1、血液去除白细胞技术的研究进展,白细胞： 是人体血液中的一种重要成分，通常每升含有(210)109个，它是人体自然防御体系的重要组成部分，在机体防御外来病原体与抗原等免疫功能中起着重要作用。,为何要去除白细胞（WBC）,血液的异体输注,分成份,保存,献血者血液,保存,患者,血液均有一个保存过程,各种血细胞的寿命,* 2-6在红细胞保存液中，此处寿命主要指粒细胞吞噬性能的保持。,与白细胞相关的输血副反应,同种异体免疫反应 非溶血性发热反应（FNHTR） 血小板输注无效 输血相关移植物抗宿主病（TA-GVHD） 病原体的输血传播 巨细胞病毒(CMV) ，人类T淋巴细胞白血病病毒(HTLV-/) 带状
2、疱疹，EBV，HIV 肝炎病毒，疯牛病病毒 ？ 小肠结肠炎耶尔森菌（唾白细胞细菌） 免疫抑制（TRIM） 术后感染 癌症复发 激活潜伏病毒,引起的输血副反应的白细胞阈值,* 国外1u为450ml,总 结,20的受血者会遇到输血副反应 90的输血副反应与白细胞相关 现代医学认为：WBC为血液的“污染物”， 提倡将其去除,* 本表部分数据摘自杨天楹临床输血 * 输血所产品性能,制备少白细胞血液成份的方法 *,总 结,从方法学的发展历史看，过滤法去白细胞是目前最有效的方法。,白细胞滤器及其发展,白细胞滤器的发展历史,60年代 第一代血液过滤器 滤除凝块,70年代 第二代血液过滤器 滤除微聚体,筛网式
3、,纵深式,柱状白细胞滤器,80年代末 第三代血液过滤器 滤除白细胞,红细胞滤器,血小板滤器,28年 Alexander Fleming 用医用脱脂棉过滤去除血液中的白细胞,白细胞滤器的结构及原理,白细胞滤器结构示意图,滤材的材质,天然纤维： 棉花纤维 合成纤维： 聚酯纤维，醋酸纤维素纤维、聚尼龙、 聚亚胺酯纤维、pp纤维、铜氨纤维 无机纤维： 玻璃纤维，不锈钢纤维,过滤法去除白细胞原理,机械拦截 滤材表层及深层的不规则孔道 红细胞直径：7.58.3um 体积： 8.3um 血小板直径：3.1um 体积： 47.6um 白细胞直径：625um 滤材表面与白细胞间的相互作用力 电荷 分子间力 蛋白
4、吸附 血小板的吸附搭桥,白细胞在滤膜上的情况,滤器的分类,血小板 红细胞（全血、压积、悬液、血浆）,按过滤血液制品的种类,去白细胞输（采）血器结构图,医院用去白细胞输血器结构图,血站用去白细胞输（采）血器结构图,去白细胞输血器实物图,血液滤除白细胞中的一些技术问题,白细胞残留量,国 际 标 准,我 国 标 准,* GB18469-2001 * * YY0329-2002,WBC过滤效果的检测方法,过滤前WBC的检测方法 自动血球计数仪 （灵敏度：100WBC/ul） 过滤后WBC的检测方法 Nagotte Chember 计数板 （AABB灵敏度：1WBC/ul）,血液去白过滤的时机,献血,成
5、份分离,储存,受血,血站,医院,分离前过滤,分离中过滤,过滤,血库,床边,血液过滤的时机,贮存前过滤,贮存后过滤,贮存前过滤的最佳时间：采血后6h以内,有利于提高血液质量减少炎性细胞因子（如IL-6、 TNF- ）在血液贮存过程中的累积。减少白细胞在血液的崩解碎片。减少库存血细菌污染量。有利于血液质量控制,贮存前过滤的优点,贮存前过滤的方法,采用联袋系统，在线（on line）过滤 优点：封闭系统，方便安全 缺点：因血不合格 ，造成滤器的浪费。 无菌连接 优点：滤器的浪费少 缺点：需要专用无菌连接设备和连接片。 涉及多个产品（血袋、连接片及 滤器），质量控制困难。,血液去除白细胞的临床意义,血
6、液去除白细胞的临床意义,避免和减少非溶血性发热反应，减少患者痛苦避免和减少同种免疫的发生避免和减少嗜白细胞病毒（如CMV、HTLV-/等）的输血传播避免和减少移植物抗宿主病的发生避免和减少输血引起的免疫抑制，降低术后感染，减少肿瘤的复发，节省患者的开支大剂量输血时，可避免和减少肺微栓塞的发生,已确认的适应症,减少FNHTR的发生率和严重程度； 预防或延缓HLA同种免疫反应； 预防高危人群的白细胞病毒如 CMV、 HTLV-I/传播,需进一步研究确认的适应症,预防血小板输注无效； 预防对血小板输注的FNHTR； 预防TA-GVHD； 预防术后创口感染； 预防受者潜伏CMV复活或HIV感染； 预防
7、贮存红细胞的细菌过度生长。,临床效果,良好的临床结果（例子）患者医疗费用的节约,过滤除白-节约患者费用,如果只从受血者每次购血的价格看，好象费 用在增加；但如果从整个治疗过程来看，受 血者的总治疗费用是降低的。(资料见后) 更重要的是，不单单是费用降低这个表面现 象。减少病源体感染机会，乃至降低死亡率 才是最大、最重要的问题。,目前血液滤除白细胞的现状,国际上的发展现状,至2001年度，已有24个国家实施或 决定实施100血液去白细胞过滤 亚洲国家：澳大利亚、新西兰 （韩国及泰国也正在积极准备）,国内发展状况,10多个生产厂家，上百万套的产销量。 近300大中、型医疗机构已全面使用。 已有多省
8、市的血液中心、中心血站开展全部血液的白细胞去除工作。,白细胞滤器性能综合评价,白细胞去除率是白细胞滤器最重要的性能指标。有效成份回收率 决定于滞留体积和过滤介质的量及是否有堵塞；血液相容性 溶血、脆性增加，血液成份的激活过滤速度 快-好；决定于滤材和过滤面积；过滤面积（大，则滞留体积大）和回收率矛盾是否堵塞,谢谢！,WBC过滤对PCS保存期间炎性细胞因子水平的影响,中国输血杂志 Vol.15,No.3(2002.6),WBC过滤对PRC保存期间炎性细胞因子水平的影响,青岛市红十字会中心血站 吴同昊 ISBT 上海,WBC过滤对PRC保存期间炎性细胞因子水平的影响,青岛市红十字会中心血站 吴同昊
9、 ISBT 上海,WBC过滤对PRC保存期间炎性细胞因子水平的影响,青岛市红十字会中心血站 吴同昊 ISBT 上海,WBC过滤对PRC保存期间炎性细胞因子水平的影响,青岛市红十字会中心血站 吴同昊 ISBT 上海 返回,1-1 非溶血性输血发热反应,临床表现：,在输血中或输血后4小时内发热，体温较输血前升高1以上，多伴有寒颤、头痛、恶心、胸闷、呼吸困难、皮疹症状，极少数可发生血压下降或过敏性休克（应排除溶血性输血反应）。,发生非溶血性发热反应（FNHTR）原因,抗原抗体反应高效价白细胞因子（IL-1/6，TNF- ）,非溶血性发热反应（FNHTR）发生率,多次输血患者：3070输浓缩血小板：2
10、763输悬浮红细胞：1.66,预防,输血前使用抗组胺和糖皮质激素等药物均 不能预防其发生。 国外的调查结果认为，一次输入血液或血 液成分中的白细胞含量少于5108 ，即去 除90%的白细胞就能有效防止非溶血性输 血发热反应的发生。,返回,返回,（多次）输血、妊娠、器官移植等均可引起同种免疫，使受者产生抗供者白细胞的HLA抗体。当受者再次输入白细胞时，即可发生抗体抗原反应，激活补体，引起白细胞溶解并释放出热原，从而导致发热等症状。抗体的产生与下列因素有关：,抗体抗原反应,受血者的性别抗原强度输血次数和数量、间隔时间受血者的免疫反应敏感性,1-2 血小板输注无效,临床表现：,一些多次输血的病人在反
11、复输注了血小板后并未收到良好的效果，输注后血小板的校正计数增加值（CCI值）低于预期值，这种状态称为血小板输注无效。,发生血小板输注无效的原因,HLA同种免疫引起（约80-90）血小板特异性抗体仅占10%,血小板输注无效发生率,多次输血患者：3070输浓缩血小板：850输悬浮红细胞：044,预防,对HLA同种免疫分原发性和继发性 一次输入的白细胞总数不超过5107 ，即可显著降低原发性 同种免疫，也就是去除了血小板制剂中99%以上的白细胞，则 可明显降低血小板输注无效的发生率。 已致敏的受者少量白细胞也可使其产生继发性同种免疫,返回,1-3 输血后移植物抗宿主病,定义：,TA-GVHD 是指免
12、疫缺损或免疫抑制的患者未能清除输入血液中具有免疫活性的淋巴细胞，使其在体内植活、增植，并将患者的组织器官识为非己物质，作为标靶进行免疫攻击、破坏的一种致命性输血并发症。,发生率：0.01-0.1%病 死率：84-100% 一般认为： 输注血液中残留的白细胞数低于107 ，可使发生输血后GVHD的危险大为降低。 预防：血液辐射,返回,2. 病原体输血传播,一些病毒如巨细胞病毒（CMV）、人类T淋巴细胞白血病病毒（HTLV- / ）等，与白细胞呈高亲和性，无法从感染的供血者血浆中分离，而去除白细胞则可防止这些病毒通过输血传播。CMV对器官和骨髓移植、反复输血和免疫功能低下的病人感染最为严重，并有潜
13、伏、复发和致癌的倾向。 HTLV-1主要流行于日本、非洲和加勒比海沿海地区，受血感染率可达60%，我国已有零星报道。日本、美国等国家早已将HTLV- /列入对献血者血液的必检项目。,返回,3. 免疫抑制（TRIM）,机理： 降低CD4+/CD8+比值 及CD4+ 的绝对值 抑制自然杀伤细胞（NK细胞） 介导： 白细胞 血浆意义： 有益：移植存活率上升 有害：创伤感染率、肿瘤复发率上升,返回,肌与骨骼疾病（DRG209211）留院天数/医疗费用比较,医院每年节约经费USD231,633 Kathie Cunning han “Universal Leukoreduction Evaluateio
14、n” Summit Medical Center,心脏手术(DRG104-27)后留院天数比较,每位患者节约费用USD4,434.66; 医院每年节约经费USD1,800,000 Jame L. Newsome,M.D., Carraway Methodist Hospital,Birmingham,AL,单纯性肺炎和胸膜炎（DRG089）留院天数/医疗费用比较,医院每年节约经费USD82,062 Kathie Cunning han “Universal Leukoreduction Evaluateion” Summit Medical Center,肌与骨骼疾病（DRG209211）留院
15、天数/医疗费用比较,医院每年节约经费USD231,633 Kathie Cunning han “Universal Leukoreduction Evaluateion” Summit Medical Center,胃肠系统疾病（DRG148154）留院天数/医疗费用比较,医院每年节约经费USD1,257,908 Kathie Cunning han “Universal Leukoreduction Evaluateion” Summit Medical Center,胃肠出血（DRG174）留院天数/医疗费用比较,医院每年节约经费USD84,480 Kathie Cunning han
16、“Universal Leukoreduction Evaluateion” Summit Medical Center,结肠手术（DRG148-154）后留院天数比较,医院每年节约经费USD234,651.06 Jame L. Newsome,M.D., Carraway Methodist Hospital,Birmingham,AL,返回,Komai等（1998）报道白细胞滤除对室间隔缺损的心外科手术中肺脏具有保护作用，白细胞去除组患者在心肺转流后的呼吸指数明显低于对照组，在重症监护室的停留时间明显短于对照组。 Gu等（1999）评价了白细胞滤除在心外科病人中对减少白细胞所介导的炎症反应
17、和器官再灌注损伤，手术后炎症反应也减少，减少显著。 Roth等（2000）进行了滤除白细胞血液对严重左心室机能障碍病人随机双盲法研究，在心脏停搏手术过程中使用串行的白细胞滤器可降低心肌细胞的损伤,有利于提高冠脉搭桥术病人严重降低的射血分数的恢复。 Smit等（1998）评价了心外科手术体外循环过程中白细胞过滤的有效性和安全性，表明采用白细胞滤器可有效地滤除白细胞，白细胞滤除组的病人手术后指征的改善较为明显。,Nagase等（1998）观察了患者自体血液滤除白细胞治疗溃疡性结肠炎的效果，在所观察的1978例病人中有195（9.9%），包括92例治疗的病人中有47例（51.1%）产生了一些副作用。
18、应用白细胞滤器去除中度或重度溃疡性结肠炎患者的白细胞可使患者体内炎症因子TNF、IL-1、IL-8的产生立即减少，IL-10立即增加，提示选择性地去除粒细胞、单核细胞和活化的淋巴细胞可抑制炎症细胞因子的产生和增强免疫调理细胞因子的产生。 Suemitsu等（1998）采用白细胞去除治疗法试图治疗一些难治性疾病，如自身免疫性和神经性疾病，取得了良好疗效。但是，经过胸导管引流或连续性离心分离法去除白细胞仍存在许多问题，高风险、高价格和复杂手术。Asahi Medical公司开发了一种新型方法解决了常规存在的问题，通过简单的体外循环时在全血灌注过程中去除白细胞。采用白细胞去除治疗法已被证明对许多炎症性疾病如自身免疫性和神经性疾病具有极好的治疗效果。,返回,
