1、半乳甘露聚糖检测临床应用血液疾病,郭芳岑产品经理伯乐生命医学产品（上海）有限公司,主要内容,中国真菌感染概况侵袭性曲霉菌简介GM 试验原理GM试验临床应用介绍血液伯乐曲霉菌检测试剂盒简介,中国真菌感染概况,侵袭性真菌感染（IFI）整体发病率约 4.12%, 并呈持续增长趋势*根据来自2013中国卫生统计年鉴的数据估计，去年全国住院病人中约有750万发生侵袭性真菌感染*高危人群主要为：,Chinese Medical Journal, 2013;126 (2) 2013 中国卫生统计年鉴,真菌感染概况-HSCT,Fungal Infection in HSCT Recipients CID 20
2、09:48 (1 February),IA概况-HSCT,侵袭性曲霉菌病 (IA) 是免疫抑制患者中最常见的霉菌感染（IMI），在HSCT患者中IMI的发病率和死亡率分别为 12.8% 和 60.0%*在异基因HSCT患者中，IA发病率为5-26，由于期诊断困难，使得治疗延迟，死亡率高达66.6-80.0&,* Chinese Medical Journal, 2013;126 (2) 32:35866,曲霉菌是肺部真菌感染的首要原因 #,侵袭性真菌病的诊断,诊断标准由危险因素、临床特征、微生物学检查和组织病理学检查四部分组成诊断结果分为三个级别: 确诊、拟诊和疑似,注: 微生物学检查标本主要
3、来自血浆、血清、痰液、支气管肺泡灌洗液、支气管刷标本、鼻窦抽取液和导管引流液,中国侵袭性真菌病的诊断,IFD临床诊断标准,The diagnosis of IFD required at least one of each criteriaGM is a necessary test for any doubted IA patients,中国侵袭性真菌感染工作组, 2013血液病恶性肿瘤患者侵袭性真菌病的诊断标准与治疗原则(第四次修订版),真菌感染的诊断,临床症状-特异性？影像学-特异性？真菌涂片、培养-敏感性？特异性？时间？病理学-特异！敏感性？侵入性,GM试验早期、快速、敏感、特异、采样
4、方便,GM试验原理,临床意义：诊断侵袭性曲霉感染检测底物：半乳甘露聚糖曲霉细胞壁成分菌丝在组织生长过程中释放热稳定性可溶性：Serum, BAL, CSF双抗体夹心法大鼠EB-2A单克隆抗体识别15-呋喃半乳糖侧链,高危患者中IA的筛查和早期诊断GM抗原的动态监测和临床用药指导抢先治疗疗效及预后判断帮助医生和医药公司进行新抗真菌药物的临床评估,GM试验临床应用,早期诊断,先于临床症状平均6天 （J.Maertens-JCM 1999 ）先于CT 扫描平均8.4天 （A.Sulahian-American Cancer Society 2001 ）先于第一次阳性培养结果平均10.5天，先于X射线
5、阳性结果平均5天，先于临床确诊平均17天 （J.Maertens-Blood 2001）可帮助医疗机构提前启动抗真菌治疗平均6天（抢先治疗）（J.Maertens - CID 2002 ）,确诊治疗和抢先治疗,确诊治疗: 对确诊为IFI的患者的治疗抢先治疗:对已确立临床诊断和高度疑似的患者应用抗真菌药物对象：临床诊断的患者疑似患者广大学者认为:抢先用药较经验用药从挽救生命来讲更为合理有效,不同病原用的药物不同,念珠菌或丝状真菌:白色念珠菌：氟康唑；非白念：伏立康唑或卡泊芬净;丝状真菌：对氟康唑天然耐药曲霉菌或毛霉菌:曲霉菌：伊曲康唑，伏立康唑，卡泊芬净，两性霉素-B等毛霉菌：目前只有两性霉素-
6、B卡氏肺囊虫:复方新诺明，卡泊芬净,GM临床应用-血液1,中华血液学杂志，2007年2月，第28卷第2期,北京大学人民医院，北京大学血液病研究所,血清GM测定：所有患者每周采血2次，采血后24 h内离心分离出血清，于一20冻存。GM测定采用Platelia Aspergillus试剂盒(Bio-Rad)，共检测46例患者（HSCT或移植后）167份血清样本,早期诊断,GM临床应用-血液1,中华血液学杂志，2007年2月，第28卷第2期,结论通过ELISA方法进行血清GM检测可以为早期诊断IA提供有力证据，是一项快速、较灵敏的诊断试验：GM诊断试验的灵敏度为81.8，特异度为93.3，阳性预测值
7、为90.0，阴性预测值为87.5通过GM测定临床诊断IA者由11例增加至19例GM浓度与患者疾病的预后具有相关性 HSCT后患者的IFI中，曲霉菌所占比例为41.7，较前有所升高进一步了解GM在不同临床条件下的动态变化，探讨GM测定的界值划定以及研究HSCT后患者的免疫功能重建，将使我们在IA的诊断中取得更大的进步,GM临床应用-血液2,中国感染与化疗杂志，2009年5月20日第9卷第3期,苏大一附院血液科,早期诊断,根据我国IFI诊断标准并结合GM 测定结果，临床诊断IA 的患者由37例增加至52例,GM临床应用-血液2,中国感染与化疗杂志2009年5月20日第9卷第3期,苏州大学附属第一医
8、院，江苏省血液研究所,血清GM 检测可以为早期诊断IA提供有力证据，动态监测GM 值变化趋势是评价疗效的有用指标，以GM 阳性为起点的抢先治疗可以显著降低IA患者的病死率,疗效评估,GM临床应用-血液3,The Journal of Infectious Diseases 2002;186:1297306,Departments of Hematology, Microbiology, Pathology, and Radiology, University Hospital Gasthuisberg, Leuven, Belgium,早期诊断,GM临床应用-血液3,The Journal o
9、f Infectious Diseases 2002;186:1297306,Departments of Hematology, Microbiology, Pathology, and Radiology, University Hospital Gasthuisberg, Leuven, Belgium,早期诊断,GM临床应用-血液4,Annals of Oncology 19: 984989, 2008,Department of Hematology and Oncology, Charite Campus Benjamin Franklin, Germany,早期诊断,GM临床应用
10、-血液4,Annals of Oncology 19: 984989, 2008,Department of Hematology and Oncology, Charite Campus Benjamin Franklin, Germany,早期诊断,200例恶性血液病和慢性中性粒细胞减少患者，GM检测把IA诊断从17名增至23名，特异性增高至97.2%GM试验结果在全部血清样本中表现出很高的诊断准确性,GM临床应用-血液4,Annals of Oncology 19: 984989, 2008,Department of Hematology and Oncology, Charite C
11、ampus Benjamin Franklin, Germany,早期诊断,GM试验在不同临床时期的诊断准确性,GM临床应用-血液4,Annals of Oncology 19: 984989, 2008,Department of Hematology and Oncology, Charite Campus Benjamin Franklin, Germany,预后判断,GM临床应用-血液5,LANCET Infectious Diseases Vol 4 June 2004,Department of Medical Microbiology and PD Department of H
12、aematology, University MedicalCentre St Radboud, Nijmegen, Netherlands,Died,Died,疗效评估,GM临床应用-血液6,BLOOD, 15 MARCH 2001 z VOLUME 97, NUMBER 6,Departments of Hematology and Microbiology, University Hospital Gasthuisberg, Leuven, Belgium,预后判断,GM抗原检测建议,对象：高发IA科室存在危险因素的患者出现疑似症状的患者出现IA症状和体征的患者进行IA治疗患者GM抗原检
13、测：定期筛查，每周两次，及时提示IA发病可能必须检测，帮助临床确定诊断动态检测GM指数变化，帮助临床评价疗效，判断预后,曲霉菌抗原检测试剂盒,伯乐曲霉菌抗原检测试剂盒早期、快速、敏感、特异、采样方便,样本保存,血清： 保证采集的血清样本未受真菌和/或细菌污染 运输及保存需密封，避免暴露于空气检测前，未开封的样本可在2-8保存5天第一次开封后，在2-8可保存48h长期保存，需置于-70冻存最多四次冻融冻融样本注意需完全混匀以下情况检测不受影响含20 mg/L 胆红素含2 g/L 甘油三酯的脂血样本含500 mg/dL 血红蛋白的溶血样本.,试剂保存,试剂盒效期：开封后的试剂：工作洗液稀释后：预处
14、理后的样本：,2-8， 12个月,2-8，8周开瓶后，需保证所有试剂未受污染微孔板，开封后需放回密封包装保存浓缩洗液可置于2-30存放,2-30，14天,上清液，可在2-8保存48小时,PlateliaTM曲霉菌抗原检测试剂盒,0.3R40.8R3 I1.5,GM抗原检测影响因素,THE LANCET Infectious Diseases Vol 4 June 2004,GM试验假阳性,抗菌药物：哌拉西林-三唑巴坦采样：用药前，或在血药浓度较低时高剂量使用激素透析：不能清除大分子GM化疗的严重黏膜炎的患者谷类食物中的GM抗原通过肠道入血儿童和新生儿：假阳性83%母乳或配方食品中双歧杆菌与GM有交叉反应交叉反应真菌：青霉、拟青霉、隐球菌、头状地霉、组织胞浆菌等,GM试验假阴性,抗真菌药物三唑类降低GM水平但：米卡芬净升高GM水平（能够破坏真菌细胞壁，但不能清除）低侵袭性曲霉病低曲霉负荷量体内产生GM抗体呋喃半乳糖抗原表位被其他物质封闭,多学科合作,GM试验是靠的诊断依据综合临床症状注意假阴性假阳性因素注重动态监测基础检测手段不可忽略：涂片、培养、药敏,Thanks,
