1、选修一生物技术实践 第 1 页 共 5 页生物选修 1 基础知识整理实验 1 大肠杆菌的培养和分离1.大肠杆菌是革兰氏 性 （异化作用类型）的肠道杆菌，其细胞壁由 组成。2.大肠杆菌在肠道中一般对人 害，有些菌株可以侵袭肠粘膜并产生 ，但任何大肠杆菌进入人的 ，都会对人体产生危害。3.大肠杆菌在基因工程技术中被广泛的应用，它的 是最常用的运载体，它也是基因工程中常用的 。4.细菌的扩大培养使用 培养基；分离使用 培养基。5.涂布分离需要先将培养的菌液稀释，通常稀释 倍。6.划线分离使用的器具是 ；涂布分离使用的是 。两者操作简单的是 ，分离效果好的是 。7.培养基配好之后要先调节 PH，细菌通
2、常在 环境生长，霉菌要求在 环境生长。培养基加入氯化钠目的是 。8.各种器皿、培养基一般用 法灭菌，但培养基若含葡萄糖则需适当 ，含尿素则需用 。如何可知培养基灭菌是否充分？ 9.实验器具灭菌后放入 60-80的烘箱烘干去除水分，目的是 ；实验用棉花不能是脱脂棉，原因是 。10.将大肠杆菌接种到液体培养基后，将三角瓶在 37 振荡培养 12h。11.划线后的培养皿需倒置，原因是 。12.培养后如何判断是否有杂菌污染？ 。13.培养后，将单菌落用接种环取出，再用划线的方法接种到 上，37 培养 24h，放在 保存。1.若要扩大培养酵母菌，需用 LB 液体培养基。2.划线法和涂布法即可用于微生物接
3、种，也可用于微生物纯化。3.为保证无菌操作，倒平板和划线分离等过程都在酒精灯火焰旁进行，且实验者要站在紫外灯照射的环境中进行操作。4.倒平板的意思是将配置的固体培养基倒过来放置。5.为保证无菌操作，实验者的双手、试验台等都需要灭菌。6. 真菌喜荤，细菌喜素。7灭菌锅气压务必内外相等时再开锅，目的是防止容器中的液体暴沸。8.培养基一定不能 沾在三角瓶口、试管管口和培养皿壁上，否则容易污染。9.取菌种前，灼烧接种环的目的是消灭接种环上的微生物，灼烧后为防止污染要立刻取菌种。10.除第一次划线外，其余划线前都要灼烧接种环的目的是消灭接种环上残留菌种。操作完灼烧接种环的目的是防止细菌污染环境和操作者。
4、来源: 学|科|网 Z|X|X|K11.涂布分离法获得的单菌落数往往比菌液中微生物实际数量偏少。实验 2 分离以尿素为氮源的微生物选修一生物技术实践 第 2 页 共 5 页1土壤环境中有一些细菌含有 ，它们可以通过降解尿素作为其生长的氮源。尿素分解的化学方程式为： 。2本实验需设置对照，即以 为对照组，以 唯一氮源、其它营养条件与对照组相同的 为实验组。实验组的菌落数目 对照组的菌落数目。3尿素溶液需用 过滤，目的是 。4本实验用 法分离细菌。实验中要 保存在 70%酒精中进行消毒。5本实验配制固体培养基时要添加 ，而不使用琼脂，是因为琼脂中含有 元素，这样可以排除琼脂中氮元素对实验结果的干扰
5、。6实验用的土样一般从 取得。7本实验尿素培养基中还加入了 作指示剂，因为尿素被尿酶分解后产生的氨与该指示剂显 色。可根据细菌菌落周围 判断细菌分解尿素能力的大小。1.玻璃刮刀从酒精中取出即可直接使用。2.稀释土壤溶液需用无菌水，取样时尽量只取悬液。实验 4 果汁中的果胶和果胶酶1果胶是植物 的主要成分，由 和 组成。2果胶不溶于 ，这是鉴别果胶的简易方法。3果胶可被 和 水解。果胶水解的最终产物是 4制作果汁时使用果胶酶 可以提高 和 。5一般用于生产果胶酶的微生物有 和 。1.水果中的固形物会降低果汁营养成分，也会影响其澄清度。2.果胶可以结合大量水分，降低植物组织的分散性。3.果胶酶还可
6、作为洗衣粉的添加剂，用以除去衣服上的果汁、果酱类污垢。4. 间歇搅拌2030min的目的是使果胶酶和反应物果胶充分接触，有利于化学反应顺利进行。实验 6 -淀粉酶的固定化及淀粉水解作用的检测1固定化酶就是将 的酶用物理或化学方法固定在 某种介质上使其成为 而又有酶活性的酶制剂。固定化酶具有易储存、运输和 等等多种优点。2酶固定化的方法有 、 、 、 等。3常用的淀粉指示剂是 ，遇淀粉显 色。淀粉的水解产物不同，显色也不同。完成下列填空： 4本实验固定 淀粉酶的方法是 ，载体是 。5. 淀粉酶的最适 PH 为 ，最适温度为 6如何证明洗涤固定化淀粉酶柱的流出液中已经没有淀粉酶 1淀粉酶是一类能水
7、解淀粉的复合酶。2唾液里的淀粉酶就是 淀粉酶。选修一生物技术实践 第 3 页 共 5 页实验 8 果酒及果醋的制作1与酒制作有关的微生物是 ，其异化作用类型是 型。 菌种不同，所产生的酒的风味也不同。2酵母菌只有在 条件下，才能进行酒精发酵，且当培养液中酒精浓度超过 时，酵母菌就会死亡。实验原理用反应式表示为 3.影响酒精发酵的主要环境条件有 、 和 。酒精发酵是一般将温度控制在 范围内。4本实验葡萄的消毒用 溶液。葡萄皮上本来已经有野生酵母存在，但为了加快发酵速度，还可另外添加 。5发酵瓶中的溶液量不能超过容积的 。装得太满则发酵过程中溶液易溢出。发酵温度应在 为宜。6用纯葡萄制作的葡萄酒不
8、含糖，酒精含量也低。若要制作酒精含量和糖含量都较高的果酒，则发酵液中应该加入一定的 。发酵开始时，酵母菌进行 呼吸，由于其细胞呼吸底物不是葡萄糖，消耗的氧气多，产生的二氧化碳少，发酵瓶会出现负压。7. 在酒精发酵过程中每隔一段时间拧松瓶盖或打开排气口，其原因是在发酵过程中产生 ，防止瓶内气压过高引起爆裂。8.葡萄酒呈现深红色的原因是在发酵过程中 进入到发酵液中。9与醋制作有关的微生物是 ，其异化作用类型是 型。在 和 都充足时，将糖分解形成醋酸；当缺少糖源时可将 转变成醋酸。10.醋酸发酵反应式： 11 4发酵过程中，甲瓶流入乙瓶的液体流量应当 于乙瓶流入丙瓶的液体流量，流速大约是 。5每天用
9、 pH 鉴测流出液，等到流出液 PH 或 瓶中的液体 时，停止实验选修一生物技术实践 第 4 页 共 5 页1. 酒精发酵装置中使用弯曲的玻璃管，即可以隔绝空气，保持无氧环境，同时还能避免杂菌进入，还可以使产生的二氧化碳气体排出容器，保持压强平衡。实验 10 泡菜的腌制和亚硝酸盐的测定1泡菜腌制过程中起作用的主要是 和 。但这类食品含有一定量的对人体有害的致癌物质 。2制作泡菜需要 环境，微生物利用菜中的 和其他营养物进行发酵，发酵产物有 和 物质等。3泡菜发酵时间过长，则 生长过多会产生霉变味。4.亚硝酸盐可与 发生 反应，产物再与 偶联，形成 色产物。亚硝酸盐含量不同，颜色深浅也不同，可用
10、 法测定泡菜中的亚硝酸盐的含量。测定时，所测溶液的颜色要与 的颜色进行比对。1. 泡菜制作时加白酒即可抑制表面杂菌滋生，也是一种调味剂。实验 11 植物的组织培养1植物组织培养过程：离 体 器 官 、 组 织 或 细 胞 脱 分 化 愈 伤 组 织 再 分 化 根 、 芽 植 物 体 2两种类型的植物组织培养比较：比较项目 茎的组织培养 花药离体培养材料属性 体细胞 花药（生殖细胞）生殖方式 生殖 生殖理论依据 基本过程 脱分化、再分化影响因素 材料、营养、激素、pH、温度、光照、无菌条件等3实验使用的生长素是人工合成的 ，细胞分裂素是人工合成的 。4. 有利发芽； 有利生根， 愈伤组织继续生长不分化；5. MS 培养基：由 、 、 组成。6培养过程：先用 培养基培养出较多的丛状苗，然后将丛状苗分株，再移入 培养基中，使其 。炼苗：生根后，将苗移至草炭土或蛭石中，逐渐降低 进行锻炼。 ：待苗健壮后再移至土中培养。7本实验中用到的激素都是人工合成的，人工合成的激素作用时间比天然的植物激素作用时间 ，是因为 。8.若用自然生长茎进行组织培养，可取一段茎在 浸泡 10 分钟，再放入 浸泡 5 分钟，然后在用另一 浸泡 5 分钟，最后用 清洗。选修一生物技术实践 第 5 页 共 5 页
