1、1实验 5 不同因素对家兔离体肠肌运动的影响浙江中医药大学第二临床医学院 【摘要】目的：观察盐酸(HCl)、氢氧化钠(NaOH )、温度、肾上腺素(E)、乙酰胆碱(Ach)、缺空气对家兔离体肠肌运动的影响。方法：分别给予离体家兔肠肌标本 HCl、NaOH、低温、肾上腺素、乙酰胆碱、缺氧刺激，完成每次刺激并出现明显现象后用 37台氏液冲洗肠肌标本，观察其收缩活动的特点并记录。结果：滴加 Ach、NaOH 后，肠肌运动张力和频率都增大；滴加 E、HCl、阿托品后肠肌运动张力与频率迅速降低；停止通空气后，肠肌运动张力先迅速增强后逐渐降低和频率逐渐降低。结论：HCl 和肾上腺素可抑制离体肠肌的运动,N
2、aOH、乙酰胆碱和阿托品可增强离体肠肌的运动。1.材料和方法1.1 实验材料：家兔。1.2 实验仪器：恒温浴槽、木槌、麦氏浴槽、棉线若干、手术剪、氧气泵、微机生物信号采集处理系统、张力传感器、缝针、培养皿。 1.3 实验药品：台式液、乙酰胆碱、肾上腺素、氢氧化钠溶液、盐酸溶液。1.4 离体家兔肠肌制备：取家兔一只，将其倒提，用木锤猛击后脑勺，使之昏迷，将其仰卧位固定，用手术剪从剑突下沿腹部白线向耻骨联合方向剪开皮肤约 5cm 长，打开腹壁，暴露腹腔，顺着胃找到与胃相连的十二指肠，沿十二指肠向空肠的方向取出小肠段约 30cm，放入一小手术盘中，用注射器抽取预冷台氏液冲洗肠内容物，直至冲洗干净为止
3、。将干净的小肠段放入另一盛有预冷台氏液的小手术盘中，用手术刀刮去肠管外的血管和系膜，将小肠段切割成小段，每小段肠约 2cm长，并在小段肠的两端、距断端约 1mm 处各穿约 30cm 长的线。1.5 标本固定1.5.1 取出固定架，将肠段的下端的线头尽量靠近并牢固地绑紧在固定架的小钩，将固定架放回内槽，使小钩尽量靠近槽底（尽量减少台式液的使用） ，重新用张力微调器固定固定架，将空气泵重新连接至固定架，并通过固定架将空气输入内槽的台氏液中。1.5.2 将肠段的上端的线头与张力换能器的应变梁连接, 用张力微调器缓慢升降拉线，保持线有一定紧张度，肠段、线应与地平面垂直，同时，肠段及上端的线头不得碰及槽
4、壁和固定架。1.5.3 换液：打开灌流槽的内槽排水阀门，排去原来的台氏液，用 20ml 注射器从恒温水泵的小烧杯中抽取被加温的台氏液放入灌流槽的内槽中，其每次用量以淹过肠段的量为准。调节位于固定架尾部的空气流量调节旋钮，使气泡即细小、均匀，又不影响肠段的运动。1.6 实验观察1.6.1 记录一段 37的台氏液环境中小肠平滑肌收缩活动曲线，观察其收缩活动的特点。21.6.2 待肠活动恢复后，向台氏液中加入 0.01%乙酰胆碱（Ach）1 滴，观察小肠收缩活动的改变, 待反应稳定后冲洗 1 遍，再加入等量的37的台氏液。1.6.3 待肠活动恢复后，向台氏液中加入 0.01%肾上腺素(E)1 滴，观
5、察小肠活动的改变，待反应稳定后冲洗 1 遍，再加入等量的 37的台氏液。1.6.4 待肠活动恢复后，向台氏液中加入 NaOH 1 滴，观察小肠收缩活动的改变，待.反应稳定后冲洗 1 遍，再加入等量的 37的台氏液。1.6.5 待肠活动恢复后，向台氏液中加入 HCl 1 滴，观察小肠收缩活动的改变，反应稳定后冲洗 1 遍，再加入等量的 37的台氏液。1.6.6 待肠活动恢复后，停止空气泵的工作，观察肠活动的改变，待其收缩活动改变明显时反应稳定后冲洗 1 遍，再加入等量的 37的台氏液1.6.7 待肠活动恢复后，向台氏液中加入 Ach1 滴，再加入阿托品 1 滴，观察小肠收缩活动的改变，反应稳定后
6、冲洗 1 遍，终止实验。2.实验结果图一 正常状态下的肠肌运动图二 滴加乙酰胆碱后的肠肌运动3图三 滴加肾上腺素后的肠肌运动图四 滴加氢氧化钠后的肠肌运动图五 滴加盐酸后的肠肌运动图六 缺氧及恢复供氧后的肠肌运动4图七 滴加阿托品后的肠肌运动滴加 Ach、NaOH 后，肠肌运动张力和频率都增大；滴加 E、HCl、阿托品后肠肌运动张力与频率迅速降低；停止通氧后，缺氧后肠肌开始一段有增强的现象，而后肠肌运动张力和频率逐渐恢复正常；恢复通氧后，肠肌运动张力和频率先降低而后恢复正常。3 分析与讨论3.1 Ach 可明显兴奋胃肠道平滑肌，故：收缩频率增高：Ach 与肌膜上的 M受体结合，使生电性钠泵活动
7、减弱，从而使静息电位升高，平滑肌兴奋性提高。收缩幅度增加：平滑肌钙离子专用通道开放，钙离子内流，一方面使收缩频率增加，另一方面可以增加肌浆钙离子浓度。3.2 肾上腺素作用于肌膜，一方面使生电性钠泵活动增强，另一方面结合膜受体。其中 受体使钾离子外流增加， 受体使钾、钙离子外流增加，同时增强钙泵活动。其中生电性钠泵活动增强、钾、钙离子外流增加导致细胞膜超级化，平滑肌兴奋性降低，收缩频率降低。钙离子外流、钙泵活动增强导致肌浆钙离子浓度下降，收缩幅度下降。3.3 消化道平滑肌对化学刺激敏感，小肠的 PH 约为 7.08.0,过高或过低的PH 都会影响肠肌的收缩。滴加 NaOH 后，台氏液的 PH 值
8、处于 7.08.0 之间，处于肠肌收缩的最适 PH，肠肌运动加强。由于H+ 浓度降低：使钙离子通道活性受抑制减弱，钙离子内流，平滑肌兴奋性增高，故收缩频率增高，收缩幅度增强；肌浆网钙离子释放增加，平滑肌收缩幅度增强。张力曲线而后下降，说明肠肌对 PH 值变化有一定的适应力。3.4 消化道平滑肌对化学刺激敏感，滴加 HCl 后，台氏液的 PH 低于最适范围（7.08.0） ，胞外H+升高：抑制钙通道的活性，钙离子内流减少，肌肉收缩减弱。干扰肌肉的代谢和肌丝滑行的生化过程，氢离子与钙离子竞争钙调蛋白的结合位点而使肌球蛋白 ATP 酶活性降低，使肌原纤维对钙离子的敏感性和钙离子从肌质网的释放量减少。收缩减弱。 53.5 停止通氧后，肠肌运动得不到能量供给，故肠肌运动在缺氧开始一段时间代偿性增强；由于 ATP 有限，故随后运动张力和收缩幅度减弱。恢复通氧后，肠肌得到能量供给，肠肌代偿运动消失，故造成运动张力和频率短暂降低，由于 ATP 充足，故随后运动张力和频率逐渐升高。3.6 阿托品是拮抗剂，可明显抑制肠肌的活动,出现收缩曲线的频率减慢,振幅减小。4.结论 一定浓度 Ach、 NaOH 通过增强钙离子通道活性而促进肠肌的运动；一定浓度的 E、HCl、阿托品通过减弱钙离子通道活性而抑制肠肌的运动；短时缺氧能使肠肌运动暂时代偿性增强，随后减弱。
