实验十-传出神经系统药物对离体家兔肠管平滑肌.doc

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资源描述

1、传出神经系统药物对家兔离体肠管平滑肌的影响实验目的1、掌握离体平滑肌的实验方法。2、观察传出神经系统药物对离体家兔小肠平滑肌的作用教学时数 2 学时实验原理一、 离体实验1、所用组织:心脏、膀胱、子宫、气管、肺、肠等均可用于离体实验2、特点:实验条件易于控制、操作简便、结果准确、节省时间,可进行大量药物的筛选。3、要求:离体实验需在一定生理环境下进行,模拟体内环境。(1)温度:380.5(2)通氧气:12 气泡/s(3)营养液:含有一定离子和葡萄糖的溶液,不同的组织所选用的营养液不同。二、离体肠管实验1、肠管的选择:根据实验目的的不同进行选择(1)小肠:十二指肠、空肠、回肠(2)自律性:频率较

2、慢,起博点位于十二指肠,自律性自上而下渐弱。(3)空肠多做定性实验,回肠多做定量实验2、肠内受体及作用原理(1)受体:家兔小肠平滑肌上存在 、M 受体。(2)作用:、 受体兴奋可使小肠平滑肌抑制而舒张;M 受体兴奋可使小肠平滑肌兴奋而收缩。(3)药品对受体的作用:1、氯化乙酰胆碱(Ach):M 受体激动剂,乙酰胆碱可兴奋 M 受体,使小肠收缩幅度增加,蠕动加强。2、阿托品(Atro):M 受体阻断药,为竞争性拮抗剂,单独用药对肠管无作用,可阻断M 受体,对抗乙酰胆碱的 M 样作用,使肠管收缩幅度降低。3、肾上腺素(Ad):、 受体激动剂,可激活 、 受体(主要是 2受体),、 受体激动可产生与

3、 M 受体激动相反的效应,表现为肠管舒张,小肠蠕动减弱。4、氯化钙(Bacl 2):Ba 2+进入细胞与钙调蛋白结合,使平滑肌收缩,Ba 2+可使细胞膜发生去极化。所以加入 Bacl2肠管会发生强直性收缩,Bacl 2并非作用于受体,所以阿托品不能对抗这一作用。实验材料1动物:家兔2药品5X10 -4氯化乙酰胆碱0.5硫酸阿托品0.1%盐酸肾上腺素20BaCL 23、器材:RM6240 多媒体化生物信号记录分析系统、PC80586 计算机、张力传感器、保温式麦氏浴槽、超级恒温水浴、“L”型通气钩、高位吊瓶、量筒、烧杯、培养器、氧气瓶、外科剪刀、眼科剪刀、眼科镊子、缝衣针、棉线、注射器、台式营养

4、器。实验方法一、首先调试 RM6240 系统,使进入肌张力测定状态1在主菜单中用鼠标选择中的,选择系统显示。2在界面右侧控制参数区选择,选择 3g,扫描速度 1.0s/div,确定信号输入,选择通道 2,在工具菜单选择快速归零(空载时钩上无任何东西)。3在主菜单中选择示波,进入示波状态。4在主菜单中工具栏选择网格切换对背景网格进行切换为细格,并在选项中选择波形颜色红色。此时肌张力测试调试完毕。二、调节仪器:将超级恒温水浴温度调至 38.50.5,向麦氏浴槽中加 30ml 台氏液,通入氧气(12 个气泡秒)并制备家兔肠管标本。三、正式试验:将肠管标本两端用缝针各穿一线,一端打一空结(约 lcm

5、小套),另一端穿上长线打结,用眼科镊钳住空结固定于通气钩上,放入麦氏浴槽中,将另端长线的尽端打一空结,挂在张力换能器的小钩上,调节换能器高度,使前负荷为1g,稳定标本 20 分钟。在主菜单下按键选择记录状态,先描记一段正常曲线,然后按下列顺序给药。向麦氏浴槽内加入 5X10-4MAch0.2ml 同时用标记框在屏幕上作给药标记,观察肠段反应。当反应最明显时,用暂停键,将计算机转入“示波状态”。用台氏液冲洗肠管 3 遍,稳定标本 15 分钟,加入下列药物。将系统重新转入“记录状态”,描记一段正常曲线后,向麦氏浴槽中加05阿托品 02ml 并作标记,观察曲线变化,1 分钟后加 5X10-4MAch

6、02ml并标记,观察肠段反应。将计算机转入“示波状态“后,用台氏液冲洗肠管 3遍。稳定标本 15 分钟将系统重新转入“记录状态”,描记一段正常曲线后向麦氏浴槽中加001Adr0.1ml 并作标记,观察曲线变化。将计算机转入“示波状态”下冲洗肠管,稳定标本,加下列药物。将系统重新转入“记录状态”,描记一段正常曲线后,向麦氏浴槽中加20BaCl 2 02ml 并作标记,观察曲线变化。在主菜单下选择“结束实验”,激活工具栏,系统进入分析状态。实验结果处理在主菜单下分析项可选择区域测量、标记查询、开始反演、鼠标捕捉,测量后按工具栏中取消标志线,测出正常曲线,加 Ach 后,加阿托品回复后,加Adr 后加 BaCl2 后肠管的收缩张力,分别求出加 Ach、Adr、BaCl2 所引起的张力变化值及 Atro 对 Ach 拮抗的张力回缩值,以全班数据进行统计,作 t 检验,并判断各药的作用是否显著。在主菜单下打印项进行打印模式设置,可倒入测量信息、学生实验、实验信息后,预览、打印。注意事项1、操作时应避免牵拉肠管,造成肠管活性不好。2、肠管两端穿线采用十字交叉法,肠管不易扭曲,便于营养液的流通。3、每次给药前均应冲洗肠管 3 次,中间间隔 1 分钟。4、BaCl 2可使肠管产生强直性收缩,不能恢复,所以最后加 BaCl2。5、给药时将药液直接加入药液,不要碰线,也不要碰壁

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