1、附件 1注射用溴化丁基橡胶塞包材相容性研究李云峰常山凯捷健生物药物研发（河北）有限公司摘要：以河北橡一医药科技股份有限公司生产的注射用溴化丁基橡胶塞为研究对象，采用 HPLC 法对其中的可提取硫和抗氧剂 BHT 含量进行检测，并对以肝素钠注射液为提取液的胶塞进行研究。实验表明河北橡一医药科技股份有限公司生产的三个批号的胶塞通过适宜溶剂浸提，可获得可提取硫及抗氧剂 BHT。在以肝素钠注射液为提取液的供试品中，无可提取硫及 BHT 浸出。关键词：注射用溴化丁基橡胶塞；可提取硫；BHT；高效液相色谱法0 引言 药品包装应适用于药品预期的临床用途 1，相容性是其必须具备的特性之一。相容性研究是为考察药
2、品包装材料与药品之间是否发生严重的相互作用，并导致药品有效性和稳定性发生改变，或者产生安全性风险而进行的一系列试验，包括包装材料对药品的影响，及药品对包装材料的影响 2， 3。由于注射用溴化丁基橡胶塞直接与药液接触，注射用溴化丁基橡胶塞中在硫化过程中用到了硫，还使用了一些添加剂如抗氧剂 BHT （2,6-二叔丁基对甲酚）来增强其性能，笔者通过提取试验对上述目标化合物进行了研究。1 实验部分1.1 材料与试剂1.1.1 实验材料注射液用溴化丁基橡胶塞：河北橡一医药科技股份有限公司；批号：14021202,14021203,14021204；肝素钠注射液（规格：5ml：5000 单位)）：本公司自
3、产，批号：140401；肝素钠注射液（规格： 5ml：25000 单位 )）：本公司自产，批号：140402。1.1.2 实验试剂丙酮、2,6- 二叔丁基对甲酚（BHT）、升华硫、三氯甲烷、无水乙醇。甲醇、乙腈均为色谱纯。附件 11.2 仪器戴安 U3000 高效液相色谱仪；梅特勒 FE20 型酸度计 ；梅特勒 XS105 型电子天平；西安安泰 MCR-3 型微波化学反应器。1.3 实验方法1.3.1 可提取硫的检测研究用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以甲醇-水（95:5 ）为流动相；检测波长为264nm；流速为 1.0ml/min4。分别取剪碎的胶塞各 3g，分别加入三氯甲烷-无水乙醇（1:
4、1 ）混合溶液 15ml，于90微波萃取 30min，滤过。取滤液 1ml 置 5ml 量瓶中，以三氯甲烷-无水乙醇（1:1 ）混合溶液稀释至刻度，摇匀，即得供试品溶液。精密量取 10l 注入液相色谱仪，记录色谱图；另精密称取硫适量用三氯甲烷-无水乙醇（1:1 ）混合溶液溶解并制成硫浓度分别为 1、2、4、8、10gml -1 的系列对照品溶液。分别注入液相色谱仪，记录色谱图，以浓度对峰面积进行线性回归。1.3. 2 抗氧剂 BHT 的检测研究用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以乙腈-水（60:40 ）为流动相；检测波长为203nm；流速为 1.5ml/min5,6,7。分别取剪碎的胶塞 3g，
5、分别加入丙酮 15ml，于 90微波萃取 30min，滤过。取提取液 1ml，置 5ml 量瓶中，以丙酮稀释至刻度，摇匀，即得供试品溶液。精密量取20l 注入液相色谱仪，记录色谱图；另精密称取 BHT 适量用丙酮溶解并制成浓度分别为 1、2、5、10、20gml -1 的系列对照品溶液。分别注入液相色谱仪，记录色谱图，以浓度对峰面积进行线性回归。1.3.3 胶塞在药液中的浸提试验取 3 批胶塞，以肝素钠注射液（批号：140401,140402）为浸提液，照 1.3.2 的浸提方法浸提。取供试品溶液，照 1.3.1 可提取硫检测方法及 1.3.2 BHT 检测方法分别进样检测。2 结果与讨论2.
6、1 可提取硫的检测2.1.1 可提取硫的标准曲线附件 1按照 1.3.1 的方法进样可提取硫对照品溶液，对照品色谱峰面积见表 1，以浓度对峰面积进行线性回归绘制标准曲线，结果见图 1.得出线性回归方程为 y = 0.2823x + 0.0391，相关系数 R2 = 0.9991，表明该曲线准确可信。表 1 可提取硫对照品色谱峰面积浓度（g/ml） 1 2 4 6 10色谱峰面积 0.304 0.587 1.205 2.331 2.825图 1 可提取硫对照品线性关系图y = 0.2823x + 0.0391R2 = 0.999100.511.522.533.50 2 4 6 8 10 12浓
7、度 （ g/ml)面积2.1.2 胶塞中可提取硫的含量根据供试品溶液中硫的色谱峰面积，计算胶塞中可提取硫的含量。结果见表 2。结果表明，河北橡一医药科技股份有限公司生产的不同批次胶塞，可提取硫的含量无明显差异。表 2 胶塞中可提取硫的含量批号 14021202 14021203 14021204色谱峰面积 1.189 1.191 1.195含量（g/g） 97.85 97.37 97.67RSD(%) 0.252.2 抗氧剂 BHT 的检测2.2.1BHT 的标准曲线按照 1.3.2 的方法进样 BHT 对照品溶液，对照品色谱峰面积见表 3，以浓度对峰面积进行线性回归绘制标准曲线，结果见图 2
8、。得出线性回归方程为 y = 2.257x + 1.0013，相关系数 R2 = 0.9994，表明该曲线准确可信。表 3 BHT 对照品色谱峰面积附件 1浓度（g/ml） 1 2 5 10 20色谱峰面积 3.510 5.818 11.995 22.986 46.465图 2 BHT 对照品线性关系图y = 2.257x + 1.0013R2 = 0.9994051015202530354045500 5 10 15 20 25浓 度 g/ml面积2.2.2 胶塞中 BHT 的含量根据供试品溶液中 BHT 的色谱峰面积，计算胶塞中可 BHT 的含量。结果见表4。结果表明，河北橡一医药科技股份
9、有限公司生产的不同批次胶塞，BHT 的含量无明显差异。表 4 胶塞中 BHT 的含量批号 14021202 14021203 14021204色谱峰面积 12.081 12.104 12.118含量（g/g） 125.79 125.70 124.85RSD(%) 0.422.3 胶塞在药液中的浸提试验将 1.3.3 所得供试品溶液按照 1.3.1 可提取硫检测方法及 1.3.2 BHT 检测方法分别进样检测，结果见表 5。结果表明，河北橡一医药科技股份有限公司生产的三个批号的胶塞在肝素钠注射液中浸提，均无可提取硫及 BHT 浸出。表 5 胶塞在药液中可提取硫与 BHT 检测结果含量（ug/g）
10、药液规格 胶塞批号可提取硫 BHT14021202 ND ND14021203 ND ND5ml：5000 单位14021204 ND ND14021202 ND ND14021203 ND ND5ml：25000 单位14021204 ND ND附件 13 结论综合提取试验各项检测结果得出：河北橡一医药科技股份有限公司生产的三个批号的胶塞通过适宜溶剂浸提，可获得可提取硫及抗氧剂 BHT。在以肝素钠注射液为提取液的供试品中，无可提取硫及 BHT 浸出，预计对用药安全无影响。参考文献1直接接触药品的包装材料和容器管理办法（国家食品药品监督管理局令第 13 号）2国家食品药品监督管理局.国家药品包
11、装容器（材料）方法标准：YBB00142002 药品包装材料与药物相容性试验指导原则.2002.3化学药品注射剂与塑料包装材料相容性研究技术指导原则（试行）（国食药监注2012267 号4李樾，杨会英，王峰，孙会敏.药用卤化丁基胶塞中可提取硫的检测研究J.中国药事，2014，28（11）：1257-1260.5 许慧，叶永彬 ，方旻，谢新艺 高效液相色谱法检测脂肪乳注射液中的抗氧剂BHT：J今日药学 2015,25(5):338-339,3466赵霞,胡昌勤 ,金少鸿. 对考察药用丁基胶塞与药物相容性的思考与建议J. 中国药事,2007, 21(10):810-812.7 赵霞,胡昌勤 ,金少
12、鸿. 药用丁基胶塞中易挥发性成分的成分分析J. 药物分析杂志,2006, 26(3):315-318.Abstract:Taking the brominated butyl rubber stoppers which are for injection and producted by Hebei First Rubber Medical Technology Co., LTD as the research object, we analyzed the content of extractable sulphur and BHT by HPLC and also did the rese
13、arch of rubber stopper which is extracted by heparin sodium injection. The experiment showed that the three batches of rubber stopper produced by the company could generate the extractable sulphur and BHT through the appropriate solvent extraction. However, there were not extractable sulphur and BHT from the samples which were extracted by heparin sodium injection.Keywords: brominated butyl rubber stoppers for injection extractable sulphur BHT HPLC
