1、1慈溪博视眼科医院检验科生物安全细则（程序文件及 SOP）1.生物安全管理体系1.1 紧急事件电话和办公室联系方式救护车/火警/警察 120/119/110生物安全负责人：医院院长 生物安全办公室：检验科主任 实验室平面图、紧急出口、撤离路线：1.2 生物安全管理机构生物安全负责人：医院院长 生物安全委员会委员：医院主管院长，主要管理部门和实验室负责人实验室生物安全责任人：检验科主任 实验室生物安全管理员：各专业实验室或专业组负责人 生物安全办公室：设在检验科办公室内，主任：检验科主任 成员：各专业安全员1.3 职责1.3.1 生物安全负责人医院法定代表人为生物安全负责人。生物安全 负责人的主
2、要 职责是： 负责建立本单位生物安全管理体系，落实生物安全管理责任部门或责任人。 定期召开生物安全管理会议，对实验室生物安全相关的重大事项作出决定。 批准和发布实验室生物安全手册、生物危害评估等重要文件。 保持与生物安全办公室的联系。1.3.2 实验室生物安全责任人各专业实验室主任为实验室生物安全责任人，其主要职责是： 全面负责本实验室生物安全工作。 决定并授权进入本实验室的工作人员。 监督有关法规和标准操作规程的执行，纠正违规行为并有权作出停止实验的决定。2 任命实验室生物安全管理员具体落实实验室生物安全管理工作。 负责制定和实施实验室应急处置预案。 负责实验室安全事故的现场处置和调查，并将
3、调查结果以及处理意见向生物安全办公室报告。 负责对涉及感染性物质的研究计划、方案以及操作程序等，实施前的生物安全审查。1.3.3 实验室生物安全管理员实验室生物安全管理员的主要职责是： 负责实验室生物安全保障以及技术规章方面的咨询工作。 就技术方法、程序和方案、生物因子、材料和设备进行定期的内部安全检查。 纠正违反生物安全操作规程的行为。 在出现潜在感染性物质溢出或其他事故时，协助事故调查。 检查和监督实验室废弃物的有效管理与安全处置。 检查和监督实验室各项消毒灭菌措施的落实情况。2. 生物安全评估和管理在建设实验室或开展实验活动之前，生物安全办公室应参照卫生部名录组织各相关方面的专家对拟操作
4、的生物因子的危害程度、实验活动的危险性、气溶胶传播的可能性、预防治疗的获得性、防护屏障的安全性、 应 急预案的有效性等因素进行评估，确定相应的生物安全防护水平等级。实验室生物危害评估结果应由中心的法定代表人签字认可，并归档保存。生物安全负责人最终对实验室内的安全负责，其职责之一是指导现行工作以判断潜在的危害（生物安全评估）， 职责之二是实验开始前采用合适的安全程序（风险管理）。特定的实验开始前需要预先进行登记和通过生物安全负责人的批准。风险评估和风险管理的 5 个“P”是指： Pathogen 病原体 危 险的生物因子 Procedures 规程 推荐的实验操作和安全的操作规范3 Person
5、nel 人员 相应的培训与技能 Protective equipment 防护设备 防护衣和安全设备 Place 地点 实验室所在位置实验室工作的每一方面都应考虑风险评估和风险管理的 5 个“P”。正确地指 导和风险评估能帮助免受生物危害的暴露，以及最大程度减少实验室受到感染的可能性。2.1 风险评估和风险管理表（见下表）表 2.1 风险评估和风险管理表风险评估 风险管理病原体 传染因子类型 (见附录 A) 感染途径 感染性疾病发生过程病毒性、致病性、数量、浓度、人群中影响程度、昆虫媒介的存在 登记 院感办公室 疾控中心 选择机构规程 气溶胶风险：离心 、混匀、混合、振动 经皮风险: 针头、注
6、射器、玻璃吸液管、解剖刀、低温刀片/刀等 飞溅/溅泼风险: 吸液管、接种环 建立一套结合安全使用的标准操作规程 遵守基本的生物安全规则 实验室、工作区域、 BSL-2 或更高传染因子实验室内的设备贴上标识 指导实验室操作和检查实验设备 用非传染性材料做尝试性试验，以测试新的规程/设备人员 人员免疫 赘生物疾病 感染 免疫抑制治疗 年龄、种族、性别、妊娠 手术 (脾、胃切除) 免疫力 后暴露预防 血清库 对安全的态度 安慰 外伤、破 损皮肤、湿疹、皮炎 安全培训 以前从事生物危害的经历 技术的熟练程度 立即向生物安全负责人和生物安全办公室报告所有的暴露事件、被忽视的事件以及相关疾病的症状 调查/
7、核实事件/飞溅等，以防止再次发生防护设备 防护： 气溶胶-可以吸入粒子直径 5m 飞溅/溅泼 口罩 手套 生物安全柜4 锐器 安全离心管/转子地点 风险组/生物安全等级、设备 气溶胶风险 受限制的过道 基本的实验室-门、易清洁的地方、冲眼器、窗户 标签 用直接气流预防2.2 暴露途径生物因子要导致疾病发生，首先必须有足够数量的因子进入或侵入人体，进入的途径有经口、呼吸道、黏膜及与动物的接触（叮、抓伤），当生物危害物进入人体，它产生疾病还需满足其它条件，它 们必须在人体细胞、 组织 和/或器官内生长繁殖，克服人体的自然免疫机制和变异或适合人体的变化。年龄、免疫状况、职业、物理或地理 环境等因素会
8、导 致个体对疾病的不同易感性。在涉及生物危害时，确定其最低感染量是很困难的。同一病原体相同剂量在一个人身上可能无症状，而在另一人身上可能导致严重的症状甚至致命。有些微生物只要一个进入到人体就足以侵入并促使疾病的发生，结核杆菌就是一个例子。暴露途径的更多信息见下图。56Mucous Membranes:Exposures to mucous membranes of the eyes, nose and mouth through splashes or splatters.Ingestion:Mouth pipetting, eating, drinking, smoking in the l
9、ab.Inhalation:Breathing in respirable sized aerosols (5m), centrifuge leaks, spills, pipetting, etc.Percutaneous:Through intact or non-intact skin via needlestick, puncture with contaminated sharp object, animal scratch or bite, through wounds abrasions, or eczema.Contact (indirect transmission):Via
10、 mucous membranes or nonintact skin from hands that have been in contact with a contaminated surface (i.e. benches, phones, 感染因子的传播途径黏膜：通过飞溅或溅泼暴露眼、鼻、嘴里的黏膜吞咽；口腔吸入、吃、喝、在实验室里抽烟吸入：吸入气溶胶粒子 (直径5m), 离心渗漏物、溢出物、吸液等经皮:被感染过的锐器刺伤完好或破损皮肤、动物叮咬、抓伤、湿疹接触 (间接传播):通过接触污染面（如凳子、电话 、电脑、设备把手等）的手来触摸黏膜或破损皮肤，或实验后洗手不彻底72.2.1 实
11、验室内传染因子的传播途径暴露途径 防护措施黏膜：通过飞溅或溅泼暴露眼、鼻、嘴里的黏膜通过以下方式进行面部的预防： 戴护眼镜或面罩 在生物安全柜内或保护罩后工作 进行规范的微生物操作吸入：由于离心渗漏、溢出或产 生气溶胶的操作如吸液、混匀等而吸入了可吸入的气溶胶粒子 (直径5m)。 通过以下方式避免暴露气溶胶： 在生物安全柜内工作 离心时使用密封转子或杯 进行规范的微生物操作吞咽；口腔吸入、吃、喝、在实验室里抽烟 通过以下方式防止经吞咽产生的暴露： 不在实验室内吃、喝或吸烟 始终使用手工吸液 进行规范的微生物操作经皮:被感染过的锐器刺伤完好或破 损皮肤、动物叮咬、抓伤、湿疹通过以下方式防止皮肤破
12、损： 用塑料制品代替玻璃制品 使用锐器要非常小心 用后立即将锐器丢弃在坚固防漏容器内 适当限制动物 戴不易划破的手套、袖套、 用防水绷带包扎好破损皮肤并戴双层手套接触 (间接传播): 通过接触污 染面（如凳、电话、电脑、设备把手等）的手来触摸黏膜或破损皮肤，或实验后洗手不彻底。通过以下方式防止间接暴露： 工作台面消毒 工作后、脱去手套后总是洗手。 不要用戴手套或不戴手套的手触摸脸部（良好的个人习惯） 实验室内不使用化妆品。在实验室内的任何时候始终执行以下工作制度： 不在实验室内吃、喝或吸烟 工作结束后或脱去手套后总是洗手 实验室内穿戴好个人防护设备，离开实验室前务必脱去个人防护设备 不用口吸、
13、始终用手工吸液 使用锐器格外小心 用合适的设备抑制气溶胶的产生 对工作台面、溢出物和废弃物进行消毒82.3 生物安全等级国家和卫生部对微生物和生物医学实验室确立了从事生物危害工作对应的生物安全等级。提供了微生物操作、实验室设备和安全设施的 结合使用，以及所 选的感染因子与使用推荐的四种生物安全等级的实验室操作。以下是 1-4 级生物安全所要求的实验室操作、防护设备、实验室设施和传染因子的概括。2.3.1 所推荐的生物安全等级与相应感染因子生物安全等级 感染因子 规 程安全设备（第一道屏障）实验室设备（第二道屏障）BSL-1已知对健康成人 和动物不造成疾病。标准微生物操作。 不需要。 开放工作台
14、。 防止节肢动物和啮齿动物进入。 实验室靠近出口处有洗手池。 实验室的窗户有纱窗。 适当的消毒设备。BSL-2能引起人或动物发病，但一般情况下对健康工作者、群体、家畜或环境不会引起严重危害的病原体。实验室感染不导致严重疾病，具备有效治疗和预防措施，并且传播风险有限。BSL-1 操作加： 限制进入 生物危害警示标记 锐器谨慎使用 制定安全手册，确定所有废物消毒和医疗监督计划I 级 or II 级生物安全柜或其它物理防护设备，这些设备应用于可能会产生飞溅或气溶胶的感染因子的操作；个人防护设备：外套、手套、所需要的面部防护BSL-1 加： 实验室门应带锁并可自动关闭。 应设洗眼设施、高压灭菌锅。BS
15、L-3能引起人或动物严重疾病，或造成严重经济损失，但通常不能因偶然接触而在个体间传播，或能用抗生素抗寄生虫药治疗的病原体。BSL-2 操作加： 控制进入 所有废弃物消毒 实验室衣服洗之前对其进行消毒II 级（B2 ）或级生物安全柜和用于所有感染因子操作的其它物理防护设备；个人防护设备：防护衣、手套、需要的呼吸道防护。清洁区设置淋浴装置。BSL-2 加： 自成隔离区，进入实验室的过道用物理方式隔开。 入口处采用自动关闭双层门。 独立的送排风系统，空气排至室外，不在室内循环。 实验室负压 实验室污染区内设不排蒸汽的高压蒸汽灭9菌器。BSL-4能引起人或动物非常严重的疾病，一般不能治愈，容易直接、间
16、接或因偶然接触在人与人，或动物与人，或人与动物，或动物与 动物之间传播的病原体。BSL-3 操作加： 进入实验室前更衣 出口处冲淋 所有材料在出口处消毒按照级生物安全的所有步骤进行，全身穿上有空气供应系统、正压个人防护衣。BSL-3 加： 远离建筑物或单独的区域 安装供应、排放真空系统 BMBL 上的其它需求根据国家标准 GB 19489-2004实验室生物安全通用要求编制2.3.2 生物安全评估目前实验室内开展的病原体检测的范围为：病毒名称英文名 中文名 分类学地位危害程度分类未经培养的感染材料的操作Hepatitis A virus 甲型肝炎病毒 小 RNA 病毒科 第三类 BSL-2He
17、patitis B virus 乙型肝炎病毒 嗜肝 DNA 病毒科 第三类 BSL-2Hepatitis C virus 丙型肝炎病毒 黄病毒科 第三类 BSL-2Hepatitis D virus 丁型肝炎病毒 卫星病毒 第三类 BSL-2Hepatitis E virus 戊型肝炎病毒 嵌杯病毒科 第三类 BSL-2病 原 菌 名 称序号 学 名 中 文 名 危 害 程 度分 类样 本 检 测所 需 生 物安 全 实 验室 级 别1. Mycobacterium bovis 牛型分枝杆菌 第二类 BSL-22. Mycobacterium tuberculosis 结核分枝杆菌 第二类 B
18、SL-23. Vibrio cholerae 霍乱弧菌 第二类 BSL-24. Staphylococcus spp 葡 萄 球 菌 属 第三类 BSL-25. Streptococcus spp 链球菌属 第三类 BSL-26. Enterococcus spp 肠球菌属 第三类 BSL-27. Micrococcus spp 微 球 菌 属 第三类 BSL-28. Moraxella spp 莫 拉 菌 属 第三类 BSL-2109. Neisseria spp 奈 瑟 菌 属 第三类 BSL-210. Corynebacterium spp 棒状杆菌属 第三类 BSL-211. Baci
19、llus spp 芽胞杆菌属 第三类 BSL-212. Listeria spp 李斯特菌属 第三类 BSL-213. Erysipelothrix spp 丹毒丝菌属 第三类 BSL-214. Rhodococcus equi 马红球菌 第三类 BSL-215. Nocardia spp 诺卡菌属 第三类 BSL-216. Eikenella corrodens 啮蚀艾肯菌 第三类 BSL-217. Enterobacteriaceae 肠杆菌科 第三类 BSL-218. Vibrio spp 弧菌属（除霍乱弧菌） 第三类 BSL-219. Aeromonas spp 气单胞菌属 第三类 B
20、SL-220. Plesiomonas spp 邻单胞菌属 第三类 BSL-221. Pseudomonas spp 假单胞菌属 第三类 BSL-222. Acinetobacter spp 不动杆菌属 第三类 BSL-223. Flavobacterium spp 黄杆菌属 第三类 BSL-224. Haemophilus spp 嗜血菌属 第三类 BSL-225. Pasteurella spp 巴 斯 德 菌 属 第三类 BSL-226. Gardnerella spp 加德纳菌属 第三类 BSL-227. Legionella pneumophila 嗜肺军团菌 第三类 BSL-228
21、. Campylobacter spp 弯曲菌属 第三类 BSL-229. Helicobacter spp 螺杆菌属 第三类 BSL-230. Clostridium spp 梭菌属 第三类 BSL-231. Bacteroides spp 拟杆菌属 第三类 BSL-232. Fusobacterium spp 梭杆菌属 第三类 BSL-233. Peptostreptococcus anaerobius 厌 氧 消 化 链 球 菌 第三类 BSL-234. Actinomadura spp 放线菌属 第三类 BSL-235. Arcanobacterium spp 隐秘杆菌属 第三类 BS
22、L-236. Chlamydia pneumoniae 肺炎衣原体 第三类 BSL-237. Mycoplasma pneumoniae 肺炎支原体 第三类 BSL-238. Ureaplasma urealyticum 解脲脲原体 第三类 BSL-239. Candida albicans 白假丝酵母菌 第三类 BSL-240. Cryptococcus neoformans 新生隐球菌 第三类 BSL-2根据上述病原体检测的表格，本实验室仅仅允许在生物安全等级为 1 和 2 的实验室里工作。2.3.3 生物安全检查为确保实验室生物安全制度、措施落实到位，避免生物安全事故，特制 订本制度。1、主任每年至少组织一次生物安全全面检查，对关键控制点可根据风险评估报告适当增加检查频率。检查内容包括：a) 生物安全管理体系、实验室活动运行情况；b) 生物安全管理制度是否完善、是否落实；c) 实验室设施、设备和人员的状态；
