1、沙门菌属,（Salmonella）,简介 沙门氏菌病是公共卫生学上具有重要意义的人畜共患病之一。 其病原沙门氏菌属肠道细菌科，包括引起食物中毒，导致胃肠炎、伤寒和副伤寒的细菌。 除可感染人外，还可感染很多动物包括哺乳类、鸟、爬行类、鱼、两栖类及昆虫。,特性 沙门氏菌革兰氏阴性、两端钝圆的短杆菌（比大肠杆菌细）。（0.71.5m）（25m）散在。 无荚膜和芽孢，都具有周身鞭毛（除鸡白痢沙门氏菌、鸡伤寒沙门氏菌外），能运动，大多数具有菌毛，能吸附于宿主细胞表面或凝集豚鼠红细胞。,培养特性 A 需氧及兼性厌氧菌。 B 在普通琼脂培养基上生长良好，培养24h后，形成中等大小、圆形、表面光滑、无色半透明
2、、边缘整齐的菌落，其菌落特征亦与大肠杆菌相似（无粪臭味）。 C 鉴别培养基（麦康凯、SS、伊红美蓝）：一般无色菌落。 D 三糖铁琼脂斜面：斜面为红色，底部变黑并产气。,生化特性1）发酵葡萄糖，麦芽糖，甘露醇和山梨醇产气。2）不发酵乳糖、蔗糖和侧金盏花醇。3）不产吲哚、V-P反应阴性。4）不水解尿素和对苯丙氨酸不脱氨。 伤寒沙门氏菌、鸡伤寒沙门氏菌及一部分鸡白痢沙门氏菌发酵糖不产气，大多数鸡白痢沙门氏菌不发酵麦芽糖。,血清学特性 沙门氏菌具有复杂的抗原结构。 一般沙门氏菌具有菌体(O)抗原、鞭毛(H)抗原和表面抗原(Vi荚膜或包膜抗原)三种抗原。,传播途径 肉的污染 肉及其制品的沙门氏菌检出率美
3、国为20%25%、英国为9.9%、日本检查进口家禽的污染率为10.3%，国内肉类沙门氏菌检出率在1.1%39.5%。 蛋的污染 蛋及其制品沙门氏菌检出率为3.9%-43.7%，由于吃蛋引起鼠伤寒病的病例报告逐渐有增加的趋势。 环境污染 食品在加工、运输、出售过程中往往被沙门氏菌污染。沙门氏菌在粪便、土壤、食品、水中可生存5个月至2年之久。 传播问题 恢复期患者和无症状的带菌者也是常见的传染源。,沙门氏菌检测标准 GB 4789.4-2010,增菌和选择性培养,可疑菌落判定,3、将接种TSI完毕的接种针不要灭菌，直接在营养琼脂平板上划线。,根据上表中可理解为只有在斜面和底层产碱、不产H2S、不产
4、气的情况下可不进行生化鉴定，直接判定为非沙门氏菌，其余任何情况均需进行生化鉴定。,TSI鉴定,三糖铁生化试验,生化试验,1、准备一只2ml无菌生理盐水试管、酒精灯、接种环、生化鉴定套装 。2、从营养琼脂平板上挑取可疑菌落，接种至生理盐水中，制成0.5个麦氏浊度。3、依次在各个安瓿（bu）瓶中滴加菌悬液3滴。4、在赖氨酸脱羧酶肉汤及对照和氰化钾及对照中个滴加无菌石蜡覆盖。5、在36培养1824h。,菌悬液制备,OR,O.5个麦氏浊度的菌悬液,依次在每个安瓿瓶中滴加菌悬液23滴。,第一步,第二步,第三步,生化试验准备,生化试验,色氨酸吲哚试验阴性,符合,赖氨酸阳性对照阴性,0NPG阴性,尿素酶阴性
5、,KCN及对照阴性,甘露醇山梨醇阳性,符合,符合,符合,符合,符合,血清学鉴定,沙门氏菌的分类,沙门氏菌属分为两个种：肠道沙门氏菌(种) 肠道亚种、萨拉姆亚种、亚利桑那亚种、双相亚利桑那沙门氏菌、 豪顿沙门氏菌及因迪卡沙门氏菌 (6个亚种)邦戈尔沙门氏菌(种),沙门氏菌的分类及命名 -沙门氏菌的分类、命名,沙门氏菌 抗原,O、H、Vi抗原,vi抗原 因与毒力有关而命名为vi抗原。 由聚-n-乙酰-d-半乳糖胺糖醛酸组成。 不稳定，经60加热、石碳酸处理或人工传代培养易破坏或丢失。 Vi抗原存在于细菌表面，可阻止o抗原与其相应抗体的反应。vi抗原的抗原性弱。当体内菌存在时可产生一定量抗体；细菌被
6、清除后，抗体也随之消失。 故测定vi抗体有助于对伤寒带菌者的检出。 新从患者标本中分离出的伤寒杆菌、丙型副伤寒杆菌等有此抗原。,O抗原 为脂多糖，性质稳定。 比较耐热，100不被破坏，也不易被酒精破坏； O抗原以阿拉伯数字表示，从1排到67，但删去了9个抗原，现在有58个抗原； 凡含有群特异性共同抗原的菌型归类为一个O群，以主要抗原来表示，某些次要抗原可以出现在多个群中。,-H抗原 H抗原存在于鞭毛之中，为蛋白质。 由肽链中氨基酸的排列顺序及空间构型决定其特异性。 不耐热，经加热和用乙醇及碱处理易变性。 H抗原常有两相的变异。 第一相为特异相，用小写英文字母表示，如：a、b、I、e、h等。 第
7、二相为非特异相，用阿拉伯数字表示，如：1、2、5等。 但也有少数菌含有第一相中的抗原e、n、x等成分。,AF群对应的O价抗原,沙门氏菌抗原表中符号意义： _ 指溶原状态下O因子可以并存，和平共处。 指O因子不相容，只能有一种。 指O或H因子有存在或不存在的可能性。,O10、O15、O15，O34价抗原不相容只存在一种。,都柏林沙门氏菌存在或不存在表面Vi抗原。,西翰普顿沙门氏菌、都柏林沙门氏菌属于单相菌，H抗原只存在第一项。,H抗原第二项H1和H2价抗原存在或不存在,O1价抗原与其他抗原和平共处，O5、O27价抗原存在或不存在。,沙门氏菌菌型的表示方法,血清型以数字和字母表示. 例如:查考夫曼
8、-怀特沙门氏菌属抗原表. 鼠伤寒沙门氏菌: O抗（1，4，5，12）， 第相H抗原（i） 第相H抗原( 1,2)。 它的血清型应表示为:鼠伤寒沙门氏菌（ 1，4，5，12：i：1，2）,沙门氏菌的判定原则,采用血清学的方法,按照考夫曼-怀特沙门氏菌属抗原表解判定菌型.,考夫曼-怀特沙门氏菌属抗原表, 内的O抗原可能存在或不存在。 内的H抗原可能是罕见的，正常情况下一般不存在。,沙门氏菌的血清鉴定的方法,用O、H 和Vi因子血清与待检的菌株作玻片凝聚试验。1.先用O因子血清确定菌株所属的 O群及O抗原的各种成分。2.再用H因子血清检查其第1相和第2相的H抗原以确定血清型。3.必要时还要用Vi血清
9、检查(目前有3种)。,1. 先用AF多价O血清检查，确定菌株是否在AF六个O群的范围内。2. 再用代表六个O群的O因子血清检查，即O2（A）、O4（B）、O7（C1）、O8（C2）、O9（D）、O3，10（E）、O11（F）。3. 确定O群之后，分别用HA(a、b、c、d、i、z10、z29）HB、HC、HD四种多价H血清检查。4. 用3.所确定的多价H血清所包括的所有H因子血清逐一检查定为第1相或第2相H抗原。5. 检出第1相H抗原而未检出第2相H抗原，或检出第2相H抗原而未检出第1相H抗原的，要用位相变异的方法再检查其另一个相。单相菌不必作位相变异检查。6. 综合O和H因子血清以及Vi因子
10、血清的检查结果，按照考夫曼-怀特沙门氏菌属抗原表解判定沙门氏菌的菌型。,沙门氏菌的血清型鉴定步骤,位相变异的解释,将一个双相沙门氏菌的菌株在琼脂平板上划线分离，所得的菌落中，有的有第1相H抗原，有的则有第2相H抗原。若任意挑取一个菌落在培养基上多次传代，其后代又可出现部分是第1相而另一部分是第2相的菌落。这种两个相的H抗原可以交相产生的现象称为位相变异。双相菌初次分离时，单个菌落的纯培养往往只有一个相H抗原，鉴别时常只能检出一个相，而测不出另一相。此时，可用已知相血清诱导的位相变异试验来获得未知的另一个相H抗原。,位相变异试验的方法,简易平板法1.配制0.70.8%的半固体琼脂培养基。2.在平板内滴上一滴已知的第1相或第2相血清因子，并作好标记。3.然后倾注平板并烘干表面水分，在标记部位的中间点种已知第1相或第2相的新鲜待检菌株。4.培养后，其已知相细菌的动力受到抑制，解离出另一相的细菌，并向周围蔓延生长，形成一个大的菌落。5.检查其菌落的边缘部分，即可确定该菌株的另一相H抗原。6.该方法通常13天内可以有结果。,位相变异试验的其余方法,U形管法小玻管法小套管法软琼脂斜面法,59种沙门氏菌的血清列表,
