1、第 1 页 共 21 页实验一：观察 DNA、RNA 在细胞中的分布（必修一 P26）一实验目的：初步掌握观察 DNA 和 RNA 在细胞中分布的方法二实验原理1 甲基绿+DNA 绿色两种试剂不是单独使用，应混合使用吡罗红+RNA 红色2 8%盐酸：改变细胞膜的通透性，加速染色剂进入细胞，同时使染色休中的DNA 和蛋白质分离，有利于 DNA 与染色剂结合。0.9%NaCl 溶液：保持口腔上皮细胞正常形态蒸馏水：配制染色剂，冲冼载玻片三方法步骤操作步骤 注意问题 解释取口腔上皮细胞制片载玻片要洁净，滴一滴质量分数为0.9%的 NaCl 溶液（生理盐水）用消毒牙签在自己漱净的口腔内侧壁上轻刮几下取
2、细胞将载玻片在酒精灯下烘干防止污迹干扰观察效果保持细胞原有形态消毒为防止感染，漱口避免取材失败杀死并固定装片；烘干时应来回移动，防止受热不均破裂水解将烘干的载玻片放入质量分数为 8%的盐酸（HCl）溶液中，用 300C 水浴保温 5min改变细胞膜的通透性，加速染色剂进入细胞促进染色体的 DNA 与蛋白质分离而被染色，细胞为死细胞冲冼涂片 用蒸馏水的缓水流冲洗载玻片 10S 洗去残留在外的盐酸缓水流：防止细胞被冲走染色用吸水线除去多余的水分滴 2 滴吡罗红甲绿染色剂于载玻片上染色 5min吸取染色剂 除去多余的染色剂并盖上盖玻片观察先低倍镜观察：选择染色均匀、色泽浅的区域，移至视野中央，调节清
3、晰后才换用高倍物镜观察：使观察效果最佳现象 细胞核大部分被染成绿色细胞质大部分被染成红色 细胞核也有小部分被染成红色细胞质也有小部分被染成绿色结论 DNA 主要集中分布于细胞核中RNA 主要集中分布于细胞质中 在细胞质中也有 DNA 分布在细胞核中也有 RNA 分布几种液体的作用第 2 页 共 21 页实验二： 检测生物组织中的糖类、脂肪和蛋白质（必修一 P18）一实验目的：尝试用化学试剂检测生物组织中糖类、脂肪和蛋白质二实验原理：某些化学试剂能使生物组织中的有关有机化合物，产生特定的颜色反应。1还原糖（如葡萄糖、果糖、麦芽糖）+ 斐林试剂 砖红色沉淀。甲液：0.1g/ml NaOH 溶液乙液
4、：0.05g/ml CuSO 4 溶液实质： 是还原糖（全部单糖、麦芽糖、果糖、乳糖）与新制的 Cu ( OH ) 2反应生成砖红色氧化亚铜（Cu 2O）。2脂肪可以被 苏丹染液染成橘黄色 （或被 苏丹染液染成红色 ）。3蛋白质与双缩脲试剂发生作用，产生紫色反应。（蛋白质分子中含有很多肽键，在碱性NaOH 溶液中能与双缩脲试剂中的 Cu2+作用，产生紫色反应。）A 液：0.1g/ml NaOH 溶液B 液：0.01g/ml CuSO 4 溶液实质： 在碱性条件下，肽键结构与铜离子反生络合反应，生成紫色络合物。 4. 淀粉遇碘变蓝色。三实验材料1做还原糖鉴定实验：应选含糖高，颜色为白色或近白色的
5、植物组织，如苹果、梨。（因为组织的颜色较浅，最好无色，防止颜色干扰且易于观察。）2做脂肪的鉴定实验：应选富含脂肪的种子，以花生种子为最好，实验前一般要浸泡 34小时（也可用蓖麻种子）。3做蛋白质的鉴定实验：可用富含蛋白质的黄豆或鸡蛋清等。四、实验试剂斐林试剂、苏丹或苏丹染液、双缩脲试剂、体积分数为 50%的酒精溶液，碘液、蒸馏水。五、方法步骤（一）可还原糖的鉴定操 作 方 法 注 意 问 题 解 释1. 制备组织样液。（去皮、切块、研磨、过滤）苹果或梨组织液必须临时制备。要取组织的颜色较浅，最好无色，易于观察。因苹果多酚氧化酶含量高，组织液很易被氧化成褐色，将产生的颜色掩盖。2. 取 1 支试
6、管，向试管内注入 2mL 组织样液。3. 向试管内注入 1mL 新制的斐林试剂，振荡（此时呈现斐林试剂的颜色：浅蓝色）。应将组成斐林试剂的甲液、乙液分别配制、储存，使用前才将甲、乙液等量混匀成斐林试剂；切勿将甲液、乙液分别加入苹果组织样液中进行检测。斐林试剂很不稳定，易分解。甲、乙液分别加入时可能无 Cu ( OH )2生成。4. 试管放在盛有 50-650C 温水的大烧杯中， 加热约 2 分钟 ，观察到溶液颜色：浅蓝色 棕色 砖红色（沉淀）最好用试管夹夹住试管上部，使试管底部不触及烧杯底部，试管口不朝向实验者。也可用酒精灯对试管直接加热。防止试管内的溶液冲出试管，造成烫伤；缩短实验时间。留适
7、当样液与反应后溶液做对照，结论：组织样液中含有还原糖水浴加热斐林试剂 使用时：甲乙液等量混匀后立即使用双缩脲试剂使用时：先加 A 液后加 B液第 3 页 共 21 页（二）脂肪的鉴定显微镜观察法操 作 方 法 注 意 问 题 解 释花生种子浸泡、去皮、切下一些子叶薄片，将薄片放在载玻片的水滴中，用吸水纸吸去装片中的水。干种子要浸泡 34 小时，新花生的浸泡时间可缩短。因为浸泡时间短，不易切片，浸泡时间过长，组织较软，切下的薄片不易成形。切片要尽可能薄些，便于观察。 取最理想的薄片，放在载玻片中央在子叶薄片上滴 23 滴苏丹或苏丹染液，染色 1 分钟。染色时间不宜过长。用吸水纸吸去薄片周围染液，
8、用50%酒精洗去浮色，吸去酒精。 酒精用于洗去浮色防止浮色影响对橘黄色脂肪滴的观察。酒精是脂溶性溶剂，可将花生细胞中的脂肪颗粒溶解成油滴。用吸水纸吸去薄片周围酒精，滴上 12 滴蒸馏水，盖上盖玻片。滴上清水可防止盖盖玻片时产生气泡。低倍镜下找到花生子叶薄片的最薄处，可看到细胞中有染成橘黄色或红色圆形小颗粒。装片不宜久放。 时间一长，油滴会溶解在乙醇 中。花生种子匀浆 + 苏丹 III 染液 橘黄色 或 花生种子匀浆 + 苏丹 IV 染液 红色三、蛋白质的鉴定操 作 方 法 注 意 问 题 解 释制备组织样液（浸泡、去皮研磨、过滤。）黄豆浸泡 1 至 2 天，容易研磨成浆，也可购新鲜豆浆以节约实
9、验时间。鉴定：加样液约 2ml 于试管中加入双缩脲试剂 A，摇匀再加入双缩脲试剂 B 液34 滴，摇匀 溶液变紫色A 液和 B 液也要分开配制，储存。鉴定时先加 A 液后加B 液。CuSO4溶液不能多加。先加 NaOH 溶液，提供一个碱性的环境。A、B 液混装或同时加入，会导致 Cu2+变成 Cu ( OH ) 2沉淀，而失效。否则 CuSO4的蓝色会遮盖反应的真实颜色。可用蛋清代替豆浆。 蛋清要先稀释。如果稀释不够，在实验中蛋清粘在试管壁，与双缩脲试剂反应后会粘固在试管内壁上，使反应不容易彻底，并且试管也不易洗干净。留适当样液与反应后溶液做对照第 4 页 共 21 页附：淀粉的检测和观察用试
10、管取 2ml 待测组织样液，向试管内滴加 2 滴碘液，观察颜色变化。碘液不要滴太多 以免影响颜色观察实验三：用显微镜观察多种多样的细胞（必修一 P7）一实验目的（1）使用高倍显微镜观察几种细胞，比较不同细胞的异同点（2）运用制作临时装片的方法二实验原理：利用高倍镜可以看到某些在低倍镜下无法看到的细胞结构，例如：可以看到叶绿体、线粒体等细胞器（能看到细胞器，无法看清细胞器结构），从而能够区别不同的细胞。光学显微镜 细胞显微结构图：不能显示细胞器的内部结构电子显微镜 细胞亚显微结构图：能显示细胞器的内部结构三显微镜的使用：不能直接使用高倍显微镜，一定是先低倍后高倍观察低倍显微镜的使用：取镜 安放
11、对光 压片 调焦 观察高倍显微镜的使用：在低倍镜下找到目标 移装片使观察对象位于视野中央 转动转换器换高倍镜 调焦 观察注：移中央：观察对象在哪往哪移；由低倍换高倍镜后一定不能转动粗准焦螺旋（容易压坏玻片），只需轻轻转动细准焦螺旋微调即可四相关问题物镜：有螺纹，镜头越长，放大倍数越大，距离装片的距离越近 目镜：无螺纹，镜头越长，放大倍数越小总放大倍数目镜放大倍数物镜放大倍数显微镜放大倍数是指物体的长度与宽度放大倍数物像大小 视野范围 看到细胞数目 视野亮度 物镜与装片距离低倍镜 小 大 多 亮 远高倍镜 大 小 少 暗 近为什么要先用低倍镜观察清楚后，把要放大观察的物像移至视野的中央，再换高倍
12、镜观察？提示：如果直接用高倍镜观察，往往由于观察的对象不在视野范围内而找不到。因此，需要先用低倍镜观察清楚，并把要放大观察的物像移至视野的中央，再换高倍镜观察。五：讨论1.试归纳所观察到的细胞在结构上的共同点，并描述它们之间的差异，分析产生差异的可能原因：答：共同点是：有细胞膜、细胞质和细胞核，植物细胞还有细胞壁。可能原因是：这些细胞的位置和功能不同，其结构与功能相适应，这是个体发育过程中细胞分化产生的差异2.低倍镜换为高倍镜后，若看不到或看不清原来的像，可能原因？（ABC）显微镜镜头放大倍数第 5 页 共 21 页A、物像不在视野中 B、焦距不在同一平面 C、载玻片放反，盖玻片在下面 D、未
13、换目镜3.污点判断：(1）污点随载玻片的移动而移动，则位于载玻片上；(2）污点不随载玻片移动，换目镜后消失，则位于目镜；换物镜后消失，则位于物镜；(3）污点不随载玻片移动，换镜后也不消失，则位于反光镜上。实验四：用高倍镜观察线粒体和叶绿体（必修一 P47）一、实验目的使用高倍镜观察叶绿体和线粒体的形态分布。二、实验原理叶肉细胞中的叶绿体：因其本身含有色素，呈绿色故不需染色，呈扁平的椭圆球形或球形。线粒体：本身无色，需染色体才能观察到。线粒体+健那绿染液 蓝绿色健那绿染液是专一性染线粒体的活细胞染料，染色后细胞仍然是活的。三、实验材料观察叶绿体时选用：藓类的叶、黑藻的叶。取这些材料的原因是：叶子
14、薄而小，叶绿体清楚，可取整个小叶直接制片，所以作为实验的首选材料。（若用菠菜叶作实验材料，要取菠菜叶的下表皮并稍带些叶肉。因为表皮细胞不含叶绿体。）观察线粒体时选用：人口腔上皮细胞或紫色洋葱鳞片叶内表皮细胞（无色）四、方法步骤实验步 骤 注 意 问 题 分 析1制片：用镊子取一片黑藻的小叶，放入载玻片的水滴中，盖上盖玻片。制片和镜检时，临时装片中的叶片不能放干了，要随时保持有水状态否则细胞或叶绿体失水收缩，将影响对叶绿体形态和分布的观察。2低倍镜下找到叶片细胞观察叶绿体3高倍镜下观察叶绿体的形态和分布1制作人的口腔上皮细胞临时装片在洁净载玻片中央滴一滴健那绿染液用牙签取口腔上皮细胞盖盖玻片健那
15、绿染液是活细胞染料（不影响细胞生命）观察线粒体2低倍找到口腔上皮细胞后，换高倍镜观察线粒体蓝绿色的是线粒体，细胞质接近无色。 专一性染线粒体的第 6 页 共 21 页五、讨论1、细胞质基质中的叶绿体，是不是静止不动的？为什么？答：不是。呈椭球体形的叶绿体在不同光照条件下可以运动，这种运动能随时改变椭球体的方向，使叶绿体既能接受较多光照，又不至于被强光灼伤。2、叶绿体的形态和分布，与叶绿体的功能有什么关系？答：叶绿体的形态和分布都有利于接受光照，完成光合作用。如叶绿体在不同光照条件下改变方向。又如叶子上面的叶肉细胞中的叶绿体比下面的多，这可以接受更多的光照。实验五： 通过模拟实验探究膜的透性（必
16、修一 P60“问题探讨”）一、实验目的：1.概述扩散作用的含义。2说明生物膜的选择透过性。3.尝试模拟实验的方法。二实验原理：半透膜(semipermeable membrane)：指一类可以让小分子物质透过而大分子物质不能通过的薄膜的总称。小分子和大分子的界定依据膜种类的不同而划分范围不同。如动物的膀胱膜、肠衣等，可以让某些物质透过，而另一些物质不能透过；或者（玻璃纸）水分子可以透过，而蔗糖分子因为比较大，不能透过。可以用半透膜将不同浓度的溶液分隔开，然后通过观察溶液液面高低的变化，来观察半透膜的选择透过特性，进而类比分析得出生物膜的透性。三、实验流程 四、注意事项在两漏斗的 液面 处做标记
17、观察前须先静置一段时间。五、实验结果：A 漏斗中液面下降，烧杯中的液体变蓝，说明长颈漏斗中的 铜离子和水分子已经通过玻璃纸进入了烧杯内的蒸馏水中(图 A)。B 漏斗中的液面上升，说明 水可以通过玻璃纸向漏斗内扩散，而漏斗中的蔗糖和红1. 取两个长颈漏斗，分别在漏斗口处封上一层 玻璃纸 。设置装置（如图）2.在 A 漏斗中注入硫酸铜溶液，3.B 漏斗中注入蔗糖溶液，并加4.入少许红墨水，使其略呈红色。4.观察烧杯中蒸馏水颜色的变化及长颈漏斗的液面变化，并将观察到的结果填入表中。3.将两个漏斗分别浸入盛有蒸馏水的烧杯中。第 7 页 共 21 页墨水的染料分子不能透过玻璃纸。六、实验结论：生物膜有
18、选择透过性 。七讨论：1漏斗管内的液面为什么会升高？答：由于单位时间内透过玻璃纸进入长颈漏斗的水分子数量多于从长颈漏斗渗出的水分子数量，使得管内液面升高。2如果用一层纱布代替玻璃纸，漏斗管内的液面还会升高吗？答：用纱布替代玻璃纸时，因纱布的孔隙很大，蔗糖分子也可以自由通透，因而液面不会升高。实验六：观察植物细胞的质壁分离和复原（必修一 P61“探究”）一、实验目的1学会观察植物细胞质壁分离与复原的方法。 2了解植物细胞发生渗透作用的原理。二实验原理1 质壁分离 的原理：当细胞液浓度外界溶液浓度时，细胞就会通过渗透作用而吸水，外界溶液中的水分就通过原生质层进入到细胞液中，整个原生质层就会慢慢地恢
19、复成原来的状态，紧贴细胞壁，使植物细胞逐渐发生质壁分离复原3原生质层：包括细胞膜、液泡膜以及两层膜之间的细胞质；相当于一层半透膜。二、实验材料紫色洋葱鳞片叶的外表皮。因为液泡呈紫色，易于观察。也可用水绵代替。0.3g/ml的蔗糖溶液。用蔗糖溶液做质壁分离剂对细胞无毒害作用。三、实验步骤步 骤 注 意 问 题 分 析1制作洋葱外表皮细胞的临时装片:在载玻片上滴一滴水，撕取洋葱鳞片叶外表皮放在水滴中展平【也可挑取几条水绵放入水滴中】。盖上盖玻片。盖盖玻片应让盖玻片的一侧先触及载玻片，然后轻轻放平。防止装片产生气泡。2观察洋葱（或水绵）细胞可看到：液泡大，呈紫色，原生质层紧贴着细胞壁。【或水绵细胞中
20、有带状叶绿体，原生质层呈绿色，紧贴着细胞壁】。液泡含花青素，所以液泡呈紫色。先观察正常细胞与后面的“质壁分离”起对照作用。（前后对照分离前与分离后对照）第 8 页 共 21 页3观察质壁分离现象:从盖玻片的一侧滴入 03g/ml 的蔗糖溶液，在另一侧用吸水纸吸引，重复几次。镜检。观察到：液泡由大变小，颜色由浅变深，原生质层与细胞壁分离。推测：原生质层与细胞壁之间充满蔗糖溶液。重复几次糖液浓度不能过高蔗糖溶液浓度大于细胞液浓度，细胞通过渗透作用失水，细胞壁伸缩性小原生质层的伸缩性大，液泡和原生质层不断收缩，所以发生质壁分离为了使细胞完全浸入蔗糖溶液中。否则，细胞严重失水死亡，看不到质壁分离的复原
21、。4观察细胞质壁分离的复原现象:从盖玻片的一侧滴入清水，在另一侧用吸水纸吸引，重复几次。镜检。观察到：液泡由小变大，颜色由深变浅，原生质层恢复原状。发生质壁分离的装片，不能久置，要马上滴加清水，使其复原。重复几次。细胞液的浓度高于外界溶液，细胞通过渗透作用吸水，所以发生质壁分离复原现象。因为细胞失水过久，也会死亡。为了使细胞完全浸入清水中。四、实验讨论答案1如果将上述表皮细胞浸润在与细胞液浓度相同的蔗糖溶液中，这些表皮细胞会出现什么现象？答：表皮细胞维持原状，因为细胞液的浓度与外界溶液浓度相等。2当红细胞细胞膜两侧的溶液具有浓度差时，红细胞会不会发生质壁分离？为什么？答：不会。因为红细胞不具细
22、胞壁。3用 8%的食盐溶液、5%的硝酸钾、尿素、甘油、乙二醇等进行质壁分离实验是会出现自动复原吗，为什么？ 答：会，因细胞可以吸收这些物质，使细胞液浓度逐渐变大。4质壁分离与复原的引用：判断细胞死活；测定溶液浓度范围（类似于探究生长素类似物最适浓度实验）；验证细胞壁与原生质层伸缩性大小；比较不同植物细胞细胞液溶度；比较一系列溶液浓度大小（逆向思维）。 实验七：探究影响酶活性的因素（必修一 P78、P83）一实验目的1探究不同温度和 PH 对过氧化氢酶活性的影响。 2培养实验设计能力。二方法步骤提出问题作出假设设计实验（包括选择实验材料、选择实验器具、确定实验步骤、设计实验记录表格）实施实验分析
23、与结论表达与交流。验证高效性: 实例 1：比较过氧化氢酶和 Fe3+的催化效率一）实验原理鲜肝提取液中含有过氧化氢酶，过氧化氢酶和 Fe3+都能催化 H2O2分解放出 O2。经计算，质量分数为 3.5%的 FeCl3溶液和质量分数为 20%的肝脏研磨液相比，每滴 FeCl3溶液中的Fe3+数，大约是每滴肝脏研磨液中过氧化氢酶分子数的 25 万倍。二）方法步骤步骤 注意问题 解释取 4 支洁净试管，编号，分别加入 2mL H2O2溶液不让 H2O2接触皮肤 H2O2有一定的腐蚀性第 9 页 共 21 页将 2 号试管放在 900C 左右的水浴中加热，观察气泡冒出情况，与 1 号对照向 3 号、
24、4 号试管内分别滴入 2 滴 FeCl3溶液和 2 滴肝脏研磨液，观察气泡产生情况不可用同一支滴管肝脏研磨液必须是新鲜的肝脏要制成研磨液由于酶具有高效性，若滴入的 FeCl3溶液中混有少量的过氧化氢酶，会影响实验准确性因为过氧化氢酶是蛋白质，放置过久，可受细菌作用而分解，使肝脏组织中酶分子数减少，活性降低研磨可破坏肝细胞结构，使细胞内的酶释放出来，增加酶与底物的接触面积2-3min 后，将点燃的卫生香分别放入 3 号和 4号试管内液面的上方，观察复燃情况放卫生香时，动作要快;不要插到气泡中现象：4 号试管产生气泡多，冒泡时间短，卫生香猛烈复燃，3 号试管产生气泡少，冒泡时间长，卫生香几乎无变化
25、避免卫生香因潮湿而熄灭实例 2：温度对酶活性的影响一）实验目的1初步学会探索温度对酶活性的影响的方法。2探索淀粉酶在不同温度下催化淀粉水解的情况。二）实验原理1淀粉遇碘后，形成紫蓝色的复合物。2淀粉酶可以使淀粉逐步水解成麦芽糖和葡萄糖（淀粉水解过程中，不同阶段的中间产物遇碘后，会呈现红褐色或红棕色。）麦芽糖和葡萄糖遇碘后不显色注：市售 a-淀粉酶的最适温度约 600C三）方法步骤操作 注意问题 解释取 3 支试管，编上号，然后分别注入 2mL 可溶性淀粉溶液另取 3 支试管，编上号，然后分别注入 1mL 新鲜淀粉酶溶液将装有淀粉溶液和酶溶液的试管分成 3 组，分别放入热水（约 600C）、沸水
26、和冰块中，维持各自的温度 5min不能只用不同温度处理淀粉溶液或酶溶液防止混合时，由于两种溶液的温度不同而使混合后温度发生变化，反应温度不是操作者所要控制的温度，影响实验结果。分别将淀粉酶溶液注入相同温度下的淀粉溶液中，摇匀后，维持各自的温度 5min保持各自温度时间不能太短淀粉酶催化淀粉水解需要一定时间在 3 支试管中各滴入 1-2 滴碘液，摇匀后观察这 3 支试管中溶液颜色变化并记录碘液不能滴加太多 防止影响实验现象的观察第 10 页 共 21 页注意：该实验产生还原糖，最好不要用斐林试剂；（斐林试剂鉴定要水浴加热，从而改变了酶所处的温度）若非用斐林试剂不可时，先将酶变性处理掉。用表格的形
27、式显示实验步骤试管序号 加入试剂或处理方法A B C a b c可溶性淀粉溶液 2mL 2mL 2mL / / /1新鲜淀粉酶溶液 / / / 1mL 1mL 1mL2 保温 5min 600C 1000C 00C 600C 1000C 00C3 将 a 液加入到 A 试管，b 液加入到 B 试管，c 液加入到 C 试管中，摇匀4 保温 5min 600C 1000C 00C5 滴入碘液，摇匀 2 滴 2 滴 2 滴6 观察现象并记录注意：该实验不能用过氧化氢酶做实验，过氧化氢受热分解。实例 3：PH 值对酶活性的影响操作步骤：用表格形式显示实验步骤：（注意操作顺序不能错）注意：该实验可以用过
28、氧化氢酶做实验。注意：以上两个实验要找到最适温度或最适 PH 值必须先做预实验。酶活性表示方法：出现同一结果所需的时间（具体表示）；还可用同一时间出现的不同结果进行比较，但是该方法只能粗略表示酶活性。实验八：叶绿体色素的提取和分离（必修一 P97）一实验目的1尝试用 过滤方法 提取叶绿体中的色素和用 纸层析法 分离提取到的色素。2分析实验结果，探究叶绿体中有几种色素，以及各自所呈现的颜色。二实验原理1提取：叶绿体中的色素是有机物易溶于有机溶剂而不溶于水，可用 无水乙醇、丙酮 等能提取。2分离：叶绿体色素在层析液中的溶解度不同，溶解度高的随层析液在滤纸上扩散得快，溶解度低的随层析液在滤纸上扩散得慢。所以可用纸层析法来分离四种色素。
