实验一-糖类的性质实验.doc

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1、实验一 糖类的性质实验(一) 糖类的颜色反应一、 目的1、 了解糖类某些颜色反应的原理。2、 学习应用糖的颜色反应鉴别糖类的方法。二、 颜色反应(一) Molisch 反应1、 原理 糖在浓无机酸(硫酸,盐酸)作用下,脱水生成糠醛及糠醛衍生物,后者能与萘酚生成紫红色物质。因为糠醛及糠醛衍生物对此反应均呈阳性,故此反应不是糖类的特异反应。2、 器材试管及试管架 滴管3、 试剂莫氏试剂 1%葡萄糖溶液 1%果糖溶液 1%淀粉溶液 0.1%糠醛溶液 浓硫酸4、 操作取 5 支试管,分别加入 1%葡萄糖溶液、1%果糖溶液、1%蔗糖溶液、1%淀粉溶液、0.1% 糠醛溶液内各 1ML。再向5 支试管中各加

2、入 2 滴莫氏试剂,充分混合。斜执试管,沿管壁慢慢加入浓硫酸 1ML,慢慢立起试管,切勿摇动。浓硫酸在试液下形成两层。在二液分界处有紫红色环出现。观察,记录各管颜色。实验二 糖的还原作用一、 目的学习几种常用的鉴定糖类还原性的方法及其原理。二、 原理许多糖类由于分子中含有自由的醛基及酮基,故在碱性溶液中能将铜、铁等金属离子还原,同时糖类本身被氧化成糖酸及其他衍生物。糖类这种性质常被利用于检测糖的还原性及还原糖的定量测定。本实验进行糖类的还原作用的试剂为斐林试剂和本尼迪克特试剂。他们是含铜离子的碱性溶液,能使还原糖氧化而本身被还原成红色或黄色的氧化亚铜沉淀 。生成氧化亚铜沉淀的颜色之所以不同是由

3、于在不同条件下产生的沉淀颗粒大小不同引起的,颗粒越小呈黄色,越大则呈红色。三、 器材试管及试管架 竹试管架 水浴锅 电炉 四 试剂 斐林试剂 本尼迪克特试剂 1%葡萄糖溶液 1%果糖溶液1%蔗糖溶液 1%麦芽糖溶液 1%淀粉溶液五 操作取 5 支试管,分别加入 2ML 斐林试剂,再向各试管分别加入 1%葡萄糖、1%果糖、1%蔗糖溶液、1%麦芽糖溶液、1% 淀粉溶液各1ML。置水浴中加热数分钟,取出,冷却。观察各管溶液的变化。另取 6 支试管,用本尼迪克特试剂重复上述实验。实验三 氨基酸的分离鉴定-纸层析法一、 目的通过氨基酸的分离,学习纸层析法的基本原理及操作方法。二、 原理纸层析法是用滤纸作

4、为惰性支持物的分配层析法。层析溶剂由有机溶剂和水组成。物质被分离后在纸层析图谱上的位置用 Rf 表示。在一定的条件下某种物质的 RF 是常数 。三、 器材层析缸 毛细管 喷雾器 培养皿 层析滤纸四、 试剂1、 扩展试剂2、 氨基酸溶液3、 显色试剂五、 操作1、 将盛有平衡溶剂的小烧杯置于密闭的层析缸中。2、 取层析滤纸一张。在纸的一端距边缘 2 到 3 厘米处用铅笔划一条直线,在此直线上间隔 2 厘米作一记号。3、 点样4、 扩展5、 显色 6、计算各种氨基酸的 Rf。实验四 蛋白质的呈色反应一、 目的1、 了解构成蛋白质的基本结构单位及主要连接方式。2、 了解蛋白质的某些氨基酸的呈色反应原理。3、 学习几种常用的鉴定蛋白质和氨基酸的方法。二、 呈色反应(一) 双缩脲反应1、 原理 尿素加热至 180 摄氏度,生成双缩脲并放出一分子氨。双缩脲在碱性环境中能与铜离子结合生成紫色化合物,此反应称为双缩脲反应。蛋白质分子中有肽键,也能发生此反应。(二) 茚三酮反应 (三) 黄色反应三 操作取少量尿素结晶,放在干燥试管中。用微火加热使尿素熔化。熔化的尿素开始硬化时,停止加热,尿素放出氨,形成双缩脲。冷后,加 10%氢氧化钠溶液约 1ML,震荡混匀,再加 1%硫酸铜溶液 1 滴,再震荡。观察出现的粉红颜色。

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