1、UF-1000i 培训,Wu WanqingScientific & Application DepartmentSysmex Shanghai Ltd.,UF-1000i的特点,1、光源系统 采用红色半导体激光光源,低能耗、结构紧凑、长寿命、低成本,解决的问题： 故障率高、成本高,2、DNA/RNA染色技术 全新的具有特异性的核酸荧光染料染色技术,解决的问题：细胞本质鉴别、灵敏度高、精确定量,对各有形成份的细胞膜、细胞核、细胞质进行特异性的核酸荧光染色,半导体激光流式细胞/核酸荧光染色技术,侧向散射光 侧向荧光 前向散射光 激光束 （=635nm） 荧光 半导体激光 （=635nm） 滤光器
2、 侧向散射光 前向散射光 流动计数池,全新DNA/RNA染色细胞分析,双检测通道,特异性核酸荧光染色,沉渣通道,细菌通道,各有形成份(除细菌外),仅细菌,沉渣染液UFSearch SED,细菌染液UFSearch BAC,沉渣稀释液UFPack SED,细菌稀释液UFPack BAC,混匀,测定,混匀,测定,Sample,SEDIMENT ch,BACT ch,(除细菌外的成分),(细菌),染色液UF IISEARCH SED,染色液UF IISEARCH BAC,稀释液UF IIPACK SED,稀释液UF IIPACK BAC,搅拌混匀测定,搅拌混匀测定,15L,435L,尿,62.5L,
3、12.5L,425L,4倍稀释标本,8倍稀释标本,150L,尿,原理,3、检测通道 独立的双检测通道（沉渣通道、细菌通道）,解决的问题：1、标本采集过程中无法克服的杂菌对其它各有形成份的干扰2、对要求进行细菌检测的样本可以精确定量细菌3、提供尿路感染的筛查报告，提供临床微生物培养的证据,充分混匀，12项定量检测参数,4、试剂系统 染液（SED、BAC），稀释液（SED、BAC），鞘液,解决的问题：1、精确识别定量2、降低干扰因素，使各有形成份之间的差异更为明显3、临床诊断信息的提供更为明确,“三多一少”（品种多，功能多，特异性多，成本少）特异性强的核酸荧光染料，染色辅助剂，溶血抑制剂，非特异性
4、结合抑制剂，抗干扰成分,5、定量参数 定量可报告参数12项，临床诊断信息3项，研究参数11项,解决的问题：各项参数更多，更完整，更具临床价值,RBC、WBC、EC、CAST、BACT、P-CAST、SRC、YLC、CRYSTAL、SPERM、MUCUS、COND.红细胞形态学信息、尿电导率分级、UTI信息,6、检测方法 流式细胞技术检测获得多种信号：前向散色光、荧光强度、侧向散射光等 S-FSC、S-FSCW、S-SSC、S-FLL、S-FLH、S-FLLW、S-FLLW2、B-FSC、B-FSC2、B-FSCW、B-FLH、RBC-P70Fsc、RBC-Fsc-DW、Non-Lysed RB
5、C、Lysed RBC,解决的问题：1、结晶、酵母菌、精子等对红细胞干扰2、上皮细胞对白细胞干扰3、黏液丝对透明管型、病理管型干扰4、红细胞形态学信息（血尿来源的判断）明确,多参数检测分类，8个散点图和直方图,7、复检率 镜检率57%，异常结果提示功能,解决的问题：1、红细胞完整性，受结晶、酵母菌、精子、细胞碎片干扰2、白细胞 & 上皮细胞，黏液丝 & 管型3、线性范围的限制,特异性DNA/RNA荧光染色，多角度散色光、多级别荧光强度、计数线性范围宽,8、线性范围 （分析颗粒）0 60,000个，（计数颗粒）0 999,999个,解决的问题：1、混浊样本超线性范围，降低复检率2、分析的颗粒更多
6、，避免漏检3、异常结果均可提示,全面计数并分析所有尿中各有形成份,异常结果提示功能,9、临床诊断信息 RBC形态学信息、UTI信息、电导率定量分级信息,解决的问题：1、各种原因血尿来源诊断依据的提供2、泌尿系统疾病的早期发现及疗效监控3、给予临床合理使用抗生素的指导，防止细菌的耐药性的发生及抗生素的滥 用,血尿来源的明确判断、尿路感染症的提示及致病菌的一级报告、急慢性感染的监控、疗效观察及预后判断、肾功能及尿液浓缩功能判断指标,临床有用性和检测价值,血尿来源的鉴别诊断用于诊断尿道感染(UTI)药物治疗疗效的观察反映肾功能及尿液浓缩功能指标,诊断尿道感染和药物疗效观察,独立的细菌检测通道,特异性
7、的核酸荧光染色,判断致病性球杆菌,提供临床合理使用抗生素依据(致病菌一级报告)通过白细胞准确的定量信息和直观的散点图信息为急、慢性泌尿系统感染提供快速鉴别诊断依据；判断尿路感染的用药治疗效果；对预后进行监测。,尿液电导率定量分级信息,表达电流通过导体的难易程度的指标尿液电导率与摩尔渗透压浓度之间有较高的相关性（= 0.928）反映肾脏功能以及尿液浓缩功能好坏的重要指标 分级报警的等级值1 级（RANK1） 0.03.0 mS/cm2 级 （RANK2） 3.115.0 mS/cm3 级 （RANK3） 15.127.0 mS/cm4 级（RANK4） 27.139.0 mS/cm5 级 （RA
8、NK5） 39.1mS/cm ,10、质控及SNCS 原厂配套的具有溯源性的两个浓度水平的校准品和配套质控品（H/L）,解决的问题：1、结果更为可信和标准，保证检验质量2、实验室认证必备,对每种有形成份进行定量质控（质控文件及雷达图）,质量控制,UF II CHECK 原厂配套的具有溯源性的两个浓度水平的校准品和配套质控品（H/L）对每种有形成份进行定量质控实验室认证通过之必备,原理,SEDch：7.8LBACch：1.0Lor6.0L,由于采用红色半导体激光，实现了低成本、长寿命、小型、省电。同时，利用能够获得粒子表面信息的侧向散射光 (SSC) 信息进行更详细地粒子识别。,LASER,Fl
9、owcell,Intensity of signal,LASER,Flowcell,Intensity of signal,LASER,Flowcell,Intensity of signal,LASER,Flowcell,Intensity of signal,LASER,Flowcell,Intensity of signal,LASER,Flowcell,Intensity of signal,LASER,Flowcell,Intensity of signal,LASER,Flowcell,Intensity of signal,LASER,Flowcell,Intensity of
10、signal,LASER,Flowcell,Intensity of signal,LASER,Flowcell,Intensity of signal,Intensity of signal,FL,Fsc,FL:Intensity of stainFLW : Length of stained part,FSC:Size of particleFSCW : Length of particle,信号分析,Fsc,FL,FLLW2,FLLW,Path.CAST 病理管型的检测,第二检测水平： FLLW2提示内容物的宽度,第一检测水平： FLLW提示整个颗粒的宽度,测定参数,沉渣通道S-FSC:
11、 前向散射光强度，颗粒大小S-FLH: 荧光强度(高灵敏度)，颗粒核酸的染色强度S-FLL: 荧光强度(低灵敏度)，S-SSC: 侧向散射光强度，颗粒的内部复杂性S-FSCW:前向散射光脉冲宽度，颗粒的长度S-FLLW: 低灵敏度的荧光脉冲宽度，颗粒核酸染色部分的脉冲宽度S-FSCW2 :前向散射光脉冲宽度2S-FLLW2: 荧光脉冲宽度2，颗粒的核强染色部分的脉冲宽度,测定参数,细菌通道B-FSC ：前向散射光强度，颗粒大小B-FLH ：荧光强度(高灵敏度)，颗粒核酸的染色强度B-FSCW：前向散射光脉冲宽度，颗粒的长度B-FSC2 (低灵敏度)：工程师判断参数,图型种类,第一屏S1：红细胞
12、（并且显示酵母菌、精子、白细胞等中等大小颗粒）S2：白细胞S3：上皮细胞和管型（显示大颗粒）B1：细菌计数红细胞和白细胞2个直方图第二屏S1：同第一屏S4：主要鉴别RBC/XTAL，同时可以鉴别WBC/EC红细胞直方图第三屏S5：沉渣颗粒（除细菌）总计数B2：初步鉴别球菌/杆菌B3：细菌通道总颗粒数，包括杂质数，防止杂质干扰注：S为沉渣通道，B为细菌通道,RBC,Size (sectional area),Large,Small,Fluorescence,High,Low,Bacteria,WBC,S_FLH,S_Fsc,S1: Fl / Fsc - Scattergramm,YLC,Xtal
13、,Sperm,YLC,RBC,Size (sectional area),Large,Small,Fluorescence,High,Low,Bacteria,WBC,S_FLL,S_Fsc,S2: Fl / Fsc - Scattergramm,Sperm,EC,S3: FLLW2 / FLLW - Scattergramm,FLLW2,S_FLLW2,Large,Small,Length of stained components,Long,Short,S_FLLW,FLLW2,FLLW,FLLW2,Little to more stainable inclusions,FLLW,FLLW
14、,Long,Length of stained inclusions,Casts (no inclusions),Stainability of inclusions,Short medium lengthOf inclusions,No to little inclusions,More stainable inclusions,Pathological casts,Epithelial Cells,Mucus,FLLW2,FLLW,No inclusions,SRC,WBC,透明管型、病理管型、黏液丝,FSC、FSCW、FLL、FLH、FLLW、FLLW2,第一水平侦测长度,第二水平侦测内
15、容物的存在,颗粒的分布长度,管型内部复杂程度,颗粒管型,红细胞/白细胞/上皮 管型,红细胞/白细胞/上皮 管型,透明管型,透明管型,透明管型,粘液丝,约1/3包含物，或含有3个以上的细胞,S4: FSC / SSC - Scattergramm,S_FSC,Large,Small,Particle internal complexity,Perplexing,Simple,S_SSC,Size (sectional area),RBC,Bacteria,WBC,EC,XTAL,红细胞、结晶、酵母样菌、精子,红细胞 （溶血抑制剂、特异性染料、S-FSC、SSC、FSCW、FLW）结晶（FSC、S
16、SC、FLL）酵母样菌（染色辅助剂）精子（辅助色素）结晶的晶体结构可以对照射光源产生大量散射，因此SSC比较强，而RBC结构简单，几乎不产生散射,S-SSC (侧向散射光强度),S-FSC (前向散射光强度),RBC (红细胞),Crystal (结晶),S4散点图,S5: FLLW / FSCW - Scattergramm,S_FLLW,Long,Short,Particle Length,Long,Short,S_FSCW,Length of stained components,CAST,BACT,WBC,EC,SRC,WBC,P.CAST,B1: Fsc / FLH - Scatte
17、rgramm,B_FSC,Large,Small,Stainability of particles,Short,B_FLH,Size of particles,BACT,Debris,Weak fluorescence,FlH,Fsc,Small size,Long,No fluorsecence,FSC,FLH,Small to big size,B2: FSC / FSCW - Scattergramm,B_FSC,Large,Small,Particle Length,Long,Short,B_FSCW,Size (sectional area),BACT,UTI（尿路感染症）信息,F
18、orward Scatter (前向散射),FSCW (前向散射光宽度),杆菌/E.coli,球菌/S.aureus,判断标准： WBC:10个/L，BACT：104cfu/L,B3: FSC2 / FLH - Scattergramm,B_FSC2,Large,Small,Particle internal complexity,Perplexing,Simple,B_FLH,Size (sectional area),Bacteria,DEBRIS,第一屏（主屏）,第二屏（分析1）,第三屏（分析2）,酵母样菌/红细胞,报告参数（1）,RBC 红细胞WBC 白细胞EC 上皮细胞CAST 管型
19、BACT 细菌,报告参数（2）,Xtal 结晶YLC 酵母样真菌 SRC 小圆细胞 Path. CAST 病理性管型 MUCUS 粘液丝SPERM 精子Cond. 电导率,研究目的信息,RBC-Info. 红细胞信息Cond-Info.电导率信息 （尿浓度信息）UTI-Info.尿路感染信息,临床应用用于血尿的诊断和血尿来源的鉴别红细胞、红细胞形态信息,RBC (血尿),尿液中 RBC很少. 尿液中红细胞排泄异常增多，是泌尿系统疾病的常见临床症状之一需要进一步检测RBC 的形态，以判断血尿的来源,血尿产生的病因,肾实质性血尿 原发性或继发性肾小球肾炎 （1）肾小球性血尿： IgA肾病 遗传性肾
20、炎 薄基底膜肾病 急性过敏性间质性肾炎 多囊肾 （2）非肾小球性血尿： 髓质海绵肾 肾肿瘤 肾血管异常 肾梗死,血尿产生的病因,非肾实质性血尿： 急性尿道炎 膀胱炎或肿瘤 尿路结石、结核、前列腺炎 其他： 全身性特发性血小板减少性紫癜 凝血障碍 肾活检 外伤,尿液中的异常成分,区分肾性及非肾性血尿的重要性,肾性血尿 由于主要累及肾脏实质病变，因而一旦筛检确立为肾性血尿，进一步的检查通常是尿蛋白管型、肾功能测定、肾活检等。 肾性血尿疾病主要有：膜性肾小球肾炎、IgA肾病、狼疮性肾炎、局灶性肾硬化、系统性血管炎、肾淀粉样变等. 病程长，费用高，治疗效果不好，预后差，非肾性血尿 一旦确定，进一步检查
21、的重点是作膀胱镜检查和CT检查等。非肾性血尿疾病主要有：尿路感染、肾结石症、泌尿道肿瘤、前列腺肥大等 病程短，费用低，治疗效果好，预后好,肾性及非肾性血尿患者尿液中红细胞形态的不同比率(1),肾性疾病 非肾性疾病 肾小球 肾病 尿毒症 总体 前列腺 膀胱炎 泌尿系 总体 肾炎 综合症 肾衰 n=24 增生 肿瘤 n=21,正常红细胞(%) 6,5(10) 9,7(3) 7,3(11) 7,8(24) 40,1(8) 43(1) 23,6(8) 32,3(21) 棘形(%) 10,2(9) 2,0(3) 4,4(11) 5,5(23) 0,4(2) 1(1) 0,6(5) 0,6(10) (%范
22、围) 023 14 113 023 02 1 01 02 ( 颗粒管型 透明管型仅由蛋白组成，通常无临床价值,管型,CAST/Path Cast,Cast = Hyaline Cast+ Path. Cast (Pathological Cast) (Hyaline Cast is found in normal samples)由尿液中的蛋白在肾小管内凝固而形成（透明管型），红细胞、白细胞或上皮细胞等成分可以包含在其中形成红细胞管型、白细胞管型和上皮细胞管型等各种病理管型。Path. Cast = Inclusion Cast (Cellular or Granular Cast) (Pat
23、h. Cast is clinically significant parameter.)不同类型的病理管型可提示病变发生在肾小球或肾小管的什么部位，有助于鉴别肾病的种类。,管型（cast）的形成因素, 肾小管分泌T-H糖蛋白增多 尿液呈酸性，接近蛋白质等电点 有交替使用的肾单位 尿液在肾小管中长时间滞留、浓缩,管型（cast）的形成机理,扫描电镜 Tamm-Horsfall蛋白凝集成蛋白纤维； 蛋白纤维粘附至肾小管上皮细胞表面，阻止 冲走； 蛋白纤维交织形成疏松纤维状蛋白网（此时尿液部分成分可粘附至网上）； 蛋白纤维进一步交织形成实体基质； 尿成分粘附实体基质上； 蛋白纤维从上皮细胞上脱离； 分泌管型。,尿液中的异常成分,剧烈运动后透明管型动态改变管型形态改变名称 时间 形态改变 图形示意早期透明管型 1小时 空白型（SEM） 典型透明管型 3小时 充盈状（SEM） 皱折型透明管型 5小时 直行皱纹状（SEM） 行曲型透明管型 12-24小时 蟠曲状（SEM）注：SEM-扫描电镜,通常无明确临床意义 (尿酸盐结晶) 根据营养状况的不同有很大变化提示尿路结石: 草酸钙结晶提示遗传性疾病: 胱氨酸结晶 (DNA 代谢缺陷), 亮氨酸结晶 (亮氨酸代谢病),结晶,
