1、文件编号：南宁市红十字会医院检验科HIV 筛查实验室 第 1 页 共 3 页2011 年 10 月版第 0 次修订HIV 测定（英科新创、胶体金法）标准操作规程实施日期：2011 年 10 月 18 日1、检验目的用于快速定性检测人全血、血清或血浆样品中的 HIV 1/2 型抗体。2、原理采用胶体金免疫技术和层析原理，定性测定全血、血清或血浆样本中的 HIV 1/2 型抗体。检测陽性样本时，样本中的 HIV 抗体与胶体金标记抗原结合形成复合物，由于层析作用复合物沿纸条向前移动，经过检测线时与预包被的重组抗原结合形成夹心物而凝聚显色，游离的胶体金标记重组抗原则在对照线处与抗 HIV 单克隆抗体结
2、合而富集显色。阴性标本则仅在对照线处显色，30 分钟内观察结果即可。3、性能参数 用国家参考品测定，阳性参考品符合率、阴性参考品符合率、精密性、最低检出量、稳定性能均符合要求，测定类风湿因子阳性血清、乙型肝炎、甲型肝炎、梅毒及非肝炎传染病患者等各种类型的血清不得引起干扰。 本测试条/卡仅用于体外诊断试验，仅用于人全血、血清或血浆，其他体液和样本可能得不到准确的结果。 对于下列物质在所给出的浓度下对测试结果不造成影响：测定物质名称 测定的浓度 测定物质名称 测定的浓度胆固醇 200 mg/ml 血红蛋白 178 g/L甘油三酯 200 mg/ml 胆红素 16 mg/L4、标本要求 标本类型：血
3、清或血浆，血浆样本对临床常用抗凝剂（EDTA、肝素、枸橼酸钠）无要求。 标本采集：见标本采集手册。 标本储存和运输：如果血清或血浆样品收集后 7 天内检测，样品须放在 28保存，如果大于 7 天则须冷冻保存；全血标本建议在 3 天内检测，样品放在 28保存，不得冻存。 标本拒收状态：细菌污染，严重溶血或严重脂血标本不能作测定。5、容器和添加剂类型使用一般干燥管（不添加任何东西） ，或 EDTA、柠檬酸钠、肝素抗凝管盛放血液。6、贮存条件及有效期储存条件：4-30密封干燥处保存，有效期为 16 个月。文件编号：南宁市红十字会医院检验科HIV 筛查实验室 第 2 页 共 3 页2011 年 10
4、月版第 0 次修订HIV 测定（万泰、胶体金法）标准操作规程实施日期：2011 年 10 月 18 日7、操作步骤【血清、血浆样本】（1）将待测标本从储存条件下取出，平衡至室温并编号。（2）将所需数量的测试试剂从包装盒中取出并平衡至室温，打开铝箔包装袋，平置于台面上。（3）用微量加样器取 60ul 血清或血浆样本，加到试剂卡的加样处。（4）加样后阳性标本可在 130 分钟内检出。经过试验确证，反应时间超过 30 分钟将对实验结果的观察造成影响，因此，建议 30 分钟内最终观察并记录实验结果。【全血】（1）将待测标本从储存条件下取出，平衡至室温并编号。（2）将所需数量的测试试剂从包装盒中取出并平
5、衡至室温，打开铝箔包装袋，平置于台面上。（3）用微量加样器取 60ul 全血样本，加到试剂卡的加样处，随即加一滴金标全血样本稀释液。（4）加样后阳性标本可在 130 分钟内检出。经过试验确证，反应时间超过 30 分钟将对实验结果的观察造成影响，因此，建议 30 分钟内最终观察并记录实验结果。【结果判定】阳性：测试条/卡在检测区（T）和对照区(C)位置各出现一条紫红色条带。如果检测区(T)的紫红色条带隐约可见，建议对该样本重复试验，并使用其他方法确认。阴性：测试条/卡只在对照区(C)位置出现一条紫红色条带。失效：对照区(C)未出现紫红色条带，表明不正确的操作过程或试剂盒已变质损坏或者是样本中抗体
6、的含量过高。在此情况下，应再次仔细阅读说明书，并将待测样本稀释后用新的测试条/卡重新测试。如果问题仍然存在，应立即停止使用此批号产品，并与试剂供应商联系。【注意事项】 检测线颜色深浅的程度与样品中抗体的滴度没有一定的必然联系。测试区（T）内的紫红色条带可呈现颜色深浅的现象，但是，在规定的观察时间内，无论该色带颜色深浅，即使只有非常弱的色带，也应判定为阳性结果。 本品检测陽性者，需进一步确证。 实验环境应保持一定的湿度，避风。避免在高温下进行实验。测试条从包装中取出后，应尽快进行实验，避免放置于空气中过长时间，导致受潮。文件编号：南宁市红十字会医院检验科HIV 筛查实验室 第 3 页 共 3 页2011 年 10 月版第 0 次修订HIV 测定（万泰、胶体金法）标准操作规程实施日期：2011 年 10 月 18 日8、质量控制：阴性对照显示为阴性；阳性对照显示为阳性。9、临床意义： 监测血清或血浆中的 HIV-1 和 HIV-2 抗体，用于帮助检测受感染个体的 HIV-1 和 HIV-2 抗体。本品检测阳性者，需进一步确证。10、其它注意事项 必须按规定使用经中国药品生物制品检定所检定并贴有“检定合格“防伪标签的试剂。 试剂各组分在正当处理和保存的情况下直至效期都保持稳定，不能使用过效期的试剂盒。11 参考文献人类免疫缺陷病毒抗体诊断试剂盒（胶体金法）说明书
