNA检测（PCR）相比，敏感度相当，特异性较高。 为ASCUS或LSIL的分流提供一种改进方法。,E6/E7mRNA检测的其它意义,有文献研究E6/E7mRNA检测在以下几方面的意义：与组织学检测联合， 辅助诊断；与细胞学检测联合，辅助治疗；用于年轻女性；用于术后随访。,E6/E7mRNA检测辅助治疗,E6/E7mRNA检测辅助治疗,E6/E7mRNA用于年轻女性,HPV在年轻女性中感染率高、表达率相对低。仅仅是感染趋势。E6/E7-mRNA已经被证明作为未来疾病进展可能
9、指标！,Detection of Residual/Recurrent Cervical Disease after Successful LEEP Conization: the Possible Role of mRNA-HPV Test.Leep锥切术成功后检测剩余/复发的宫颈疾病：mRNA HPV检测可能发挥的作用。,14%-70%的阳性切缘患者5-15%的干净切缘患者 存在复发宫颈疾病的风险。,E6/E7mRNA检测用于年轻女性,治疗后检测残留/复发宫颈病变时： E6/E7mRNA检测具有较高的特异性和阳性预测值,E6/E7mRNA检测用于年轻女性,目录,对应2013版NCCN宫颈癌
10、筛查指南，30岁以下的女性中，HPV感染率很高，同时自主清除率也很高不建议这一部分人群中进行HPV DNA检测。近年来随着初次性生活年龄的提前化，HPV感染有低龄化的趋势。我院今年1-4月门诊就诊并进行HPV E6/E7癌基因筛查的1629例女性，30岁以下女性有691例，约占42.4%。,重视30岁以下女性的宫颈安全！,HPV DNA负荷量较活跃，假阳性筛出率比较大，容易造成误诊或过诊过治。液基细胞学筛查还是一种相对保守的癌前病变筛查方式，但仍然会对一些容易忽略的ASC-US人群束手无策。 E6/E7mRNA检测，筛查出感染HPV且癌基因已经转录的患者。较高的特异性和阳性预测值，找出真正的癌
11、变高风险者。,E6/E7mRNA检测用于30岁以下女性,宫颈管粘膜褶皱、宫颈腺体隐窝形成的复杂结构是导致临床漏诊的陷阱之一，由于漏诊陷阱，重视ASC-US诊断、分流显得愈加重要。每年有很多女性被诊断为宫颈细胞学异常，如ASC-US。多数异常会不治而愈，太过积极地治疗既不合理也不必要。较多的宫颈癌前病变和宫颈癌症患者，在早期被诊断为不确定或轻度细胞学异常,宫颈细胞异常是不能被忽视的，尤其是ASC-US。,ASCUS人群的管理,E6/E7mRNA检测用于ASC-US女性,可提前预估个体罹患宫颈癌风险；可验证细胞学的结果；可降低漏检，减少过度诊断治疗；可预测病变趋势。,E6、E7 mRNA检测 筛出真正具有致癌风险者，提高筛查管理效率！,小结,我们应该认识到子宫颈癌的疾病转化并不是一蹴而就的，这是一场病毒感染与人体免疫力之间的拉锯战；目前，从筛检性价比以及医师的认可度上来讲，细胞学筛查还是一种不可替代的常规筛查方式，因而，二者结合的联合筛检将会是未来的一个方向。,The end, thank you!,身体健康，工作顺利！,
