1、 1 血库 标准操作规程（ SOP） 2013-01 修订 目 录 2 第一章 血库仪器标准操作规程 第一节 Dianafuge 标准操作规程 3 第二节 80-2 离心机标准操作规程 3 第三节 CU600 型电热恒温水箱标准操作程序 4 第四节 SANYO MBR-107D（ H）贮血冰箱标准操作程序 4 第五节 Haier 低温冰箱标准操作程序 4 第六节 海尔冰箱标准操作程序 5 第七节 医院血库管理软件应用标准操作规程 5 第八节 SJW 系列数码恒温血小板振荡保存箱标准操作规程 6 第九节 WGH-I 型数码恒温解冻箱 标准操 6 第二章 血库 项目标准操作规程 第一节 血样采集和
2、送检、血型复查及血源组织标准操作程序 7 第二节 ABO Rh（ D）血型复检标准操作规程 8 第三节 Rh 血型鉴定标准操作程序 9 第四节 红细胞血型抗体筛查标准操作规程 11 第五节 抗人球蛋白试验 14 第 六 节 血液交叉配血试验标准操作规程 15 第 七 节 血液出库（发血）标准操作规程 17 第 八 节 数据记录及费用收取 标准操作规程 17 第 九 节 血液申领、入库、核对、贮存标准操作规程 19 第十 节 血液报废（失效）标准操作规程 19 第十 一 节 输血反应处理标准操作规程 20 第十 二 节 实验室消毒和污物处理标准操作规程 21 第十 三 节 血库交接班标准操作规程
3、 21 第十 四 节 血液质量管理标准操作规程 22 第十 五 节 血库夜班操作规范 23 第十 六 节 应急 预案操作规程 24 第十 七 节 贮存式自身输血（ PABD）标准操作规程 26 第 十八 节 临床医师用血申请操作规程 28 第 十九 节 临床护士输血操作规程 28 血 库 标 准 操 作 规 程 3 第一章 血库仪器标准操作规程 第一节 Dianafuge 标准操作规程 一、 Dianafuge 标准操作规程 （一） Dianafuge 开 /关机程序 1开机 把仪器电源开关拨到“ ”（开）的位置，开始正确运行。 2关机 把仪器电源开关拨到“ 0”（关）的位置。 （二） Dia
4、nafuge 标准操作程序 1 Dianafuge 离心机应放置于水平台桌上，电源（压）须匹配。 2离心机在离心前，先按 OPEN，此时门盖打开，放入 检测 卡（需对称放置），放入完毕后，用手把门盖按下，然后按 START，离心机开始转动， 10 分钟后自动报警开门盖，取出卡片，最后把门盖按下关好。 二、 Diana-Incubator 标准操作规程 （一） Diana-Incubator 开 /关机程序 1开机 按顺序依次打开电源开关。 把仪器电源开关拨到“ ”（开）的位置，开始正确运行。 2关机 把仪器电源开关拨到“ 0”（关）的位置。 （二） Diana-Incubator 标准操作程序
5、 1 Diana-Incubator 孵育器应放置于水平台桌上，电源（压）须匹配。 2孵育器的使用，用手开启门盖，放入检测 卡，按所需要的保温（其温度自动调节保持为 37 ）时 间，顺时针旋转 选择所需时间， 到时后会报警提示，开门盖取出卡片后关盖。 第二节 CH80-2 离心机标准操作规程 一、 CH80-2 离心机开 /关机程序 1开机 插上电源 把电源开关拨到 ON 位置，开始正确运行。 2关机 按依次顺序把仪器电源开关拨到 OFF 的位置。 二、 CH80-2 离心机标准操作程序 1电源开关拨到 ON 位置 2离心试管需等重量对称放置。 3按 时间开关调至所需离心时间。 4再把转速开关
6、调至所需离心转速。 5. 按启动， 开始正确运行。 5停止运转后取出标本。 第三节 CU600 型电热恒温水箱 标准操作规程 4 CU600 型电热恒温水 箱 标准操作程序 1 在水 箱 内加入清洁温水至总高度 1/22/3 处。 2接通电源，选择工作温度。 说明 操作 显示 备注 设定工作温度 按“ SET”键 37.0 预先设定温度值显示闪烁 增加设定温度值 按“ +” 键 52.5 数值增加，显示闪烁 减少设定温度值 按“ -”键 30.0 数值减少，显示闪烁 确定工作温度 按“ SET”键 25.0 新设定温度储存后，显示箱内温度 3水槽进入升温状态，加热指示灯亮。当箱内温度接近设定温
7、度时，加热指示灯闪烁，到达设定温度后，控制进入恒温状态。 4水浴箱工作温 度波动范围应控制在 1 左右，定期用校正过的温度计进行校正。 5水浴箱内外应保持清洁，每周定期清洗更换清水，经常保持水箱内水质干净。 第四节 SANYO MBR-107D（ H）贮血冰箱标准操作规程 SANYO MBR-107D（ H）贮血冰箱标准操作程序 1接通电源，把电源开关拨到 ON 位置，开始正确运行。 2 温度控制在 2 6 范围内，实际运行温度在 4 左右，工作温度波动范围应控制在 1 以内，定期（时）用校正过的温度计进行校正。 3温度每天记录 四 次（晨 8 时、 上午 11 时， 下午 4 时、晚 8 时
8、）的温度，如温度超出正常范围，警报器会自动报警，须及时进行处理。 4每月对贮血冰箱内的温度芯片进行检查并作记录于电脑中，以免查询。 5贮血冰箱内外应保持清洁，严禁存放他物；每周清洗消毒一次，用 2%戊二醛溶液或施康 （ 1： 100）消毒；每月冰箱内空气培养一次。无霉菌生长或培养皿（ 90mm）细菌生长菌落 8CFU/10 分钟或 200 CFU/M3 为合格，结果须登记在记录本上。 第五节 Haier 低温冰箱标准操作规程 Haier 低温冰箱标准操作程序 1接通电源，把电源开关拨到 ON 位置，开始正确运行 。 2温度控制在 -30左右 范围内，实际运行温度波动范围应控制在 -32 3 左
9、右，定期（时）用校正过的温度计进行校正。 3温度每天 记录四次（晨 8 时、上午 11 时，下午 4 时、晚 8 时） 的温度，如温度超出正常范围，警报器会自动报警，须及时进行处理。 4每月对低温冰箱内的温度芯片进行检查并作记录于电脑中，以免查询。 5定期进行化霜清洗消毒。 第六节 海尔 冰箱标准操作规程 5 海尔 冰箱标准操作程序 1接通电源，把电源开关拨到 ON 位置，开始正确运行。 2温度控制在 28左右 范围内，实际运行温度波动范围应控制在 5 2 左右，定期（时）用校正过的温度计进行校正。 3温度每天记录 两 次（ 上午 8 时， 下午 4 时）的温度，如温度超出正常范围，须及时进行
10、处理。 第七节 医院血库管理软件应用标准操作规程 医院血库管理软件应用标准操作程序 一、开机 1接通电源，开主机按下 电源开关，同时按 Ctrl+Alt+Delete按回车。 2双击医院用血管理信息系统，输入本人的工号 按回车键 再回车 医院血库管理软件系统。 二、血液入库 点击入库 点击新增，输入血卡号、血袋号 、血型、血液类别、血量、采血日期，保存即可。 三 、 患者档案建立 在配发血前自先将患者档案输入电脑内。 点击【患者档案】 出现患者登记菜单 点击新增 进入第二联患者登记菜单，然后输入患者档案，保 存。再输入其他患者档案至输完为止。如门诊病人，可以输入就诊卡号。 四、交叉配血 带有红
11、细胞的血液均需做血液交叉配血试验 直接点击配血 出现配血操作菜单 选择入院类型 输入患者住院号、用激光扫描仪，扫描血袋号条形码，出现配血菜单，输入配血方法等（已有默认结果） 按确定，然后再扫描第二或第三个助血员的血袋号条形码， 按确定 保存 取消（不打配 血收费单时） 退出。 五、出库（发血） 直接点击出库，出现发血操作菜单 选择入院类型 输入住院号、用激光扫描仪，扫描血袋号条形码，再扫描第二或第三个血袋号条形码， 点击配血单 打印血液交叉配合试验报告单 点击反馈卡 打印患者输血不良反应反馈单 再保存 取消（不打收费单时） 退出。 血浆、血小板不需要配血的血液发血，直接点击出库，并按以上进行操
12、作。 第八节 SJW 系列数码 恒温 血小板 振荡 保存 箱标准操作规程 SJW 系列数码 恒温 血小板 振荡 保存 箱标准操作规程 1开机 打开电源开关。 把仪 器电源开关拨到“ ”（开）的位置，开始正确运行。 打开门，把 振荡箱电源开关拨到“ ”（开）的位置，振荡箱开始振荡运行，并显示 箱内温度 22 2。 6 拉开抽屉，把血小板袋平整放入，注意不要外露，以免箱体在运行时夹破血小板袋。然后，关上抽屉和门让其运行。 2关机 按依次顺序把振荡箱电源开关拨到“ O”（关）的位置，振荡箱停止运行， 然后 关门，再 把仪器电源开关拨到“ 0”（关）的位置。 3. 消毒 按下消毒键，打开电源开关，系统
13、进入消毒状态（设为 20 分钟），消毒完毕后，先关消毒键，再关闭电源开关 。 第九节 WGH-I 型数码恒温解冻箱 标准操作规程 WGH-I 型数码恒温解冻箱 标准操作规程 1开机 水箱内注入清水； 按顺序依次打开电源开关。 2融化周期 装载：将冷冻血浆袋套进外包装袋，挂到篮架上； 编程：设定融化周期时间，按下启动钮； 振荡：挂篮降入水箱中，开始振荡周期； 上升： 融化周期结束后， 挂篮自动升出水面。 3清洁 每周定期清洗更换清水，经常保持水箱内水质干净。 7 第二章 血库 项目标准操作规程 第一节 血样采集和送检、标本核收、血型复查及血源组织标准操作程 序 一、血样采集和送检与输血申请单核收
14、 标准操作程序 采集血样 1采血护士 :采集配血血样，护士要求必须有初级以上护士职称，实习 /进修护士不得单独进行。 2.明确病人用血申请，核对病人信息：姓名、性别、年龄、住院号、科别、床号等信息。 3.准备采血材料，并明确以下内容。 正确的标本：取材正确； 正确的标本量：血型复查（血交叉）标本抽取 3ml； 正确的标识：条形码号标签或手工书写标签，但必须明确标明姓名、科室床号、住院号。 4采集血样过程： 确保在采集血样时，床边正确的核对患者； 正确地给血样试管贴标签：血样采集后，在床边给血样贴标签，而不应该事先贴好标签或到护士站后贴标签； 第一次输血，应同时采集输血前五项检测血样，并记录抽取
15、时间入病历。 5.采血样完成后，再次核对血样标识与申请单信息，无误后送输血科，并进行护理记录。 6.质量标准要求： 正确完整的血样标识，与申请单一致； 正确地核对与采血过程； 标本无溶血、不能在输液处采集血样； 正确地记录。 送收血样 1送血 样人员必须是医护人员，严禁患者家属送血样。 2血样送到输血科后应由送血人员和输血科人员一起核对以下信息： 血样信息与申请单信息是否一致； 核对查看申请单的完整性（必须有血常规 +血型结果）、血样标识的完整性（必须内容齐全、文字清楚）； 血样标本量、有无溶血； 双方核对，无误后签字交接。 3.有以下情况，输血科拒绝收血样： 血样标识不完整； 血样无标识；
16、标本量不足、血样质量有问题； 无输血申请单或申请单上无血常规 +血型的结果。 4.质量标准要求 血样信息完整无误； 血样质量符合要求及采集量正确。 血型复查核收 1 核对：按要求核对输血申请单与血标本上的全部内容，并在标本接收簿中作记录； 2 核收：在检验之星中，进行血型复查医嘱的核收； 3血型复检及不完全抗体测定（具体操作详见有关章节）； 8 4核对输血申请单、血标本、病历中的姓名、住院号、血型（如与原始血型不相符时，必须重新抽取病人标本检测），正确无误后，报告其血型复查和抗筛结果，作记录； 5 输血申请单按血型类别在文件夹中放置；血型复查后的标本，按先后次序放在试管架 中。 二、血源组织
17、1对临床医师申请用血种类、用血量进行了解核实，提前备好相应血源； 3 血库存量组织，要求每日存量必须保持在周用血量的 1/2； 当发生重大事件急需大量血液时，按照急诊用血应急预案执行 3特殊血液组织 紧急用血时，血库人员在接到 特殊用血申请单时，应在第一时间先向市中心血站报告用血种类、用血量和用血时间等； 非紧急用 时，按规定须提前 1 天预约，由血库值班人向血站报告； Rh(D)阴性和其他稀有血型患者的输血 择期手术病人输血：当临床遇到稀有血型患者后，应对患者家庭成员、兄弟姐妹进行筛选，符 合者到血站体检献血，并填写稀有血型用血申请单。组织到血源后，临床再择期手术用血； 急诊抢救病人紧急输血
18、：按卫生部临床输血技术规范第十五条 Rh（ D）检查可除外。也可采用自身输血、同型输血或配合型输血。对紧急输用配合型血液时，由经管医师向患者或其家属（代理人）讲明，征得同意后方可输用，由医患双方共同签字并载入病历； 具体实施可按照 稀有血型及应急用血管理条款执行 特殊血液预约的信息反馈与记录。 注： 特殊血液是指：单采血小板、洗涤红细胞、冷沉淀、辐照血、 Rh(D)阴性和其他稀有血型血液等 第二节 ABO Rh（ D） 血型复检标准操作规程 ABO Rh（ D） 血型复检标准操作程序 抗 A、抗 B、抗 D 血清定型（试管或玻片法）标准操作程序 【方法原理】 1 ABO 血型：根据红细胞上有或
19、无 A 抗原或 /和 B 抗原，进行红细胞凝集试验。正定型，是用已知抗 A 和抗 B 分型血清来测定红细胞上有无相应的 A 抗原或 /和 B 抗原；所谓反定型，是用已知 A 细胞和 B 细胞来测定血清中有无相应的抗 A 或 /和抗 B。 2 Rh（ D）血型：用抗 D 血清进行鉴定，则凡带有 D 抗原者称为 Rh（ D）阳性，不带D 抗原者称为 Rh（ D）阴性。 【标本采集和处理】 1标本采集：常规静脉采血 3ml 于 EDTA.K2。 2标本保存：室温放置不超过 8 小时， 4 保存不超过 72 小时，无溶血现象。 【试剂】 1 抗 A 抗 B 血型定型试剂（单克隆抗体 长春博德） 2 A
20、nti-D (IgM) Biotest。 3 5%及 0 型试剂红细胞盐水悬液，制备方法见附注。 【操作步骤】 9 1取小试管 3 支（或玻片一张划成三等分），分别标明抗 A、抗 B、抗 D，用滴管分别加抗 A、抗 B、抗 D 分型血清各 1 滴，再以滴管分别加受检者 5%红细胞（取 1 滴压积红细胞加 16 滴生理盐水）悬液 1 滴，混和。 2另取小试管 3 支（或玻片 一张划成三等分），分别标明 A、 B、 O 细胞，用滴管分别加入受检者血清 1 滴，再分别滴加 A、 B、 O 型 5%试剂红细胞悬液 1 滴，混和。 3立即以 1000r/min 离心 1min（或将玻片不断轻轻转动，使血
21、清与细胞充分混匀，连续约 15min）。 4 将试管轻轻摇动，先以肉眼观察有无凝集（或溶血）现象。如肉眼不见凝集，应将反应物倒于玻片上，再以低培镜检查。 5观察结果时既要看有无凝集，更要注意凝集强度，此有助于 A、 B 亚型、类 B 或 cisAB的发现。 6凝集强度判断标准： 4+=红细胞凝集成一大块，血清清晰透明。 3+=红细胞凝集成数小块，血清尚清晰。 2+=红细胞凝块分散成许多小块，见到游离红细胞。 1+=肉眼可见大颗粒，周围有较多游离红细胞。 =镜下可见数个红细胞凝集在一起，周围有很多游离红细胞。 MF=混合凝集外观（ mixed field）是指镜下可见少数红细胞凝集，而极大多数红
22、细胞仍呈分散分布。 表示阴性，镜下未见凝集，红细胞均匀分布。见表 2 1 表 2 1 ABO 血型正反定型结果 分型血清 +受检者红细胞 抗 A 抗 B 抗 A+B 受检者血型 受检者血清 +试剂红细胞 A 细胞 B 细 胞 O 细胞 A B O AB 注： =凝集； =不凝集。 7 “AB”注意冷凝集或自身凝集，可 以在 37 水浴中鉴别。 8血型复查结果输入检验之星中，核对后审定报告。 第三节 RhD 血型鉴定标准操作程序 RhD 血型鉴定标准操作程序 RhD 血型系统通过输血或妊娠可产生免疫性抗体，当遇到相应抗原，可致溶血反应或新生儿溶血病。若误诊误治，可导致患者残废或死亡。临床输血时，
23、一般需作助血型鉴定。 一、 RhD 血型鉴定标准操作程序 【原理】 应用血凝试验检测红细胞抗原。 RhD 血型是由红细胞表面是存在或缺失 D 抗原确定。 D抗原于细胞株 BS226 细胞产生的单克隆抗体发生特异性反应。 10 【试剂】 RhD（ IgM）血型定型试剂盒（单克隆抗体） 【操作】 1盐水法 取小试管 (10mm 60mm)1 支，蜡笔标记，加 试剂 1 滴，再加人 5%受检者红细胞 1 滴，混匀， 1000r/min 离心 1min 观察结果。 2对照管 用蜡笔标记阳性和阴性，分别加人抗 D 血清（ IgM） 1 滴，阳性对照管加 Rh阳性红细胞 1 滴，阴性对照管加 Rh 阴性红
24、细胞 1 滴， 混匀， 1000r/min 离心 1min 观察结果。 3结果判定 如阳性对照管凝集，阴性对照管不凝集，受检管凝集，即表示受检者红细胞上有相应抗原；受检管 不凝集，即表示受检红细胞上没有相应抗原。 【附注】 1单克隆 IgM Rh 抗血清有商品试剂供应，可用盐水介质做凝集试验。抗血清（ IgM） 1滴，加 5%受检者红细胞悬液 1 滴，混合，置 7水浴 1h，观察凝集反应。 2如临床上只要求检查是否为 Rh(D)阳性还是阴性，只需用抗 D 血清进行鉴别。如结果为阴性，则应进一步检查排除弱 D。 3.在我国汉族人群中， Rh 阳性占 99.66%， Rh 阴性占 0.34%。 4
25、.阳性对照可取 3 人 0 型红细胞混合配成。阴性对照不易得到，一般设计方法为正常AB 型血 清 1 滴，加 5% D 阳性红细胞悬液 1 滴和菠萝酶试剂混匀，与受检管一同置 7水浴1h。 5 Rh 血型鉴定应严格控制温度与时间，因 Rh 抗原、抗体凝集反应时，凝块比较脆弱，观察反应结果时，应轻轻侧动试管，不可用力振摇。 【假阳性反应原因分析】 1试剂中存在具有其他特异性的抗体 (指不完全 D 抗体 )，因此，对疑难抗原定型时，建议用不同来源的抗血清同时做两份试验，因为使用两份特异性相同的抗血清得到不一致的结果时，就会使检查人员意识到有进一步试验的必要。 2多凝集红细胞与任何人血清 都会发生凝
26、集。 3当用未经洗涤的细胞做试验时，试样中的自身凝集和异常蛋白质可能引起假阳性结果。 4试剂瓶可能被细菌、外来物质或其他抗血清所污染。 【假阴性反应原因分析】 1搞错抗血清，每次试验时应细心核对抗血清瓶子上的标签。 2试管中漏加抗血清，在加人细胞悬液之前，必须检查试管中有无抗血清。 3未遵照抗血清使用说明书做试验，如抗血清和细胞间的比例以及温育的温度和时间不正确。 4抗血清保存不妥，试剂中的免疫球蛋白变质。 二、弱 D（ weaK D） 型鉴定标准操作程序 【原理】 根据美 AABB 技术手册第 12 版 (1996)规定： D“这术语不再使用，携带弱的 D 抗原的红细胞仍被归类为 D 阳性，称之“弱 D（ weaK D） ”。原称之“ D”红细胞一部分具有与正常 D 阳性红细胞同样性质的 D 抗原，只是 D 抗原数量减少；另一部分原“ D”红细胞 D 抗原与正常 D 抗原相比缺少正常 D 抗原中 1 个或多个抗原表位。 弱 D 型红细胞与某批或几批抗 D 血清在盐水介质及酶试验中不发生凝集，但在间接抗人
