1、伪狂犬病病毒,动医二班,伪狂犬病病毒(Pseudorabies virus,PRV)又称猪疱疹病毒型、传染性延髓麻痹病毒、奇痒症病毒、奥叶兹基氏病病毒。是引起牛、羊、猪、犬和猫等多种家畜和野生动物发热、奇痒(猪除外)及脑脊髓炎为主要症状的疱疹病毒。,.,伪狂犬病毒,属疱诊病毒科疱疹病毒甲亚科,暂定水痘病毒属,病毒粒子呈椭圆或圆形,无囊膜粒子直径为110-150nm;有囊膜的成熟病毒粒子直径180nm。囊膜表面有呈放射排列的纤突,长8-10nm,相对分子量为8.7l07。,形态特征,伪狂犬病毒具有疱疹病毒科成员所共有的一般形态特征。病毒粒子呈圆形或椭圆形,位于细胞核内无囊膜的病毒粒子直径为110
2、150nm,位于胞质内带囊膜的成熟病毒粒子直径为150180nm。核衣壳呈二十面体对称,没有囊膜的裸露核衣壳亦具有感染性,但感染力约为带囊膜的成熟病毒的五分之一。病毒囊膜表面有呈放射状排列的纤突。,理化特性,PRV是疱疹病毒中抵抗力较强的一种。 1 在潮湿条件下:pH68之间保持稳定,温度介于4-37,pH为4.3-9.7时,PRV 1-7 d失活。 2 腐败条件下,病料中的病毒经11d失去感染力。 3 PRV对乙醚、氯仿等脂溶剂,福尔马林和紫外线照射等敏感。 4 5%石碳酸经2min灭活,5-10 g/L氢氧化钠使其灭活。 5 对热的抵抗力较强,55-60经30-50 min才能灭活,80经
3、3min灭活。,.,流行病学,PRV是感染动物种类多和致病性强的一种病毒。(1)家养动物: 猪:猪是PRV的储存宿主和传染源,尤其耐过的呈隐性感染的成年猪是该病的主要传染源。 牛羊:出现奇痒而死。(2)实验动物:家兔、犬、猫、小鼠,但以家兔最敏感。(3)野生动物:狐狸、水貂等,.,传播形式,垂直传播PRV可通过胎盘而传递给子体,而母体免疫球蛋白却不能,所以对胎儿的感染是致命的,媒体传播带有病毒的空气飞沫核可随风传到9km或更远的地方,使健康猪群受到感染。被污染的饲料、或带病毒的鼠、羊等动物也可传播。,生态学,猪和鼠类是自然界中伪狂犬病病毒的主要贮存宿主,也是引起其他动物感染发病的疫原动物,其他
4、家畜均是由于接触这两种带毒动物或病死尸体而感染发病。病毒感染易染动物后,最初在扁桃体和咽部粘膜增殖,再经嗅神经、三叉神经和咽神经的神经鞘淋巴到达脊髓和脑。亦可由鼻、咽粘膜经呼吸道侵入肺泡。血液中的病毒呈间歇性出现,并可随血液到达全身各部位,临床症状,临床症状以神经症状、流涎,呼吸困难,繁殖障碍,生长停滞,失重及高死亡率为主,其中,临床表现随年龄不同有很大差异。1)哺乳仔猪:出生后3天即可发病,症状表现为精神沉郁、不吃奶、腹泻、呕吐、呼吸困难、兴奋不安、鸣叫、运动障碍、共济失调、角弓反张等神经症状,死前尖叫、口吐白沫。仔猪可于发病后1-2天内死亡,死亡率高达100%。2)仔猪:仔猪(断奶后至kg
5、阶段) 症状与乳猪相似,只是轻微一些,发病后主要表现为呼吸困难、呕吐、腹泻及一些神经症状。其发病率与死亡率比乳猪低,死亡率达以上。,仔猪腹泻,死亡前游泳状、鸣叫声音嘶哑,仔猪的瘙痒,运动障碍、共济失调、犬坐式,口吐白沫,结膜炎,呼吸困难、流涎,仔猪可于发病后1-2天内死亡,病理变化,新生仔猪和哺乳仔猪在自然感染和人工感染PRV时均表现出较为明显的眼观病变: 上呼吸道黏膜及扁桃体出血水肿,胃肠黏膜可见卡他性或出衄性炎症;中枢神经系统症状明显时,脑膜充血、出血、水肿,脑脊髓液增多;组织学病变主要是中枢神经系统的弥散性非化脓性脑膜脑炎及神经节炎,有明显的血管套及胶质细胞坏死。在脑神经细胞内、鼻咽黏膜
6、、脾及淋巴结的淋巴细胞内可见核内酸性包涵体。仔猪人工感染PRV强毒后出现了特征性的扁桃体坏死,淋巴结轻度充血或周边出血,肝和脾的浆膜面下有时可见散在的黄白色疱疹样坏死灶,肾脏柔软肿胀,表面小点出血。成年猪感染PRV发生了坏死性肠炎。母猪感染PRV后可见轻微子宫内膜炎和坏死性胎盘炎,公猪可发生阴囊炎。,软脑膜充血,其下脑沟积有出血性水肿液,胃底区粘膜出血性卡他,伪狂犬患猪剖检淋巴结肿大,伪狂犬患猪剖检肺部病变,肾上腺切面坏死点,肾上腺皮质及隋质部可见散发性的坏死点,微生物学诊断,感染本病的动物,除猪以外,都呈现体表局部高度瘙痒症状,并最终死亡,据此可做出初步诊断。但患猪通常无特殊症状,而且新生猪
7、和仔猪发病突然,病程很短,多于昏睡状态下死亡,诊断比较困难。本病最后确诊要靠病毒分离、血清学反应、实验动物感染或核酸探针杂交等。,病毒分离与实验室诊断,1、分离病毒的材料于发热期最好采取中脑、桥脑及延脑,或采取病总部之水肿液、侵入部神经干及脊髓。病料用培养液制成1:10组织悬浮液。2、 兔体接种试验 上述悬液经2000r/min离心10min,取上清液12ml经腹侧皮下或肌肉接种家兔,通常在36-48h后注射部位出现剧痒,病兔啃咬注射部位皮肤,皮肤脱毛、破皮和出血,继之四肢麻痹,体温下降,卧地不起,最后角弓反张,抽搐死亡。但这种症状只维持几小时,一般常于夜间死亡,可见死兔口内有接种部位咬下的被
8、毛。亦可脑内接种小鼠,症状可维持12小时,但其敏感性不如兔。亦可用细胞培养来分离病毒。许多种哺乳动物细胞均能繁殖本病毒,但最常用的是猪肾传代细胞。,3、 兔、猪及牛肾原代细胞培养。病料接种细胞后最早经18小时出现病变(病毒量大),一般经48小时,病毒量很低时要到96小时。其典型的病变是出现巨细胞圆形。部分病变细胞胞浆内颗粒增多,细胞肿大变圆形,而不相互融合,渐渐萎缩坏死。当细胞全面出现病变后渐自瓶壁脱落。自出现病变到整个细胞层破坏约经2448小时。4、特异性免疫荧光诊断:对可疑病畜或接种动物的中枢神经系统如中脑、桥脑、延脑 或脊髓可作冰冻切片或压片,用免疫荧光直接法检查,阳性病例可见神经节细胞
9、胞浆及核 内均有荧光。感染的组织细胞亦可用此法来确定感染的病毒。5、病毒中和试验;用一株标准伪狂犬病细胞适应毒,以每0.1ml病毒溶液中含有100TCID50的稀释病毒与连续作2倍稀释的被检血清0.1ml混合,培养1.5小时,再接种于细胞培养物上。每个血清稀释度至少要接种4个细胞培养物,每个培养物接种0.2ml。恢复猪的血清常有1:8到1:64的中和能力。,免疫防治,病后康复动物具有较强的免疫力,人工接种强毒不能引发疾病。耐过母猪可经过初乳将抗体传给子代,使仔猪获得对该病的抵抗力,这种母源抗体可存在仔猪体内5-7周。对已感染猪群,检疫是最迫切的任务,应限制运输并扑杀。如对新生仔猪注射高免血清,可降低死亡率。目前已有多种灭活疫苗和弱毒疫苗用于本病的预防,近年来的趋势主要是发展弱毒疫苗和基因工程疫苗。目前已成功获得了PRV的基因缺失突变株Telvid疫苗。该疫苗是目前为数不多的商业化基因工程疫苗之一。,THANKS VERY MUCH,