1、碱性铜盐法测还原糖含量目的：掌握碱性铜盐法测还原糖的原理和方法 原理：碱性酒石酸铜甲液和乙液等量混合，生成深蓝色的可溶性酒石酸钾钠铜络合物，加热条件下其可以将还原糖氧化成醛酸，本身还原成氧化亚铜沉淀。反应终点用亚甲基蓝指示，其氧化型为蓝色，还原型为无色，还原糖将二价铜全部还原后，稍过量的还原糖则可以把亚甲基蓝还原，由蓝色变为无色，即为滴定终点。 试剂 ： 碱性酒石酸铜甲液： 称取 15g 硫酸铜（CuSO4 5H2O）及 0.05g 次甲基蓝，溶于水中并稀释至 1000mL。 碱性酒石酸铜乙液 ：称取 50g 酒石酸钾钠及 75g 氢氧化钠，溶于水中，再加入 4g 亚铁氰化钾，完全溶解后，用水
2、稀释至 1000mL，贮存于橡胶塞玻璃瓶内。 乙酸锌溶液 ：称取 21.9g 乙酸锌，加 3mL 冰乙酸，加水溶解并稀释至 100mL。 亚铁氰化钾溶液（10.6+89.4 ）： 称取 10.6g 亚铁氰化钾，加水溶解并稀释至 100mL。 葡萄糖标准溶液（1mg/mL） 精密称取 1.000g 经过 98100干燥至恒量的纯葡萄糖，加水溶解后加入 5mL 盐酸，并以水稀释至1000mL。此溶液每毫升相当于 1mg 葡萄糖。 仪器：碱式滴定管，锥形瓶，电炉 操作步骤 ： 1 样品处理 将样品捣碎混匀待用，样品应避免暴露在空气和阳光下，并尽可能迅速地进行分析。 称取约 2.55g 样品，置于25
3、0mL 容量瓶中，加 50 mL 水，摇匀后慢慢加入乙酸锌溶液 5mL 及亚铁氰化钾溶液（10.6+89.4）5mL，加水至刻度，混匀。静置30min，用干燥滤纸过滤，弃去初滤液，滤液备用。 2 标定碱性酒石酸铜溶液 吸取 5.0mL 碱性酒石酸铜甲液及5.0mL 乙液，置于 150mL 锥形瓶中，加水 10mL，加入玻璃珠 2 粒，从滴定管滴加约 9mL 葡萄糖标准溶液，控制在 2min 内加热至沸，趁沸以每两秒 1 滴的速度继续滴加葡萄糖标准溶液，直至溶液蓝色刚好褪去为终点，记录消耗葡萄糖标准溶液的总体积，同时平行操作三份，取其平均值，计算每 10mL（甲、乙液各 5mL）碱性酒石酸铜溶液
4、相当于葡萄糖的质量（mg） 。 3 样品溶液预测 吸取 5.0mL 碱性酒石酸铜甲液及 5.0mL 乙液，置于 150mL 锥形瓶中，加水 10mL，加入玻璃珠 2 粒，控制在 2min 内加热至沸，趁沸以先快后慢的速度，从滴定管中滴加样品溶液，并保持溶液沸腾状态，待溶液颜色变浅时，以每 两秒 1 滴的速度滴定，直至溶液蓝色刚好褪去为终点，记录样液消耗体积。 4 样品溶液测定 吸取 5.0mL 碱性酒石酸铜甲液及 5.0mL 乙液，置于 150mL 锥形瓶中，加水 10mL，加入玻璃珠 2 粒，从滴定管滴加比预测体积少 1mL 的样品溶液，使在 2min 内加热至沸，趁沸继续以每两秒 1 滴的速度滴定，直至蓝色刚好褪去为终点，记录样液消耗体积，同法平行操作三份，得出平均消耗体积。 5 结果计算 按下式计算糖果中还原糖的含量： 还原糖的含量（以葡萄糖计） = m1/m2v/2501000 *100 式中： m110mL 碱性酒石酸铜溶液（甲、乙液各 5mL）相当于还原糖（以葡萄糖计）的质量，mg； m2样品质量，g； V测定时平均消耗样品溶液体积，mL。 6 精密度 同一样品两次平行测定值相对差不得超过 15%。
