实验-影响酶促反应速度的因素.docx

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1、实验 影响酶促反应速度的因素1、实验目的通过本实验了解温度、PH、激活剂、抑制剂对酶促反应速度的影响。2、实验原理 唾液淀粉酶催化淀粉水解生成各种糊精和麦芽糖。淀粉溶液与碘反应呈蓝色;糊精根据分子大小,与碘反应分别呈蓝、紫、红、无色等不同的颜色;麦芽糖不与碘呈色。唾液淀粉酶的活性受温度、酸碱度、抑制剂与激活剂等的影响。温度:温度降低,酶促反应减弱或停止;温度升高,反应速度加快。当上升至某一温度时,酶促反应速度达最大值,此温度称为酶的最适温度。由于酶的化学本质是蛋白质,温度过高会导致蛋白质构象的改变,因此如果温度继续升高,反应速度反而会迅速下降甚至完全丧失。酸碱度:唾液淀粉酶最适 pH 为 pH

2、6.9,高于或低于酶的最适 pH 值,都将引起酶活性的降低,过酸或过碱的反应条件可使酶活性丧失。抑制剂与激活剂:酶的活性常受某些物质的影响,能增加酶的活性称为酶的激活剂:降低酶活性且不使酶蛋白变性的称为酶的抑制剂。如 Cl-为唾液淀粉酶的激活剂,Cu 2+为唾液淀粉酶的抑制剂。根据上述性质,可以用碘检查淀粉是否水解及其水解程度,间接判断唾液淀粉酶是否存在及其活性大小。三、试剂及器材1.试剂:1淀粉溶液,1氯化钠溶液,1硫酸铜溶液,1硫酸钠溶液,碘液,磷酸氢二钠(0.2mmol/L), 柠檬酸溶液(0.1mmol/L)。2.器材:试管,试管夹,恒温水浴锅(37),吸管,滴管,试管架。四、实验操作

3、:1.收集唾液:实验者先将痰咳尽, 用自来水漱口, 清除口腔内食物残渣, 再含蒸馏水约 15 mL, 作咀嚼咕漱运动, 3min 后吐入小烧杯中备用。2.观察温度对酶促反应速度的影响取试管 3 支,编号 1,2,3,按下表操作:试剂(ml) 1 2 3唾液 1 1 11%淀粉 2 2 2水浴 5min 100(冷却) 37 0碘液 1 滴(冷却) 1 滴 1 滴现象3. 观察 pH 对酶促反应速度的影响(1)配制一系列 pH 不等的缓冲液。试剂(ml) 1 2 30.2mmol/L 磷酸氢二钠 5.15 7.72 9.720.1mmol/L 柠檬酸 4.85 2.28 0.28pH 5.00

4、6.80 8.00(2)取试管 3 支,编号 1,2,3,按下表操作:试剂(ml) 1 2 3唾液 2 2 2缓冲液 3(pH5.00) 3(pH6.80) 3(pH8.00)1%淀粉 2 2 237水浴 10min碘液 1 滴 1 滴 1 滴现象4 观察激活剂和抑制剂对酶促反应速度的影响取试管 4 支,编号 1,2,3,4,按下表操作:试剂 滴 1 2 3 41%淀粉 20 20 20 20唾液 10 10 10 10蒸馏水 6 1氯化钠 6 1硫酸铜 6 1硫酸钠 637水浴 510min碘液 1 滴 1 滴 1 滴 1 滴现象5、实验结果及分析6、思考题影响酶促反应速度的因素有哪些?它们如何影响酶的活性?

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