1、常规活疫苗介绍,陈峰,乾元浩活疫苗系列,新城疫：zm10、c30、Lasota、系、CS2传支：W93、H120、H52、法氏囊：NF8、B87马立克：CVI988、FC-126鸡痘：鸡痘鹌鹑化弱毒苗,疫苗：对不起，俺让你费心了,耐热专利技术生产(专利号ZL97116489.4)确保效价稳定不衰减,全程冷链、温度监控,完善的安检、效检体系,国内首家GMP车间唯一自建SPF鸡场检验用蛋用与生产三重质检体系控制,内控标准高于国标批次间稳定均一,本土化、针对性强Cvi988、NF8院士产品ZM10、W93本土研制,活疫苗,一张图了解俺,种毒,纯净,高效,耐热,安全,冷链,乾元浩活疫苗特点,种毒：本土
2、化，更有针对性，保护性好纯净：GMP、SPF、三重质检高效：内控标准高耐热：专利安全：冷链：,大中专院校和科研院所以及中检所支持CVI988：刘秀梵院士NF8:刘秀梵院士W93：北方，一价双效ZM10：双嗜毒株,纯净（2003）兽药GMP证字01号,纯净（SPF）,SPF鸡场,世界银行资助3000万元；硬件：全套设备自荷兰引进；软件：饲养管理、检测技术及试剂全部来自美国；产能：SPF种蛋120万枚/年；具有12年的成功饲养经验；采用美国标准监控种鸡30种病原。（部标19种）,必检项目,同称SPF 标准有所不同,中国SPF鸡检测19种疫病我们检测SPF鸡23种疫病PD50：免疫半数保护率。好的疫
3、苗应该没有NS（非结构蛋白），自然感染和不纯疫苗免疫后，动物都有NS抗体。,SPF疫苗主要特点:,无外源病毒、支原体等污染；杜绝了垂直传染病的苗源性传播；病毒培养中无干扰,抗原含量高；比普通（非SPF)疫苗成本高；比普通疫苗免疫效果好，防疫风险小。,禽活疫苗SPF化的意义及影响,SPF疫苗与普通疫苗的区别;其生产工艺过程基本一致，主要区别在于疫苗的内在质量,SPF现状（16家）,乾元浩SPF化进程：,2008年7月1日:停止普通疫苗生产； 2009年1月1日:停止普通疫苗销售； A乾元浩南京生物药厂的SPF鸡场，不含30种特定的传染病病原体； B乾元浩北京厂采用法国梅里亚公司SPF种蛋。,纯净
4、（三重质检）,纯净（出厂检验）,物理性状检验 无菌检验支原体检验 鉴别检验外源病毒检验 安全检验效力检验 剩余水分检验真空度检验 灭活苗还要做外观、剂型、稳定性、粘度检验和甲醛含量测定等。,乾元浩采用中监所耐热保护剂专利技术(专利号ZL97116489.4)，疫苗稳定性到达国际先进水平，28条件下，效期2年以上。热稳定性好。,稳定性试验：在稳定性试验要求基础上至少要减掉6个月，才能作为疫苗的有效期。比如说明书有效期为两年，实际经热稳定试验验证的时间一定要超过两年半。挑战试验：一种极端条件下的人稳定性试验，将不同的疫苗，在37度高温条件下放置1-4周。如果储存1-4周，疫苗质量符合标准，才可以出
5、厂。,每冻融一次，抗原损失近50%,采用了耐热保护剂技术常规疫苗冻干保护剂主要是牛奶、蔗糖，疫苗不具备耐热性,产品在冻干、包装、运输、储存、使用时需-15以下低温环境，目前我国现状很难连续达到这种条件，容易造成疫苗效价降低，免疫失败；耐热保护剂活疫苗生产技术是中监所专家专利发明(专利号ZL97116489.4);耐热保护剂组成：由有机高分子、有机低分子和抗氧化剂组成。,耐热保护剂基本原理,低分子物质，使悬浮于耐热保护剂中的病毒或细菌在冷冻干燥过程中尽量保持存活状态，使干燥样品中的最终水分含量不致过低，防止蛋白质变性，减少病毒或细菌失活。高分子物质，高分子物质不仅能增强对病毒或细菌的保护作用，而
6、且可促进冷冻干燥过程中的升华，形成由高分子物质组成的耐热性构架，阻断构架外热源对构架内病毒或细菌的热传导性和热辐射性杀伤。抗氧化剂，许多病毒或细菌，在干燥状态下与空气（氧气）接触，会促进其新陈代谢，加快死亡。耐热保护剂中的抗氧化剂可阻止病毒或细菌在干燥状态下代谢进程，从而推迟病毒或细菌的失活。,耐热保护剂作用: 具有耐热作用； 具有保护疫苗活力作用； 具有稳定抗原性的作用； 使病毒遇热不焦糖化作用； 具有耐干燥和耐冷冻的功能； 具有抗氧化作用。,耐热,耐热保护剂活疫苗试验数据: -15以下保存，有效期达到47个月;8以下保存有效期达到2436个月;37 放置10天效价不降低;疫苗甚至可以在沸水
7、中耐受10分钟！疫苗稀释后4个小时内用完不影响效果!生产、运输、储存和使用中效价稳定！,NDLasota株耐热活疫苗耐热试验,专利高效免疫增强剂，对机体T淋巴细胞增殖活性、诱导巨噬细胞分泌NO含量，以及刺激外周血淋巴细胞表达Th1型细胞因子mRNA含量明显提高,淋巴细胞增殖指数,淋巴细胞NO含量,细胞因子mRNA含量,不同稀释液个5ML稀释后37度水浴2小时进行效力实验结果,产品安全是前提ND、IB、IBD、ILT、FP、HVT等禽用活疫苗使用10个羽份进行SPF鸡或SPF鸡胚接种。灭活疫苗一般使用2个剂量进行安检。如La Sota等使用27日龄SPF鸡，接种10个剂量，观察14天，应无不良反
8、应；,有效,安全的产品要有效如La Sota等A：用培养10天的SPF鸡胚，用1羽份疫苗进行10倍系列稀释，取3个适宜稀释度分别接种尿囊腔，测定48120小时内死亡胚的尿囊液，其红细胞凝集价不低于1：160判为感染，计算EID50，每羽份病毒含量应不低于106.0EID50。B：用1/100剂量，滴鼻接种3060日龄SPF鸡，14天后攻击强毒株105.0ELD50/只，免疫鸡至少保护90%（9/10），为合格。,精品展示,36,常规活疫苗产品介绍,1）、ZM10不损伤呼吸道粘膜,不同疫苗免疫1日龄商品肉鸡后呼吸道反应的比较,对1日龄雏鸡喷雾免疫（雾粒大小100微米左右）ZM10株疫苗，无明显的
9、呼吸道反应，肠道和气管上皮细胞完好无损，而同样进行喷雾免疫La Sota疫苗，30%以上的雏鸡在6-10日龄出现明显呼吸道反应，并表现为打瞌睡,常规活疫苗产品介绍,2）、ZM10干扰野毒能力极强,注：所有强毒为ND北京株,ZM10免疫原性与C30相同，克制一切野毒攻击，并能快速产生高水平的呼吸道和消化道粘膜免疫，免疫保护更全面,ZM10对SPF鸡的攻毒保护试验,38,常规活疫苗产品介绍,ZM10毒株的ICPI在0.27-0.33之间（La Sota 株为0.41-0.44），三天即能产生高水平的抗体，安全性更好,ZM10和La Sota对1日龄雏鸡ICPI的测定对比,3）、ZM10对雏鸡更安全
10、,ZM10的应用,与呼吸型的新城疫活疫苗交叉混合使用，对鸡群的保护力大大增强！当鸡群呼吸系统处于亚健康时，不会诱发呼吸道副反应！（肉鸡21日龄）在发生新城疫时紧急接种，刺激小且起到双重保护的效果。,精品展示,中监所专家王志伦研究员，从天津地区分离到肾型传支，经筛选，致弱，并在SPF鸡胚上连续传93代致弱，命名W93株。国内分离与流行株亲缘关系更近。致弱前为肾型毒株对造成肾脏病变严重的传支更有针对性。抗原含量104.7EID50，是普通H120的20倍。,W93株还能替代H120株有效预防呼吸型传支，但H120不能替代W93预防肾病变的作用,根据中国农业大学等测试结果表明： W93与进口疫苗毒株
11、S1基因的同源性很高，说明其抗原性良好，抗原谱广泛，是当前国内防制IB的最佳武器； W93株疫苗与几株进口疫苗S1基因的同源性比较,应用,早期使用，防止早期感染。发病早期可进行紧急接种点眼滴鼻或气雾，使之产生局部保护性粘膜抗体W93活疫苗免疫接种之后，成年鸡开产前要用灭活苗加强免疫，使机体产生更高的循环抗体保护泌尿生殖系统,精品展示,免疫效力高，可抵御法氏囊强毒株、变异毒株本土毒株，具有更强的针对性相容性好，对其他疫苗免疫效力不产生干扰，不产生免疫抑制。,NF8株中等毒力国内分离毒株种毒代次低免疫2次，后期保护力强,浩倍特中强毒力B87+CA+CF白羽肉鸡-只使用一次黄鸡严重流行区可用,三、产
12、品介绍,（一）鸡新城疫低毒力活疫苗（Clone 30株）1.含有克隆30病毒106.5EID50/羽份。2.源于La Sota株，毒力更低，无不良反应，可用于1日龄、补强和紧急接种等。3.良好的免疫原性，不受母源抗体干扰，能诱导比La Sota毒株更高的抗体滴度。4.可气雾、点眼滴鼻、饮水多途径接种。,（二）鸡传染性支气管炎(W93株) 活疫苗 中监所专家10几年研制成功的肾型传支疫苗。2001年6月获得农业部新兽药证书和生产批准文号，多年来的使用证明：该毒株毒力稳定、免疫力好、对预防肾型传支具有针对性，免疫效果优于同类进口产品。而且一价双效，对呼吸型传支也具有预防作用。,1.国内唯一获新兽药
13、证书的肾型传支疫苗；2.对肾型传支针对性强，且一价双效；3.安全,1日龄以上健康鸡首次和加强接种；4.抗原含量达到104.7EID50；5.与ND低毒力肠型毒株及呼吸型传支H120H52毒株科学配比制成多种新支二联三价疫苗,抗原谱广、免疫效果好、使用方便。,（三）浩和利 鸡新城疫、传染性支气管炎二联三价活疫苗1.在新城疫肠型毒株基础上，与呼吸型H120和肾型传支W93毒株科学配比而成。2.可用于1日龄以上任何日龄鸡群。3.预防新城疫和传支效果显著。4.采用耐热保护剂技术制备。5.采用SPF鸡胚生产。,6.可解决的主要问题：-无伤害接种，首次或前期和紧急接种用；-减少应激，产蛋高峰期接种；-使用
14、方便，可多种接种途径；-避免呼吸道副反应。,（四）新支利鸡新城疫、传染性支气管炎二联三价活疫苗1.La Sota新城疫毒株，与呼吸型H52和肾型传支W93毒株科学配比而成。2.适于30日龄以上鸡群的加强接种。3.采用了耐热保护剂技术制备。4.滴鼻、点眼、气雾、饮水多途径使用。,（五）鸡新城疫耐热保护剂活疫苗(La Sota株)1.含NDV-La Sota株至少106.5EID50/羽份；2.用于7日龄以上鸡；3.有支原体感染的鸡群，禁止用气雾免疫；4.疫苗稀释后应放冷暗处，在4小时内用完；5.应对用过的疫苗瓶、器具和稀释后剩余的疫苗等进行消毒处理；6.28保存，有效期为2年。,（六）鸡新城疫活
15、疫苗(CS2株)含NDV-CS2株至少105.5ELD50/羽份；中等毒力株（I系）克隆制成；专供经ND低毒力活疫苗接种过的1月龄以上鸡使用,不得用于初生雏鸡和产蛋鸡；多日龄结构鸡场使用时应注意鸡群隔离。,（七）浩倍特（鸡传染性法氏囊病中等毒力三价活疫苗）1.属中等毒力型疫苗；2.三个亚型毒株经科学配比和调整，比单价苗具有更广泛的抗原谱，适合于变异株和强毒株流行地区；3.抗原含量B87株至少103.5ELD50,CA株至少103.0 ELD50,CF株至少102.ELD50;,4.可突破中高水平的母源抗体，也适合于母源抗体水平不一致的鸡群；5.良好的免疫原性和安全性，对法氏囊无损伤，可用于紧急
16、接种。,（八）鸡痘耐热保护剂活疫苗（细胞苗）,1.耐热产品，28储存有效期2年。2.含鸡痘鹌鹑化弱毒株至少103.0EID50/羽份。3.翅膀内侧无血管处皮下刺种，用鸡痘刺种针蘸取稀释的疫苗给2030日龄雏鸡刺种1针，30日龄以上鸡刺2针，接种后34日，刺种部位应出现轻微红肿、结痂，1421日痂块脱落。接种60天后再补强接种1次。,4.注意事项1)疫苗稀释后应在4小时内用完。2)仅用于接种健康鸡群。3)鸡群刺种后1周应逐只检查，刺种部位无反应者，应重新补刺。,4)刺种部位不出现反应可能原因： 接种方法不恰当； 免疫良好的母鸡产下的卵所孵化的雏鸡往往反应较轻，不易察觉，但能产生可靠的免疫力； 病
17、鸡或弱鸡接种后不能建立适当的免疫力； 补强接种与上次接种间隔时间短。,储存、运输,点眼、饮水,刺种、注射,使用过的空疫苗瓶、废弃的活疫苗必须经过高温或火烧处理，将细菌或病毒杀死后集中处理，防止散毒，使用过的注射器、点眼瓶、刺种针要高温消毒处理。饮水使用的水线免疫前后都要清理干净。免疫后排毒期间加强饲养管理，加强带鸡消毒。尤其喷雾免疫、饮水免疫后。灭活疫苗瓶可以火烧或深埋处理。,工艺,预冻、升华干燥、解吸干燥。升华干燥除去冰晶再解吸干燥。冷冻中易变性：低温应力、冻结应力、干燥应力保护剂特点：玻璃化转变温度高；吸水性差；结晶率低；不含还原基。胶塞半闭冻干中水分升华。真空用电火花真空检测仪。,常用保护剂,1、糖类：蔗糖、甘露糖、葡糖糖、乳糖2、聚合糖：葡聚糖、白蛋白、PVP、HES3、无水溶剂：甘油、乙烯乙二醇4、表面活性剂：TWEEN805、氨基酸：丙氨酸、甘氨酸、丝氨酸6、盐和胺：磷酸盐、醋酸盐,冻干需考虑的因素,配方：加入填充剂、赋形剂、稳定剂冻结速率：快：冰晶小，不完全，升华慢解吸快 慢：冰晶大，完全，升华快解吸慢冻结方式：零下35-40-50度,
