1、血液分析仪检验,自动血液分析仪（AHA）血细胞计数仪（blood cell counter） ,是临床检验最常用的筛检仪器之一 。 传统的显微镜血细胞计数或分类方法: 速度慢、误差大、影响因素多，且难以满足临床大量标本检测需求。 AHA可进行： 全血细胞计数及其相关参数的计算。白细胞分类。血细胞计数和分类的扩展功能，包括：有核红细胞计数、网织红细胞计数及其相关参数检测；幼稚粒细胞、未成熟粒细胞、造血干细胞计数；未成熟血小板比率；淋巴细胞亚型计数；细胞免疫表型检测等。,第一节 血液分析仪的检测原理 现代血液分析仪综合应用了电学和光（化）学两大原理，用以测定血液有形成分（细胞）和细胞内容物（血红蛋
2、白）。 电学检测原理包括电阻抗法和射频电导法； 光（化）学检测原理包括激光散射法和分光光度法。 激光散射法检测的对象有2类：染色的和非染色的细胞核、胞质颗粒等成分。,一、电学检测原理 1电阻抗法 即库尔特原理（图3-1）。电阻抗法是三分群血液分析仪的核心技术，可准确测出细胞（或类似颗粒）的大小和数量。,电阻抗法还与其他检测原理组合应用于五分类血液分析仪中。,图3-1 电阻抗法细胞计数原理,为提高计数准确性，部分仪器还采用3次计数、扫流和拟合曲线等技术进行血小板计数（图3-3）。电阻抗法还可用于白细胞计数及白细胞三分群分析。,例如，电阻抗法红细胞计数和血小板计数是在相应通道内进行计数，并根据二者
3、体积不同，采用浮动界标法进行区分（图3-2）。,图3-2电阻抗法正常红细胞直方图,图3-3 电阻抗法正常血小板 计数和拟合曲线直方图,2射频电导法 高频电流能通过细胞膜，用高频电磁探针渗入细胞膜脂质层，测定细胞的导电性，提供细胞内部化学成分、胞核和胞质（如比例）、颗粒成分（如大小和密度）等特征性信息。,电导性特别有助于鉴别体积相同、但内部结构 不同的细胞（或相似体积的颗粒。,图3-4 射频电流检测原理,（二）光（化）学检测原理 1激光散射法 将稀释、染色（化学染色或核酸荧光染色）、球形化的细胞悬液注入鞘液流中央，单个细胞沿着悬液和鞘液流,两股液流整齐排列，以恒定流速定向通过石英毛细管，即流体动
4、力学聚焦技术（图3-5） 。,图3-5 鞘流技术,当细胞（或颗粒）通过激光束被照射时，因其本身的特性（如体积、染色程度、细胞内容物大小及含量、细胞核密度等），可阻挡或改变激光束的方向，产生与其特征相应的各种角度的散射光（表3-1）。放置在石英毛细管周围不同角度的信号检测器（光电倍增管）可接收特征各异的散射光（图3-6） 。,图3-6 流式细胞术检测通道和光路系统,用于血液分析仪检测的光散射分析理论是采用Mie同质性球体光散射理论。,例如，红细胞/血小板经十二烷基硫酸钠和戊二醛固定呈球形后，采用流式细胞术激光散射法进行红细胞数量和相关参数的分析，其散点图见图3-7和图3-8。,图3-7 线性化红
5、细胞体积/ 血红蛋白浓度（V/HC）散点图,图3-8 光散射法血小板计数和红细胞计数散点图,用于血液分析仪检测的染料分为荧光染料和非荧光染料。 荧光染料有：碱性槐黄、噻唑橙、噁嗪、聚亚甲基蓝和碘化丙啶等，主要用于核酸染色，被激光照射后产生荧光和散射光，如采用荧光染料和激光散射法原理进行的网织红细胞计数（图3-9） 。,图3-9 噻唑橙荧光染色网织红细胞检测散点图,非荧光染料有： 亚甲基蓝（用于核酸染色） 氯唑黑E（用于单核细胞、嗜酸性粒细胞、中性粒细胞颗粒和白细胞的膜结构染色） 过氧化物酶试剂。 经过染色的细胞随鞘液流经激光检测区时，被染色部分可发生光吸收现象，使光检测器接收到的散射光强度发生
6、改变，从而区分细胞的种类。,2分光光度法 主要用于血红蛋白测定。用于血红蛋白测定的溶血剂有2大类： 改良氰化高铁血红蛋白溶血剂： 测定波长为540nm，稀释液含氰化物成分。 非氰化高铁血红蛋白溶血剂：即稀释液不含氰化物成分。如SLS-Hb法，测定波长为555nm。经HiCN法校准后，既可达到与HiCN法相当的精密度和准确性，又可避免HiCN法的试剂对检验人员的潜在危害和对环境的污染。,（三）血液分析仪检测原理的综合应用 1VCS技术 在白细胞检测通道，红细胞被溶解，白细胞接近自然状态。应用VCS技术检测白细胞大小、结构特点等（表3-2），并形成三维散点图（图3-10，图3-11） 。 VCS技
7、术检测病理性异常细胞的散点图位置见图3-12。,图3-10 体积（V）、电导（C）和光散射（S）法,图3-11 VCS细胞检测立体散点图,图3-12 VCS异常细胞检测平面散点图位置,目前，该技术也可用于网织红细胞计数（图3-13）和有核红细胞的计数。如网织红细胞计数时，采用,“透明剂”使红细胞内血红蛋白溢出形成“影细胞”，再用新亚甲蓝对网织红细胞RNA进行染色，采用VCS技术测定和分析网织红细胞。,图3-13 VCS原理新亚甲蓝染色网织红细胞散点图,2电阻抗、射频、流式细胞术和核酸荧光染色方法 （1）4DIFF通道：利用半导体激光流式细胞术、核酸荧光染色技术，采用溶血剂完全溶解红细胞和血小板
8、，白细胞膜仅部分溶解。聚亚甲基蓝核酸荧光染料进入白细胞内，,使DNA、RNA和细胞器着色。因为荧光强度与细胞内核酸含量成比例，所以未成熟粒细胞、异常细胞荧光染色深，成熟白细胞荧光染色浅，从而得到4DIFF白细胞散点图（图3-14）。,图3-14 白细胞分类4DIFF散点图,（2）WBC/BASO通道：在碱性溶血剂作用下，除嗜碱性粒细胞外的其他所有细胞均被溶解或萎缩，经流式细胞术计数，可得到WBC/嗜碱性粒细胞百分率和绝对值及WBC/BASO散点图（图3-15）。,图3-15 白细胞分类WBC/BASO散点图,（3）未成熟髓细胞信息通道：采用射频、电阻抗和特殊试剂结合法。在细胞悬液中加硫化氨基酸
9、，幼稚细胞膜脂质含量高，结合硫化氨基酸的量多于较成熟的细胞，对溶血剂有抵抗,作用。加入溶血剂后，成熟细胞被溶解，只留下幼稚细胞和异型/异常淋巴细胞（图3-16），报告百分率和绝对值，并提示核左移。,图3-16未成熟粒细胞信息通道散点图,3钨光源散射与细胞化学方法 （1）过氧化物酶染色通道：在白细胞通道加入溶血剂和POX染色剂，可计算MPXI，得到嗜酸性粒,细胞、中性粒细胞或单核细胞的相对POX活性。形成以POX分布强度为X轴、以细胞体积为Y轴的散点图（图3-17），进行白细胞计数与分类。,图3-17 白细胞（N、L、M、E）POX染色散点图,（2）嗜碱性粒细胞/核分叶性通道：苯二酸完全破坏红细
10、胞和血小板；除嗜碱性粒细胞外，其他白细胞膜溶解，胞质溢出，仅剩裸核。完整的嗜碱性粒细胞呈高角度,散射，位于散点图上部；裸核则位于下部，可进行白细胞计数和嗜碱性粒细胞计数。根据不同细胞的裸核结构进行白细胞分类计数（图3-18）。,图3-18 嗜碱性粒细胞核分叶性散点图,根据多分叶核（PMN）和单个核（MN）的比例，可计算出核左移指数（LI）。LI越高，说明核左移程度越大。目前该技术也可用于有核红细胞的计数（图3-19）。,图3-19 嗜碱性粒细胞染色/分叶核细胞通道有核红细胞散点图,（3）未染色大细胞计数（LUC）检测：在POX通道，可检测到无POX活性、体积大于正常淋巴细胞体积平均值2个标准差
11、的细胞，如异型淋巴细胞、浆细胞、毛细胞、幼稚淋巴细胞和原始细胞。,4多角度偏振光散射方法 多角度偏振光散射法（MAPSS）应用（氦氖）激光流式细胞术，分4个角度（图3-20）检测细胞（表3-3-1、图3-21、图3-22、图3-23）。嗜酸性粒细胞颗粒丰富，可消除偏振光，以此中性粒细胞相鉴别。,图3-20 多角度偏振光散射法模式图,图3-21 0前向散射光，7侧向散射光,图3-22 90垂直角度散射光（偏振光）,图3-23 90垂直角度消偏振散射光（去偏振光），90垂直角度散射光（偏振光）,鞘液中的DNA染料碘化丙啶可破坏有核红细胞膜，只留下裸核而将其染色。染料对有活性的白细胞只有极小渗透性或
12、无渗透性，故其细胞核不染色。,通过多散点图分析（MSA），可鉴别有核红细胞、无活性白细胞和脆性白细胞，计算活性白细胞比率和计数有核红细胞（图3-24）。,图3-24碘化丙啶荧光染色有核红细胞散点图,5双流体（双鞘流）技术和细胞化学染色方法 （1）嗜碱性粒细胞通道：专用染液染色，嗜碱性粒细胞具有抗酸性，染色后保持原有形态与结构，而其他细胞的胞质溢出，成为裸核。,采用电阻抗法检测，所得结果与白细胞/血红蛋白通道的白细胞（鞘流阻抗法）结果进行比较（图3-25）。,图3-25 嗜碱性粒细胞计数直方图,（2）其他白细胞分类通道：检测除嗜碱性粒细胞以外的各类白细胞。结合了钨光源流式细胞光吸收、化学染色和电
13、阻抗法（图3-26）。,DHSS采用2个鞘流装置分析细胞内部结构（图3-27）。双矩阵LIC散点图可将幼稚细胞分为3个亚群（图3-28）。,图3-26 白细胞分类计数散点图,图3-27 双鞘流图,图3-28 双矩阵巨大未成熟细胞（LIC）散点图（IMG：未成熟粒细胞，IMM：未成熟单核细胞，IML：未成熟淋巴细胞）,四、血液分析仪检测参数及原理 不同类型血液分析仪检测参数的原理不尽相同。高档仪器应用2种或2种以上检测原理，组合电学、光学、细胞化学等技术，在独特检测通道测定红细胞、血小板和白细胞系列的数量、亚类及相关参数（表3-4、表3-5）。,第二节 血液分析仪检测参数和结果显示一、血液分析仪
14、检测参数 血液分析仪检测参数包括：临床报告参数、异常报警或研究参数、仪器内部监测参数3类。血液分析仪检测的总体目标有2个：一是筛检和直接报告正常检验结果，二是在出现异常结果时，直接向检验人员报警。 随着检测技术的发展和临床循证检验医学证据的建立，目前用于报警和研究的参数，有可能转为能应用于临床检测的新参数。,二、血液分析仪结果显示 血液分析仪检测标本后，结果显示通常有3种形式：数据、图形和报警。 （一）数据 凡可向临床报告的检测参数，一般均以检验报告单的形式显示，可按原样和特殊格式打印，并向临床发出或传送结果。 当检测结果超出参考区间时，仪器会给予符号标记（表示增高，表示降低），或用特定颜色（
15、如红色表示增高，蓝色表示降低）加以提示。 对于无法直接报告的结果，也有相应的符号提示。有报警或结果异常的参数，经检验人员复查、确定后，方可发出报告。,（二）图形 血液分析仪常用的图形有2种：直方图和散点图。 1直方图 （1）白细胞直方图：电阻抗型血液分析仪，在35450fl范围内将白细胞分为3群。正常白细胞直方图（图3-29） 。出现异常直方图时，常伴随相应部位的报警信号，并有相应的图形改变（图3-30图3-34）。,图3-29 正常白细胞直方图及异常时曲线形态改变主要位置（R1R4）,图3-30 原始、幼稚白细胞增多直方图,图3-31 淋巴细胞减少和中性粒细胞增多直方图,图3-32 淋巴细胞
16、增多和中性粒细胞减少直方图,图3-33 中间细胞（单个核细胞）群增多直方图,图3-34 单个核细胞绝对增多直方图,（2）红细胞直方图：正常红细胞直方图（图3-2）是一条近似正态分布的单峰曲线，通常位于36360fl范围内，横坐标表示红细胞体积，纵坐标表示不同体积红细胞出现的频率。异常直方图见图3-35图-37。,图3-2正常红细胞直方图,图3-35 小红细胞且大小不均直方图,图3-36 巨红细胞且大小不均直方图,图3-37 巨幼细胞性贫血治疗有效直方图（呈双峰）,（3）血小板直方图：正常血小板直方图是一个偏态分布的单峰光滑曲线，通常在230fl范围内，主要集中在215fl。当血标本中存在大血小
17、板、血小板聚集、小红细胞、红细胞碎片时，可出现异常血小板直方图（图3-38）。,图3-38大血小板增多直方图,2散点图 不同型号血液分析仪由于应用光散射原理不同，即使是正常红细胞、白细胞或血小板的散点图表达形式也有明显区别。通常，平面散点图只显示二维（X、Y轴）图像，而三维（X、Y、Z轴）图像则显示立体图像。 在二维坐标系中，横坐标（X轴）和纵坐标（Y轴）分别表示一种检测原理或检测角度的细胞信息，位于坐标象限中的任何一个散点反映的就是X轴和Y轴的综合信息。,（三）报警 1报警的概念 血液分析仪的功能主要有3项： 筛检和报告正常检测结果，此时，一般不出现任何报警。 技术条件已成熟，被FDA批准、
18、并在仪器或实验室设定的检测项目规则内作出报告时，也可无报警。但在多数情况下仍出现报警，以提醒检验人员密切注意已经出现的异常。 标本不能满足实验室预先设定的各项规则时，仪器必然出现报警，必须复查。检测结果出现报警，意味着仪器直接向临床报告检验结果的可靠性已经明显降低，在没有复查确认或有效解释之前，不能直接向临床签发检测结果报告。,2报警来源 主要包括检测结果超出实验室设定的检测项目参考区间、处于要求复查的状态、临床病理标本、标本异常干扰和人群变异。应高度重视标本异常干扰引起的报警（表3-6）。,3报警形式 有图形、符号和文字3种。仪器根据预先设定的检测数据、大小分布和图形等作出全面分析和判断，对
19、可疑结果用文字或图示形式给出解释性、易于理解的报警信息。如用红色表示阳性，绿色表示阴性。出现“阳性”或“错误”提示，可能的确是由于标本异常所致，需要进一步复查。,4报警内容 报警内容是厂商和用户作出的定义，涉及检测对象的年龄、性别、参考区间、危急值、红细胞计数值、血小板计数值、白细胞计数和分类值、细胞形态或可疑的各种异常信息。各类血液分析仪常见报警内容见表3-7。,第三节 血液分析仪检测结果显微镜复查规则 2005年，国际实验室血液学学会（ISLH）提出了显微镜复查的41条建议性标准（表3-8、表 3-9、表3-10、表3-11）。近年来，又有一些血液学检验专家针对不同类型的血液分析仪制定了各
20、自的显微镜复查规则，但其临床实用性尚处于实践检验中。,一、血液分析仪检验质量保证 血液分析仪检验结果的质量保证，要贯穿于临床医生的申请，护士或检验人员采集标本、运输人员转运标本，检验人员接收标本、检测、复查确认、打印结果、发出报告，以及临床满意的全过程。,第四节 血液分析仪检验的质量保证、 仪器校准和性能评价,（一）检测前质量保证 1合格的检验人员 上岗前接受规范的培训。掌握采用参考方法校正仪器检测参数的原则。参加能力测试。 2合适的检测环境 3合格的血液分析仪 4配套试剂 5合格的检测标本 合格的检测标本的要求见表3-12。,（二）检测中质量保证 1仪器启动 按照SOP的规定，在各种设备连接
21、完好的基础上，才能开启仪器。 2室内质控 3标本检测 吸样前必须采用混匀器法或人工法多次充分混匀标本。 4仪器清洁 应随时清洁被血液标本污染的部位。特别注意在关闭仪器后，清洁检测部件（如吸样针孔）和仪器外部，确保其通畅、洁净，并处理检测废液。,（三）检测后质量保证 1实验室内结果分析 按ISLH的复查标准，并根据本实验室设定的规则，复查检测结果。 （1）分析有密切关联的参数之间的关系：如在RBC、HCT与HGB之间掌握“3规则”。 即：3RBCHb；3Hb HCT。临床允许误差为3%。 （2）确定是否需要显微镜复查： 复查的重点： 一是检查血细胞形态，并注意可能存在的异常细胞和血液寄生虫。 二
22、是做白细胞分类计数，并估算油镜下细胞分布良好区域内的白细胞和血小板的数量，以验证血细胞计数的准确性。,2结合临床情况作相关分析 3定期征求临床对检验结果的评 4记录和报告难以解释的检测结果 对于难以解释的检测结果，必须记录并报告临床，有助于积累实践经验，发现新的临床意义。,二、血液分析仪校准 （一）建立仪器检测参数基准值 基准值是评判血液分析仪检测性能的参考水平。当安装新购仪器或仪器调整、维修后，可因基准值的变化影响血液分析仪的精密度和准确度，需要建立或确认参数的基准值。,2校准品的来源和性能要求 校准品是用于校准血液分析仪的物质，应具有稳定且可溯源的特点，以保证检测结果的正确性。通常使用与仪
23、器配套的商品化校准品。对于校准品定值的来源，应由新鲜全血经参考测量系统传递赋值，不应由前批号的校准品或其他厂商的校准品传递，血液分析仪相关检测参数的参考方法见表3-13。,我国食品药品监督管理局于2008年发布、2010年实施的YYT0701-2008号文件，规定“血液分析仪用校准物（品）”的主要指标见表3-14-1，其主要特征见表3-14。,3不精密度检测 4校准操作要求 如果C/R1.0，则当前校准因子必须成比例向下调节；如果C/R1.0，则当前校准因子必须成比例向上调节。将校准品定值的可信限与分析仪测得每项参数的可信限结合，可得到校准值的95%可信限。 5验证特殊检测项目 如白细胞分类计
24、数和网织红细胞计数，见表3-13。,（二）室内质量控制目的和方法 质控目标就是要监测仪器检测的准确性或精密度（或两者）是否失控 1用稳定化全血质控品进行质控 （1）质控品测定频率 （2）结果解释 2用病人全血标本进行质控 （1）配对比较法 （2）加权浮动均值法 （3）监测参考区间法 （4）监测白细胞分类计数法 3室间质量评估 是评价实验室检测准确性的独立方法,三、血液分析仪性能评价 1994年，ICSH公布了血液分析仪评价指南，2010年CLSI又对血液分析仪的性能评价指标进行了修订，其主要包括总体评价、性能评价等。 （一）总体评价 评价内容包括：仪器基本情况、仪器手册、方法学、评价步骤。技术
25、评价计划包括：校准、校准品和质控品、试剂、标本及处理、常用细胞计数参数评估标本的浓度分布范围（表3-15）、记录原始结果、预评价和性能评价（表3-16）。,（二）性能评价 性能评价是评价血液分析仪的主体内容，包括厂商确认和用户验证。2010年CLSI规定的用户验证指标如下。 1空白检测限 空白检测限（LoB）又称为本底，是指空白试剂和电子噪音的作用，是导致仪器检测结果假性增高的原因。LoB与准确的定量检测低限是不同的。,2携带污染 是指所检测的前一个标本对下一个标本检测结果的影响。通常用携带污染率（%）表示。 用于评价携带污染的高值、低值标本通常取自临床，具体标本浓度分布范围见表3-17。,3
26、精密度（重复性） 精密度评价包括批内、批间精密度和总精密度评价。理论上，批内或批间精密度研究范围应覆盖整个生理和病理范围，不同批次的标本应包括高、中、低值。在同一批内，所有标本应有相似结果。,4检测下限与定量检测下限 （1）检测下限（LLoD）：是指一定概率下标本可被检出的最低浓度。在血液分析仪上，是指可与本底区分开的最低血细胞浓度值。CLSI EP17文件规定：LLoDLoB的均值+ LoB标准差（SD）的1个常数倍数（正态资料常数1.645）。 （2）定量检测下限（LLoQ）：是指标本中能被准确定量的最低浓度值，且定量结果在可接受的精密度和准确度范围内。,5分析测量区间（AMI） 分析测量
27、区间（AMI）也可用分析测量范围（AMR）表示。观察仪器在覆盖浓度范围内检测结果的一致性，以得到仪器的最佳测试范围，该范围越宽越好。AMI是厂商遵照FDA要求测试并载入仪器手册的一项技术指标，用户无需调整，CLIA88对此也不做要求。,6可比性 是反映仪器检测结果与使用常规程序检测结果达到一致性的能力。所用仪器分为：待测（新系统）血液分析仪（TAA）和比对（原系统）血液分析仪（CAA）。用于评价可比性和准确性的相关参数及参考方法见表3-13。 一般情况下，TAA与CAA比对、TAA与参考（最佳）方法比对，其检测结果的差值应控制在表3-18的范围。 当白细胞分类计数结果出现表3-19的变化时，则
28、需要以显微镜法与TAA检测结果进行比对。,7不同检测模式的比较 对血液分析仪的两种模式（全血模式和稀释血模式）进行评估。 8对异常标本和干扰物的评价 尽可能多检测能代表所有临床检验的预期范围的标本。可对异常标本或已知干扰物质的标本用仪器进行专门研究（表3-6）。 9临床可报告区间 临床可报告区间（CRI）是为直接获取某种方法的分析测量区间，通过采用稀释、浓缩等方法处理标本后，检测到的可作为结果向临床报告的量值范围。,10参考区间 血液分析仪检验指标参考区间（RI）的制定，不同于化学/免疫学等具有方法依赖性的指标，制造商可提供相应信息，但用户必须对其在受检者人群中的适用性进行评价，包括年龄（特别
29、是新生儿）、性别、种族等因素对血液分析仪检测结果的影响，并考虑个体内及个体间的差异。,（三）白细胞分类计数性能评价 2010年，CLSI发布CLSI-H20A2“白细胞分类计数（百分率）参考方法和仪器评价方法”文件，建议用已知不精密度和偏倚的白细胞分类计数参考方法，评价血液分析仪的白细胞分类计数性能（灵敏度和特异性）。 白细胞分类计数的评价内容见表3-20。CLSI-H20文件也是我国卫生部2005年标准文件WS/T 246-白细胞分类计数参考方法的主要依据。,第五节 血液分析仪检验的临床应用 目前，被批准用于临床的血液分析仪检测参数，如红细胞计数、血小板计数、白细胞计数和分类计数（百分率和绝
30、对值）、网织红细胞计数（百分率和绝对值）等，其临床意义已经明确。随着血液分析仪检测原理和技术的发展，新近开发的多种检测参数，也已经或正在经受临床实践的验证。以下简介新参数的独特临床应用价值。,一、红细胞系列参数 （一）红细胞体积分布宽度 红细胞体积分布宽度（RDW）是红细胞体积异质性的参数，即反映红细胞大小不均的客观指标。RDW多采用RDW-CV和RDW-SD表示。,图3-39 红细胞直方图及RDW分类,1RDW-CV RDW-CV是红细胞在体积分布曲线上1SD的分布宽度与MCV的比值（正常RDW-CV11.5%14.5%）。RDW-CV易受MCV大小的影响，小红细胞增多时因为MCV减小，极易
31、放大RDW-CV的改变。相反，大红细胞增多时会平衡掉曲线宽度的变化，从而减小RDW-CV。,2RDW-SD RDW-SD是独立于MCV的RDW表示方法。RDW-SD是以红细胞分布的峰值相当于100%时的20%界限的分布宽度，以fl表示正常RDW-SD（425）fl。,RDW-CV和RDW-SD都是红细胞大小不等（红细胞大小变化）的精确指标。RDW增大提示存在混合细胞群。若存在两种细胞群，无论是小细胞群混合正常细胞，还是大细胞群混合正常细胞，都会使分布曲线增宽而RDW增大。因为RDW-SD测量的是红细胞体积分布曲线的较低部分，所以其对少量大细胞或小细胞的存在更加敏感。,RDW-SD对于Ret数量
32、的增加极度敏感，因为Ret的MCV较大，会使分布曲线的基底增宽。RDW-CV对于小细胞、大细胞和Ret少量细胞群的存在不敏感，但是它可以更好地反映细胞大小分布的总体变化，从而可较好的用于大细胞或小细胞性贫血的诊断。,正常红细胞分布宽度变化很小。 作为红细胞大小不等的定量报告。 慢性疾病、急性失血、再障、镰状红细胞疾病的红细胞体积分布宽度可以正常。 RDW与MCV结合，对贫血分类和鉴别诊断有临床意义。Bessman（1983年）提出了贫血的MCV/RDW分类法（表3-21）。,（二）红细胞平均值 1红细胞平均血红蛋白浓度（CHCM） CHCM是RBC/HC直方图的平均值，参考区间在280410g
33、/L。低于280g/L提示低色素红细胞，高于410g/L为高色素红细胞。 2小细胞/低色素细胞比值（M/H） 在流式细胞术激光散射法线性散点图中，M/H表示小红细胞低色素的程度，有助于区别-珠蛋白生成障碍性贫血和缺铁性贫血；小红细胞高色素可筛检球形红细胞性贫血。欧洲已将其列入贫血和血透病人的诊治指南。,（三）网织红细胞参数 1未成熟网织红细胞 未成熟网织红细胞（IRF）是光散射法血液分析仪根据网织红细胞内RNA含量不同，引起荧光染色强度的差异，而得出的参数。 在分析骨髓造血状态的血液学参数中，RET优于白细胞计数和血小板计数，而IRF的变化较RET#变化更具重要意义。,2网织红细胞成熟指数（R
34、MI） 是光散射法血液分析仪根据网织红细胞内RNA荧光染色强度而得出的参数，其临床意义与IRF相同。 3网织红细胞平均血红蛋白量（CHr） 可实时评价骨髓红系造血的功能状态，是反映缺铁性贫血的灵敏指标。,4网织红细胞血红蛋白含量（RET-He） RET%、RET#和IRF仅反映了网织红细胞数量变化，而RET-He则反映网织红细胞的质量变化，RET-He低于30.5pg为补充铁的最佳临界值，其灵敏度和特异性高，与CHr有很好的相关性。RET-He在缺铁性贫血治疗过程中具有更重要意义。,5MSCV和MRV 健康人的MSCV比MCV大，但有些病人则相反。如当MSCVMCV时，诊断遗传性球形红细胞增多
35、症的灵敏度为100%，特异性为93.3%，表明MSCV和MCV是高度有效的诊断指标。MRV也是观察促红细胞生成素疗效的稳定且较灵敏的指标。,（四）血红蛋白分布宽度 HDW是反映红细胞内HGB含量异质性的参数。HDW和RDW明显增高见于遗传性球形红细胞增多症，属于小细胞不均一性高色素性贫血。HDW对镰形细胞贫血、-轻型珠蛋白生成障碍性贫血也有一定诊断意义。,（五）研究参数 血液分析仪的研究参数有： 小红细胞贫血因子（MAF）：计算细胞大小和血红蛋白含量，对小红细胞贫血分类有帮助，血液透析病人MAF与EPO治疗反应呈现良好的关系。 网织红细胞分布宽度标准差（RDWR-s）或网织红细胞分布宽度变异系
36、数（RDWR-CV）：其增高可提示缺铁性贫血，正常或减低可提示杂合子珠蛋白生成障碍性贫血。,二、白细胞系列参数 1中间细胞群（MID） 是三分群血液分析仪的指标。由于各种仪器使用的稀释液和溶血剂对白细胞膜作用不同，中间细胞群的确切细胞组成并不明确。因此，出现MID异常或报警，需要特别注意血涂片显微镜复查。 2未成熟粒细胞（IG） IG有助于筛检、监测类白血病反应、炎症、肿瘤、骨髓异常增生性疾病、组织坏死等。IG超过3%，对提示败血症非常特异，有助于微生物检测评价。,3造血祖细胞（HPC） 是反映以CD34阳性为主的造血祖细胞参数。定量检测外周血液HPC的变化，特别适合于监测造血干细胞移植过程中
37、，供体在接受药物动员后，外周血液造血干细胞的变化，以便于选择采集时机。与流式细胞仪检测结果具有较好的相关性。 4平均过氧化物酶活性指数 平均过氧化物酶活性指数（MPXI）用于诊断髓过氧化物酶部分和全部缺乏症、中性粒细胞激活等。,三、血小板系列参数 1血小板平均体积 血小板体积（MPV）与血小板数量呈非线性负相关；与血小板功能呈正相关。与PLT、P-LCR和PDW等指标联合应用意义更大（表3-22）。 2未成熟血小板比率（IPF） 可反映骨髓增生状态、血小板更新速度和细胞动力学变化。IPF对血小板减少症的鉴别诊断具有重要意义。IPF也有助于监测血小板疾病的治疗，特别是自身免疫性血小板减少性紫癜和血栓性血小板减少性紫癜时IPF增高，治疗有效时则IPF减低。,3血小板分布宽度 ITP时的MPV、P-LCR、PDW高于再生障碍性贫血，灵敏度和特异性高。P-LCR 和 PDW对于诊断免疫性血小板减少非常可靠。 4血小板成分平均浓度（MPC） 反映血小板内的密度，MPC减低表示血小板激活，与反映血小板活化的表面标志CD62P（金标准）定量有很好的相关性，可反映血小板激活、监测抗血小板药物治疗、筛检异常血小板功能。,
