1、免疫组化抗原修复简介,为何要进行抗原修复抗原修复的种类抗原修复的原理抗原修复的操作抗原操作的应用,为何要进行抗原修复,常规的石蜡切片的组织要经过福尔马林固定和石蜡包埋，虽然上述过程能良好的保存标本在光镜下的形态，但是会不同程度地破坏组织的抗原，降低组织的抗原与抗体的免疫反应率。,抗原修复的种类,热修复（HIER）蛋白酶修复（PIER）双修复（特殊抗原和双染）不修复,抗原修复的原理,抗原修复目前常用的有热修复（HIER），蛋白酶修复（PIER）和不修复。不同的修复的原理不同。热修复的原理蛋白酶修复原理,热修复(HIER)的原理,“石说”：固定通过改变蛋白结构降低免疫反应性，AR逆转大部分福尔马林
2、导致的蛋白修饰，冷却后，会重建“近天然”的结构，免疫反应的恢复是通过蛋白表位的复性。,热修复的特点,易于施行易于标准化,蛋白酶修复(PIER)原理,蛋白酶的消化通过破坏福尔马林造成的蛋白交联，实现抗原的修复。该方法的缺点是：破坏组织的完整性，会破坏抗原，而且酶的浓度，反应时间，反应温度造成很大的差异，标准化难度较大。,抗原修复的操作,热修复（HIER）蛋白酶修复（PIER）双重修复,热修复（HIER）,高压修复煮沸法修复微波修复水浴加热,高压修复,切片先脱蜡水化将修复液注入高压锅，将液体煮沸放入切片（甩开水分）盖上盖子，等喷气，计时1.52分钟（800W1000W）冷却，冲洗玻片上的修复液,1
3、.5-2min,10min,高压锅直接修复,高压锅隔水间接修复,煮沸法修复,将修复液注入不锈钢锅中煮沸后，加入切片（甩干水分）用保温档，处理20分钟左右冷却，冲洗玻片上的修复液,蛋白酶修复（PIER）,切片脱蜡水化切片上滴加酶，放入孵育盒，处理一定时间时间到，取出切片，冲洗。,双重修复,脱蜡水化后，对切片进行胰酶消化然后，对切片进行热修复,抗原操作的应用,时间温度冷却细节,MOC31（上皮糖蛋白-2，EGP-2),EGFR(CLONE:EGFR.113),HBcAg(兔多抗),C/H,NO,结论,正确的修复对抗体的表达十分重要抗原修复是一个个性化的方法，由抗体的克隆号，病理标本的类型等决定。合适的修复方法才能获得最佳的修复效果。,谢谢！,
