1、临床检验（定性）方法评价,郭健卫生部北京医院,2007年10月,医学实验室认可的相关文件,CNAS-CL02医学实验室质量与能力认可准则；CNAS-CL27医学实验室质量与能力认可准则在临床血液学检验领域的应用说明； CNAS-CL29医学实验室质量与能力认可准则在临床化学检验领域的应用说明CNAS-CL30医学实验室质量与能力认可准则在临床免疫检验领域的应用说明,实验室认可对方法学验证的要求,CNAS-CL29:2007,检测限与可报告范围,可被检测系统检测出的被测量最低浓度称为检测限（limit of detection，LoD），有时也称检测低限（lower limit of detec
2、tion）或最小检出浓度（minimum detectable concentration）。测量范围（measuring range）表明测量系统的误差处于规定的极限内（如CV=10%）时，被测量值分布的高、低界限值间的范围，又称工作范围（working range）。,可报告范围,reportable range在方法学规定的性能条件下，检测结果的最大范围。例：CK测定测量范围：20-1000 U/L可报告范围：20-5000 U/L（血清稀释，CV20%）,临床对“准确性”的要求,实验室提供的检验结果或数据，应有助于临床医生进行疾病诊断、疗效评估和预后判断。一个可以实现计量学“准确”测量
3、的方法，不一定能满足临床医生的实际工作需要。除了具有计量学准确性外，实验室还应对检验方法进行医学或临床准确性评价,定性实验（qualitative tests）,仅给出阳性或阴性（是或非）的实验结果。特点：使用简便、低成本、操作过程规范或能满足使用者的特殊要求。评价：使用病人样本进行重复性实验和方法比较是非常重要的内容。,定性实验的临床应用,在临床实验室中，定性试验可用于筛查、诊断、确认、或监测为目的的测定。试验的敏感性、特异性、预测值和效率等，决定了其在临床应用的范围。从临床应用的角度讲，定性实验可分为筛查实验、诊断实验和确认实验。,筛查实验（screening tests）,筛查实验通常用
4、于对整个人群或特定人群中是否存在初测物的检查，如：大便潜血实验。通常要求检验方法有较高的敏感性，以保证不漏掉真阳性结果。一般情况下，筛查实验可能产生假阳性结果，但在有较好的确认实验及不会带来严重后果的前提下，还是很有益处的。,诊断实验（diagnostic tests）,定性实验用于特定疾病的诊断或临床可疑指征的判断，如微生物学培养与细菌鉴定。通常情况下，诊断性实验要求方法学同时具有较好的敏感性和特异性。在有确认实验的条件下，可以适当放宽对方法学特异性的要求。,确认实验（confirmatory tests）,确认实验通常在筛查实验和诊断实验之后进行，对已做出的检验结果进行验证和确认，以帮助临
5、床医生做出正确的临床诊断。确认实验一般设计为有较好的特异性和较高的阳性预测值，如使用荧光密螺旋体抗体吸收实验（FTA-ABS）作为梅毒初筛实验的确认实验。,临界值（cutoff）,实验结果处于（阴、阳性）分界点时的样本中分析物浓度值；低于此值，定性实验的结果为阴性；高于此值，定性实验的结果为阳性。对定性实验来讲，临界值是唯一的医学决定水平.,临界值（cutoff）,当样本中被测物浓度处于临界水平时，定性实验重复检查同一样本，将产生50%的阳性结果和50%的阴性结果。当样本浓度在临界值以上增加时，阳性结果比率增加；而当样本浓度在临界值以下减低时，阴性结果比率增加。,临界值的95%区间,当样本浓度
6、高于临界值时，重复实验产生95%阳性结果；当样本浓度低于临界值时，重复实验产生95%阴性结果；之间的样本浓度范围。,定性实验重复性评价,确立方法的临界值 ；在临界值基础上准备出-20%浓度的样本和+20%浓度的样本 ；对以上低、高浓度样本分别测定20次，记录阴性及阳性结果数；,确定Cut-off value,当实验结果表明“临界值”样本的阴性结果和阳性结果不是各占50%时，原因可能是：被评估的临界值浓度不准确、或结果数据不充足、或方法学剂量反应曲线在临界值处是非线性的,Cut-off 95%区间,当实验结果表明+20%浓度的样本产生阳性结果数95%，同时，-20%浓度的样本产生阴性结果数95%
7、，说明临界值20%浓度范围等于或超出临界值的95%区间，对于被测物浓度在20%浓度范围以外的样本，实验方法将给出稳定的结果。当阳性和/或阴性结果数95%时，应另外准备不同浓度的实验样本，重新进行评价。,方法学比较,样本种类和数量：最好使用常规病人的新鲜样本，样本量应保证评价实验方法和比较方法测定的需要。样本中被测物应稳定，应尽可能用评价方法和对比方法同时完成测定。作为最低要求，用对比方法测定的阴性和阳性样本数量，应分别在50例以上。,方法比较实验过程,使用临床样本进行方法学对比研究应在10到20天内完成，保证足够的样本量，确保对实验方法的评价在常规实验条件下进行。,参考样本盘,由一组临床样本组
8、成，测定结果可与指定的参考方法或临床诊断相联系，参考样本盘通常包含不同浓度被测物的临床样本，可能时，还包括干扰物质。对评价定性实验方法是非常有效的。,已知样本临床诊断结果,已知样本临床诊断结果,方法敏感度 = 100%A/（A+C）方法特异性 = 100%D/（B+D）相关样本的患病率 = 100%（A+C）/N阳性结果预测值（PVP） = 100%A/（A+B）阴性结果预测值 （PVN）= 100%D/（C+D）方法效率 = 100%（A+D）/N,定性实验方法评价,样本的临床诊断是未知的，实验方法只能与对比方法进行比较。由于对比方法的准确度并非100%，此情况下不能简单使用敏感性和特异性来
9、描述方法学性能，应使用“符合率”对实验方法结果与对比方法结果的一致程度进行描述：,样本的临床诊断未知,样本的临床诊断未知,阳性符合率 = 100% a/(a+c)阴性符合率 = 100% d/(b+d),总符合率 = 100% (a+d)/n,HBsAg测定的Cutoff值,ELISA方法：0.2-0.5 ng/mlCIA方法： 0.1 ng/ml金标方法： 1.0 ng/ml线性范围上线：50 ng/ml（临床样本可达mg级）,HBsAg定性测定,病毒抗原与病毒量无比例关系；结果报告“反应性”或“无反应性”确认（中和）实验有助于对病人的诊断；结果报告“阴性”或“阳性”,谢谢,郭健检验科： 85133860检验中心：58115058E-mail: ,
