1、1第一章 绪论一、名词翻译并解释1cell biology 2cell theory 3Protoplast 4Cytogenetics 5cytophysiology 6cytochemistry二、填空题1 细胞 是生命体结构与活动的基本单位。2我国基础科学发展规划中生命科学的四大基础学科是细胞生物学 、分子生物学 、神经生物学 、 生态学 。31925 年提出“一切生命的关键问题都要到细胞中去寻找”的是 Wilson 。4研究细胞中物质代谢、能量代谢、衰老与死亡等内容的分支学科称为 细胞生物学 。5研究细胞结构和功能异常与疾病关系的细胞生物学分支称为 细胞病理学 。6细胞工程包括 细胞融
2、合 、细胞器移植 、染色体工程 、细胞和组织培养 。71840 年 Pukinje 和 1846 年 von Mohl 首次将动植物细胞的内含物称为 原生质 ;1861 年,Max Schultze 提出了 原生质理论 ,认为有机体的组织单位是一小团原生质,这种物质在一般有机体中是相似的; 1880 年,Hanstein 提出 原生质体 概念。8. 1841 年 Remak 发现现鸡胚血细胞的直接分裂;其后 flemming 在动物细胞中、Strasburger 在植物细胞中发现 有丝分裂 ;1883 年 van Beneden 在动物细胞中和 1886 年 Strasburger 在植物细胞
3、中分别发现 减数分裂 。91883 年 van Beneden 和 Boveri 在动物细胞中发现中心体 ;1894 年 Altmann 首次发现了 线粒体 ;1898 年 Golgi 发现 高尔基体 。10恩格斯将 细胞学说 、 能量转化与守恒定律 、达尔文进化论 并列为 19 世纪自然科学的三大发现,推动了人类对于自然界的认识。11为了促进细胞生物学科的发展与国际交流,成立了世界性的细胞生物学国际联盟 。我国 1980 年也成立了 中国细胞生物学学会 。12细胞生物学的分支包括 细胞遗传学 、细胞生理学 、 细胞化学 。三、单项选择题1最早发现细胞并对其命名的是( ),有关细胞的首次描述记
4、录在 1665 年发表的显微图谱 。AHooke BLeeuwenhoek CBrown DFlemming EDarven2细胞学说的创始人是( )。AHooke BLeeuwenhoek CWatson 和 Crick DVirchow ESchleiden 和 Schwann31894 年 Altmann 首次发现了( )。A中心体 B高尔基体 C线粒体 D内质网 E纺锤体4Hooke 于 1665 年观察到的细胞实际上是( )。A植物死亡细胞的细胞壁 B死去的动物细胞 C活的植物细胞 D细菌51674 年 Leeuwenhoek 用自制的显微镜观察到了( )。A植物细胞的细胞壁 B精子
5、、细菌等活细胞 C细胞核 D高尔基体等细胞器6未对细胞学说的建立作出直接贡献的是( )。A罗伯特胡克 B施莱登 C施旺 D魏尔肖7细胞遗传学的创始人是( )。AMendel BCrick CMorgan DVirchow EWaldeyer8最先利用离心技术分离获得细胞核和细胞器的是( )。AWaldeyer Bvan Beneden CHertwig DC1aude9动物有丝分裂的发现者是( )。AStrasburger BFlemming CWaldeyer Dvan Beneden EHertwig10组织培养技术的创建者是( )。AHarrison 和 Carrel BClaude C
6、Feulgen DMorgan四、判断题1细胞生物学的发展趋势是细胞学与分子生物学等其他学科相互渗透、相互交融。 (Y )2细胞学说的提出是 1839 年,真正形成完整的细胞学说是 1858 年。( Y )3显微镜分辨率的提高、石蜡切片方法和染色方法的改进对各种重要细胞器的发现是非常关键的。( Y )4胡克发现的细胞是软木中的活体细胞。(N )5当今细胞生物学的发展热点集中在细胞通信与细胞信号传导、细胞增殖与细胞周期的控制、细胞的衰老与死亡、干细胞及其应用等方面。( Y )2五、简答题1细胞生物学的主要研究内容有哪些?2列出几本国内外有关细胞生物学的期刊。3简述细胞学说的建立过程及主要内容,并
7、说明为什么说细胞学说的真正完善是 1858 年。参考答案一、名词解释1cell biology(细胞生物学):从细胞的显微结构、超微结构和分子结构的各级水平研究细胞的结构与功能的关系,从而探索细胞生长、发育、分化、繁殖、遗传、变异、代谢、衰亡及进化等各种生命现象规律的科学。2cell theoy(细胞学说) :施莱登和施旺提出一切动植物都由细胞发育而来,并由细胞和细胞产物所构成;每个细胞作为相对独立的单位,也与其他细胞相互影响;魏尔肖后来对细胞学说做了重要的补充,强调细胞只能来自细胞。3protoplast(原生质体):除细胞壁之外的细胞内所有的生活物质。4cytogenetics(细胞遗传学
8、):主要从细胞学角度,特别是从染色体的结构和功能,以及染色体与其他细胞器的关系来研究细胞的遗传与变异机制。5cytophysiology (细胞生理学) :主要研究细胞对周围环境及信号的反应、细胞生长与繁殖的机制等重要问题。6cytochemistry (细胞化学) :主要对细胞内的各种化学成分进行定性、定位、定量以及动态变化研究。二、填空题1细胞2细胞生物学 分子生物学 神经生物学 生态学3Wilson4细胞生理学5细胞病理学6细胞融合 细胞器移植 染色体工程 细胞和组织培养7原生质 原生质理论 原生质体8Flemming 有丝分裂 减数分裂9中心体 线粒体 高尔基体lO细胞学说 能量转化与
9、守恒定律 达尔文进化论11细胞生物学国际联盟 中国细胞生物学学会12细胞遗传学 细胞生理学 细胞化学三、单项选择题1A 2E 3C 4A 5B 6A 7C 8D 9B 10A四、判断题1 2 3 4 5五、简答题1细胞生物学研究的主要内容包括以下几个方面:细胞核、染色体、基因表达;生物膜与细胞器;细胞骨架体系;细胞增殖及其调控;细胞分化及其调控;细胞衰老与凋亡;细胞的起源与进化;细胞工程。2国外杂志有:Science 、 Nature 、 Cell 、 Plant Cell 、 Journal of Cell BiolOgy 、 Trends in Cell Biology 。国内杂志有:中国
10、科学 、 科学通报 、 植物学报 、 植物生理与分子生物学学报 、 细胞生物学杂志 、 实验生物学报 、 动物学报 。3(1)细胞学说的建立过程 1838-1839 年,德国植物学家施莱登发表植物发生论 ,指出细胞是构成植物细胞的基本单位。 1839 年德国动物学家施旺发表关于动植物的结构和生长一致性的显微研究 ,指出动植物都是细胞的集合物。 施莱登与施旺共同提出细胞学说:一切动植物都是由细胞构成的,细胞是一切动植物的基本单位。(2) 当时细胞学说的基本内容 细胞是有机体的基本单位,一切动植物都由细胞发育而来,并由细胞和细胞产物构成。 每一个细胞作为相对独立的单位,既有它自己的生命,又对整个生
11、命体产生影响。 新的细胞可以通过老的细胞繁殖产生。1840 年,一些学者认识到细胞的繁殖是通过某种分裂的形式进行的,最初细胞学说中关于“细胞的繁殖是新细胞在老细胞的核中产生”的谬误被纠正。1858 年魏尔肖指出,细胞只能来自细胞,进一步指明细胞作为一个相对独立的生命活动基本单位的性质。这一观点被认为是对细胞学说的一个重要补充。第二章 细胞的统一性和多样性一、名词翻译并解释1cell 2prokaryotic cell 3eukaryotic cell 4archaeobacteria 5plasmid3二、填空题1与动物细胞相比,植物细胞所特有的结构是 细胞壁 、 叶绿体 、 大液泡 。2 是
12、仅由蛋白质构成的病毒,原核细胞的主要代表是 细菌 和蓝藻 。3迄今发现的最小、最简单的细胞是 支原体 。4细胞是由膜包围并能进行独立繁殖的 原生质团 。5病毒的分类方式多种多样,按核酸的种类分为 DNA 病毒 和 RNA 病毒 ;按宿主的不同分为 动物病毒 、 植物病毒 和 噬菌体 。6真核细胞与原核细胞最根本的区别可概括为两点: 细胞膜系统的分化与演变 和 遗传信息量与遗传装置的扩增,复杂化 。7病毒 是最小、最简单的有机体。8古核细胞与原核细胞的不同点表现在 细胞壁成分 、 DNA 与基本结构 、 核小体结构 、 核糖体 、和 5S rRNA 。9细胞内代谢活动最大的特点为 严格有序 。1
13、0一切有机体的生长与发育都是以 细胞的增值和分化 为基础的,细胞凋亡 是生长与发育的不可缺少的平衡因素。11 核酸 在病毒中所占比例较小,是病毒的感染单位。蛋白质 在病毒中比例较大,主要构成病毒的 壳体 。病毒的主要抗原性也是由 壳体蛋白 决定的。12病毒的增殖过程首先是 病毒侵入细胞 , 病毒核酸 篡夺细胞 DNA 对代谢过程的指导作用,利用 宿主细胞 全套代谢机构,以 病毒核酸 为模板,并翻译 病毒蛋白质 ,然后装配成新一代的病毒颗粒。13病毒的核酸类型可分为 双链 DNA 病毒 、 单链 DNA 病毒 、 单链 RNA 病毒 、 双链 RNA 病毒 ,其中单链 RNA 病毒又可分为 侵染
14、性 RNA 病毒 、 非侵染性 RNA 病毒 及 带有逆转录酶的单链 RNA 病毒即肿瘤病毒 。14地球上的生物可分为 原核生物 、真核生物 和 古核生物 。15细胞质和原生质的概念是不同的,前者是指 细胞内除核以外的生活物质 ,后者则是 生活细胞内所有生活物质 。三、单项选择题1原核细胞与真核细胞都有的一种细胞器是( )。A细胞骨架 B线粒体 C高尔基体 D中心体 E核粳体2以下关于细胞共性的描述,不正确的是( )。A组成细胞的基本元素是相同的 B所有的细胞包括病毒都具备两种核酸 DNA 与 RNAC核糖体是任何细胞不可缺少的基本结构 D所有的细胞均采用一分为二的分裂方式进行繁殖3细菌细胞的
15、表面特化结构包括荚膜与鞭毛,还有( )。A细胞膜 B糖萼 C细胞壁 D中膜体4细菌细胞内除了核区的 DNA 外,还存在可以进行自我复制的遗传因子( )A叶绿体 DNA B线粒体 DNA C核糖体 DNA D质粒5支原体是最简单的细胞,下列叙述不正确的是( )。A是目前发现的最小、最简单的细胞,直径一般只有 0.1O.3 mB目前已经从动物、污染的环境及植物中分离出很多支原体C最早发现的支原体为拟胸膜肺炎病原体D支原体具备细胞壁,同时也具备形态的多样性6以下论述错误的是( )。A无包膜的病毒释放速率要明显快于有包膜的病毒,有包膜的病毒是以出芽的方式释放B原核生物均是单倍体C在光学显微镜下,原核生
16、物的核区经过特殊染色可以呈现各种形状,但没有强的 Feulgen 正反应,说明它与真核细胞的核不一样D细菌的鞭毛结构与真核细胞的鞭毛结构是完全一致的7以下关于蓝藻的叙述正确的是( )。A蓝藻细胞的遗传信息载体与其他原核细胞一样,而且遗传信息的容量也一样B蓝藻细胞同时含有叶绿素 a 和叶绿素 bC蓝藻没有进行光合作用的专门的细胞器,仅有十分简单的光合作用结构装置光合片层D蓝藻的藻体均是单细胞状态8细胞体积守恒定律表明( )。A细胞的体积与相对表面积成反比B细胞体积和细胞核体积在不同物种间均相差悬殊4C器官的大小主要取决于细胞的数量和细胞的大小两个关键因素D卵细胞与外界物质交换很少,同样遵守细胞体
17、积守恒定律9以下关于古核细胞的有关论点不正确的是( )。A古核细胞是生长在极端环境条件下的细菌 B古核细胞的细胞壁成分更类似于真核细胞C古核细胞的 DNA 与细菌类似,不含有重复序列 D古核细胞核糖体组成与细菌一样10最早发现的古核细胞是( )。A盐细菌 B硫氧化菌 C热原质体 D产甲烷细菌四、判断题1某些病毒含有 DNA,还含有 RNA。 ( N )2病毒是结构很简单的生物,就起源来看,病毒起源早于单细胞。 ( N )3细胞的形态结构与功能相一致。 ( Y )4细胞遵守细胞体积守恒定律,不论物种间的差异有多大,同一器官和组织的细胞,其大小倾向于在一个恒定的范围内。 (Y )5所有的生命体均由
18、细胞构成。 ( N )6构成高等生物体的细胞虽然都是高度“社会化”的细胞,具有分工与协同的相互关系,但它们又保持着形态与结构的独立性,每个细胞具有自己独立的一套完整的结构体系,构成有机体的基本单位。 (Y )7细胞结构完整性的些许破坏,不会导致细胞代谢有序性和自控性的失调。 ( N )8任何细胞都具备遗传的全能性,每一种细胞都具备发育为个体的潜在能力。 ( Y )9从细胞内分离得到的线粒体与叶绿体,在条件合适的情况下,可以在体外持续培养,并完成其代谢活动。 (N )10所有的细胞都具备两种核酸(即 DNA、RNA),以此作为遗传信息复制与转录的载体。 ( Y )11病毒只有一种核酸(DNA 或
19、 RNA),两种核酸不可能兼得,以此作为遗传信息的载体。 ( Y )12RNA 病毒所含有的 RNA 只有单链一种类型。 ( N )13凡是有包膜的病毒对有机溶剂很敏感,在有机溶剂作用下容易灭活。 ( Y )14RNA 病毒的核酸是在细胞质内进行复制与转录的,多数 DNA 病毒的核酸转移进入细胞核内再进行复制与转录。( Y )15引起细胞转型的 RNA 肿瘤病毒其复制过程与 DNA 病毒及 RNA 病毒基本一致,没有根本的区别。 ( N )五、简答题1为什么说古核细胞比细菌更可能是真核细胞的祖先?2简述细胞体积守恒定律的主要观点。3比较原核细胞与真核细胞在结构上的异同。4试举两例说明真核细胞形
20、态结构与功能的关系。5简要说明抗生素的杀菌机理及细菌对抗生素的耐药性的形成过程。6讨论以下叙述:“病毒是寄生物,它们对宿主生物是有害的,因此使宿主生物在进化中处于不利的地位。 ”7真核生物内膜结构体系的形成有什么意义?参考答案一、名词解释1cell(细胞) :是由膜包围的能独立进行繁殖的原生质团,是生物体最基本的结构和功能单位,具有进行生命活动的最基本的要素。2prokaryotic cell(原核细胞):无核膜,DNA 游离在细胞质中;染色体为环状,仅有一条;缺少发达的内膜系统;细胞小,多在 0.210 m 之间;至今未发现细胞骨架。3eukaryotic cell(真核细胞):有膜结构围成
21、的细胞核,DNA 与蛋白质结合,形成染色质(体),基因组至少有两条染色体;有内膜系统,包括内质网、高尔基体、溶酶体、线粒体、叶绿体等;具有细胞骨架系统。4archaeobacteria(古细菌) :又称原细菌、古核生物,是一些生长在极端特殊环境中的细菌;最早发现的古核生物为产甲烷细菌类,后来又陆续发现盐细菌、硫氧化菌等。5plasmid(质粒 ):细菌内除了核区的 DNA 外,存在的可自主复制的遗传因子。二、填空题1叶绿体 大液泡 细胞壁2朊病毒 细菌 蓝藻3支原体4原生质团5DNA 病毒 RNA 病毒 动物病毒 植物病毒 噬菌体6细胞膜系统的分化与演变 遗传信息量与遗传装置的扩增、复杂化7病
22、毒8细胞壁成分 DNA 与基因结构 核小体结构 核糖体 5S rRNA9严格有序510细胞的增殖和分化 细胞凋亡11核酸 蛋白质 壳体 壳体蛋白12病毒侵人细胞 病毒核酸 宿主细胞 病毒核酸 病毒蛋白质13双链 DNA 病毒 单链 DNA 病毒 双链 RNA 病毒 单链 RNA 病毒 侵染性 RNA 病毒 非侵染性RNA 病毒 带有逆转录酶的单链 RNA 病毒即肿瘤病毒14原核生物 古核生物 真核生物15细胞内除核以外的生活物质 生活细胞中所有生活物质三、单项选择题1E 2B 3D 4D 5D 6D 7C 8A 9C 10D四、判断题1 2 3 4 5 6 7 8 9 10. 11 12 13
23、 14 15五、简答题1古细菌又可称古核生物。其形态结构和遗传装置与原核生物相似,但一些分子进化特征更接近于真核生物。因其在进化和起源中扮演重要角色,日益受到科学家重视。古细菌细胞壁成分与真核生物一样不含有真细菌所特有的肽聚糖。真细菌的细胞 DNA 不含有重复序列,而古核细胞与真核生物一样含有重复序列。 大部分真细菌核糖体为 70S,而古核生物核糖体有增大趋势,含有 60 种以上蛋白质,介于真核细胞与真细菌。核糖体对抗生素的反应更类似于真核细胞。 5S rRNA 与真核细胞更接近。2不论物种间的差异有多大,同一器官与组织的细胞,其大小更倾向在一个恒定的范围之内。细胞的体积与相对表面积成反比。细
24、胞体积在不同物种间均相差悬殊,而细胞核体积相差不大。器官的大小主要取决于细胞的数量,与细胞的数量成正比,而与细胞的大小无关。细胞内物质交流的速率与细胞体积成反比。3原核细胞与真核细胞的异同如下表所示:结 构 原核细胞 真核细胞细胞膜 有( 具有多功能性) 有核糖体 有 有内膜系统 无( 至少不发达) 有核膜 无 有染色体 无 有细胞骨架 无 有细胞大小 0.210 m 10100m4以哺乳动物红细胞为例:红细胞呈扁圆形,有利于在血管内快速运动;红细胞的体积很小,则其表面积很大,有利于提高气体交换效率;红细胞没有细胞核也没有其他重要细胞器,主要由细胞膜包裹着血红蛋白,这些特点有助于结合更多氧气。
25、以生殖细胞为例:雄性细胞与雌性细胞经过特化,结构装置简化到只有利于完成受精过程与卵裂;精细胞除携带一套完整的单倍基因组(即高度的浓缩核)外,其他结构装置只保证其运动与进入卵细胞内;卵细胞则相反,为了保证受精后卵裂与早期胚胎发育,必须在细胞质内储藏大量的遗传物质、蛋白质与养料。5(1)抗生素的杀菌机理(以青霉素、四环素、链霉素、红霉素、氯霉素为例):青霉素主要通过抑制壁酸的合成,进一步抑制细胞壁的合成,从而达到抑菌作用。革兰阳性菌因细胞壁的壁酸含量高,故对青霉素敏感,革兰阴性菌对青霉素不敏感,30s的小亚基对四环素和链霉素很敏感,50s的大亚基对红霉素和氯霉素敏感。它们大都通过干扰多肽链翻译环节
26、而发挥抑菌作用。(2)细菌对抗生素的耐药性的形成过程:暴露在逆境中的细胞群体有一个或少数几个可能发生突变,使它们获得抵抗药物的能力。这些突变细菌会继续快速分裂,对抗生素有抗性的细菌不久便会在培养物中成为优势种。6由于具有在细胞之间转移核酸序列的能力,病毒在其所侵染生物的进化中起着重要作用。许多病毒会随机携带宿主染色体的部分片段并转移到不同的细胞或生物体中。因此,病毒通过促进基因库的混合而加快进化过程。病毒通常在对生物个体有害的同时,整体上可能对一个物种是有益的。7细胞内部区域化,形成了一些特定的功能区域和微环境(细胞内功能分化) ,分别执行独立的功能而又彼此协作。保证了反应物的浓度,增加了表面
27、积,使一些有害的酶得以保护,提供了特殊的运输通道等。保证了膜的动态性质,维持膜结构的一致性以及通过膜流保证细胞膜的更新。第三章 细胞生物学研究方法一、名词翻译并解释1resolution 2fluorescence microscopy 3.autoradiography 4scanning electron microscopy 5scanning transmission electron microscopy 6 immunofluorescence 7. immunoelectron microscopy 68Microspectrophotometry 9. cell enginee
28、ring 10cell line 11. monoclonal antibody technique 12differential centrifugation 13. isodensity centrifugation 14cell strain 15. cell-free system二、填空题1物质经过紫外线照射后发出荧光的现象可分为两种情况,第一种是 自发荧光 ,如叶绿素、血红素等经紫外线照射后,能发出红色的荧光;第二种是 激发荧光 ,即物体经荧光染料染色后再通过紫外线照射发出荧光。2写出一种细胞融合的物理方法:电融合技术 。举出化学融合所需的一种化学物质: 聚乙二醇 。3定量细胞化学
29、分析技术有 显微分光光度分析 、流式细胞仪 。特殊显微镜有荧光显微、 相差显微镜 等类型。4电子显微镜主要由以下几部分构成:电子束照明系统 、 成像系统 、 真空系统 、 记录系统 。5超薄切片常用的固定剂有 锇酸 和戊二醛 ,样品固定的物理方法有 高频微波 。6用快速低温冷冻法将样品迅速冷冻,然后在低温下进行断裂,样品往往从其结构相对脆弱的部位 膜脂双分子层的疏水端 断裂,从而显示出镶嵌在膜脂中的 蛋白质颗粒 。7冷冻蚀刻技术主要用于观察膜断裂面的 蛋白质颗粒和膜面结构 ,图形富有立体感,样品无须包埋,也无须固定。8快速冷冻深度蚀刻技术主要用于观察胞质中的 细胞骨架纤维 及其结合蛋白 。9电
30、镜三维重构技术 与 X 射线晶体衍射技术及核磁共振分析技术相结合,是研究结构生物学 的主要实验手段。10扫描电子显微镜主要用于观察 样品的表面形貌 ,常常采用 CO2 对生物样品进行干燥。为了得到良好的表面导电性,样品在观察前还需要 喷镀一层金膜 。11Feulgen 反应可以特异显示 DNA 的分布 ,PAS 反应可以确定 多糖 ,四氧化锇 可以证明脂肪滴的存在。12免疫荧光 和免疫电镜 是最常见的研究细胞内蛋白质分子定位的重要技术,而对蛋白质进行体外定性分析则通常采用 免疫印迹 和放射免疫沉淀技术。13免疫电镜技术可分为 免疫铁蛋白技术 、免疫酶标技术 、 免疫胶体技术 。14细胞内特异核
31、酸序列的定性与定位通常采用 原位杂交技术 。15细胞显微分光光度测定技术可以分为 紫外光显微分光光度测定技术 和 可见光显微分光度测定技术 。16基因型相同的细胞融合产生 同核融合细胞 ,基因型不同的细胞融合产生异核融合细胞 。通过细胞杂交形成的单核子细胞称为 融合核细胞 。17动物受到外界抗原刺激后可诱发免疫反应,产生相应的抗体,这一职能由 B 淋巴细胞 承担。18正常细胞生长到彼此相互接触,其运动和分裂活动都将停止的现象称 接触抑制 。19相差显微镜与普通光学显微镜的区别是用 环状光阑 代替可变光阑,用 带相差板的物镜 代替普通物镜,并带有一个合轴用的望远镜。20适于观察活细胞的光学显微镜
32、有 相差显微镜 、 暗视野显微镜 和 倒置显微镜 等。三、单项选择题1通过筛选或克隆形式从原代培养物或细胞系中获得具有特殊性质或标志的细胞群体称为( )。Acell line Bcell strain Ccell library D. others2研究 DNA 在细胞中的代谢,常用的同位素标记物有( )A 14C-戊糖 B 32P-磷酸 C 15N-鸟嘌呤 D 3 H-胸腺嘧啶脱氧核苷3细胞融合的诱导剂主要有( )。APEG(聚乙二醇) BTMV(烟草花叶病) 病毒C亚硝酸-诱变剂 DPHV( 植物凝集素)-外围培养4关于细胞培养技术叙述错误的是( )。A可用来研究细胞生理和细胞各种功能B首
33、先用胰蛋白酶将动物或植物组织进行酶解,游离出单细胞后再进行培养C用小牛血清配制的培养基进行动物细胞培养D培养过程可用倒置显微镜进行观察5关于杂交瘤技术叙述正确的是( )。AB 淋巴细胞与 B 淋巴瘤细胞融合,目的是抑制瘤细胞无限生长B在培养基中加入氨基蝶呤可选出杂交细 胞C氨基蝶呤可抑制瘤细胞的蛋白质合成D氨基蝶呤能导致 B 淋巴细胞无限分裂76光学显微镜同电子显微镜比较,下列各项中不正确的是( )。A电子显微镜用的是电子束,而不是可见光B电子显微镜样品要在真空中观察,而不是暴露在空气中C电子显微镜和光学显微镜的样品都需要用化学染料染色D用于电子显微镜的标本要彻底脱水,光学显微镜则不需要7在动
34、物细胞培养过程中要用( )来观察细胞分裂状况。A电子显微镜 B暗视野显微镜 C倒置显微镜 D普通倒置光学显微镜8在递增细胞匀浆液的离心转速过程中最先沉淀下来的是( )。A核糖体 B线粒体 C未破碎的细胞 D微粒体和细胞9单个植物细胞在体外经过诱导并培养成为完整的植物小植株的实验最好地证明了( )。A细胞是构成有机体的基本单位 B一切有机体均来自细胞C细胞是有机体生长、发育的基础 D细胞具有遗传的全能性10显微镜的分辨率与( )无关?A光源的波长 B物镜的镜口角 a C介质的折射率 N D放大倍数11下列同位素半衰期最长的是( )。A 32P B 14C C 131I D 35S E 3H12研
35、究 RNA 合成时常用的标记物为( )。A 3H-TdR B 3H-U C 14C-TdR D 35S-U13下列不属于细胞系的特点的是( )。A无限分裂 B染色体数维持正常水平 C染色体出现畸变 D失去接触抑制14以下关于相差显微镜的叙述,错误的是( )。A用于观察活细胞和未染色的生物标本B细胞各部分细微结构的折射率和厚度不同,光波通过时,波长和振幅并不发生变化,仅相位发生变化(振幅差),这种振幅差肉眼无法观察C相差显微镜通过改变相位差,并利用光的衍射和干涉现象,把相位差变为振幅差来观察活细胞和未染色的标本D可以用于超微结构的观察15以下关于激光扫描共焦显微镜的叙述,错误的是( )。A共焦点
36、是指物镜和聚光镜同时聚焦到一个小点B可以自动改变观察的焦平面而且纵向分辨率得到改善C可以通过光学切片观察样品的内部结构,并可重构三维图像D相比普通荧光显微镜分辨率提高 50 倍四、判断题1电子显微镜样品仅用重金属盐进行染色以形成明暗反差,只能通过电子束振幅的改变观察到黑白图像,不能像光镜切片染色那样通过改变波长而获得彩色图像。( Y )2在电子显微镜制样中,锇酸主要染色蛋白质,铅盐容易染色脂肪,醋酸铀主要用来染色核酸。( N)3超薄切片技术可以与放射性同位素自显影、细胞化学、免疫电镜和电镜原位杂交技术结合,用于不同目的的研究。( Y )4用于电子显微镜观察的生物样品会有一些特殊要求,如要求样品
37、很薄以及更好地保持样品的精细结构。( Y )5在固定操作过程中,样品的处死与取材都要快速进行,通常在室温下固定,以防止酶的自溶作用造成破坏。( N )6包埋的目的是要使样品中各种细微结构在切片过程中得到均匀良好的支撑,使切片连续完整并有足够的强度,并能耐受干燥、观察时的电子轰击、高温和真空挥发。( Y )7扫描透射电子显微镜具备光学显微镜无可比拟的分辨率,目前人们也可以用它观察活的生物标本。(N )8扫描电子显微镜景深长,成像具有较强的立体感,可用于观察核孔复合体等精细结构。( Y )9曾有人因电镜三维重构技术及扫描隧道显微镜技术而获得诺贝尔奖。( Y )10扫描隧道显微镜是一种探测微观世界物
38、质表面形貌的仪器,与其功能类似的还有原子力显微镜,可以在纳米生物学研究中发挥重要作用。(Y )11由于大多数固定剂对酶都有钝化作用,在进行细胞中某种酶的研究时,样品制备或采用冷冻切片,或以冷丙酮、甲醛进行短期固定,尽量保持酶的活性,然后将样品与适宜底物温育。( Y )12样品经免疫酶标记后必须在荧光显微镜下进行观察。( N )13免疫胶体金技术是目前免疫电镜技术中使用最普遍的技术。( Y )14免疫电镜技术最关键的问题是保持样品中蛋白的抗原性以及样品的精细结构,并且要设立严格的对照。 ( Y )15原位杂交技术在显微与亚显微水平上的基因定位、特异 RNA 表达等研究中发挥重要作用。 ( Y )
39、16原位杂交技术只能在光学显微镜水平上应用。 ( N )17可见光显微分光光度测定技术是根据某种物质特异的染色反应,然后再测定其对可见光某波段的吸收能力对物质进行定量测定。 ( Y )818非细胞体系在研究 DNA 复制、RNA 转录、蛋白质合成、高尔基体膜泡运输机制以及细胞核装配等方面显示了非常重要的作用。 (Y )19细胞融合可以在基因型相同的细胞间进行,也可以在基因型不同的种内细胞间进行,但是不能在种间细胞间进行。 (N )20杂交细胞在培养过程中会发生染色体丢失现象,凡是亲本亲缘关系较近的,后代细胞染色体较稳定,但亲缘关系较远的杂交细胞容易发生丢失。 ( Y )五、简答题1动物体细胞克
40、隆有什么意义?2用表格的形式比较电子显微镜与光学显微镜的原理。3扫描隧道显微镜的主要特点有哪些?4在研究工作中分离得到一个与动物减数分裂直接相关的基因 A,如果想由此获得该基因的单克隆抗体,请简要叙述实验原理及实验方案。参考答案一、名词翻译并解释1resolution(分辨率):是指区分开两个质点间的最小距离。2fluorescence microscopy(荧光显微镜技术):分子由激发态回到基态时,由于电子跃迁而由被激发分子发射的光称为荧光。荧光显微技术包括免疫荧光技术和荧光素直接标记技术。荧光显微镜用于研究细胞内物质的吸收、运输、化学物质的分布及定位等。3autoradiography(放
41、射自显影) :是利用放射性同位素的电离辐射对乳胶(含 AgBr 或 AgCl)的感光作用,对细胞内生物大分子进行定性、定位与定量的一种细胞化学技术。4scanning electron microscopy(扫描电子显微镜,SEM):扫描电子显微镜是 1965 年发明的较现代的细胞生物学研究工具,主要是利用二次电子信号成像来观察样品的表面形态,即用极狭窄的电子束去扫描样品,通过电子束与样品的相互作用产生各种效应,其中主要是样品的二次电子发射。二次电子能够产生样品表面放大的形貌像,这个像是在样品被扫描时按时序建立起来的,即使用逐点成像的方法获得放大像。5scanning transmission
42、 electron microscopy(扫描透射电子显微镜, STEM):像 SEM 一样,STEM 用电子束在样品的表面扫描,但又像 TEM,通过电子穿透样品成像。STEM 能够获得 TEM 所不能获得的一些关于样品的特殊信息。STEM 技术要求较高,要非常高的真空度,并且电子学系统比 TEM 和 SEM 都要复杂。6immunofluorescence(免疫荧光技术) :将免疫学方法(抗原一抗体特异结合 )与荧光标记技术结合起来研究特异蛋白抗原在细胞内分布的方法。由于荧光素所发的荧光可在荧光显微镜下检出,从而可对抗原进行细胞定位。7immunoelectron microscopy(免疫
43、电镜):将抗体进行特殊标记后用电子显微镜观察免疫反应的结果。根据标记方法的不同,免疫电镜技术可分为免疫铁蛋白技术、免疫酶标技术和免疫胶体金技术。由于某些固定技术(如锇酸固定)对抗体、抗原的结合有干扰,因此应采取较为温和的样品制备方法。8microspectrophotometry(显微分光光度测定技术):将显微镜技术与分光光度计结合起来的技术。它以物质分子的光吸收、荧光发射和光反射特性作为测定基础,可用来分析生物样品细微结构中的化学成分,同时进行定位、定性和定量。9cell engineering(细胞工程):细胞工程是细胞水平的生物工程,主要利用细胞生物学的原理和方法,结合工程学的技术手段,
44、按照人们预先的设计,有计划地改变或创造细胞遗传性的技术。细胞工程包括体外大量培养和繁殖细胞,或获得细胞产品,或利用细胞体本身。10ce11 line( 细胞系):原代培养物经首次传代成功后即为细胞系。11monoclonal antibody technique(单克隆抗体技术): 1975 年英国科学家 Milstein 和 Kohler 发明该技术,并获得1984 年诺贝尔医学和生理学奖。它是将产生抗体的单个 B 淋巴细胞同肿瘤细胞杂交,获得既能产生抗体,又能无限增殖的杂种细胞,并以此生产抗体的技术。12differential centrifugation(差速离心):差速离心主要是采取逐渐提高离心速