1、 地址 : 上海市松江区香闵路 698 号 Add: 698 Xiang Min Road SongJiang Shanghai China 电话 /Tel: 86-21-37772436 传真 /Fax: 86-21-37772170 技术支持 /Support: 800-820-1016 邮箱 /Email: 网址 /Web: 生工生物工程（上海）股份有限公司 蛋白表达、纯化服务客户需求登记表 请尽量详细、准确的填写下表，充分的沟通将有助于我们为您提供更好、更快的服务，谢谢！ 双击复选框可进行标记。也可复制这个符号： 表示选中 表示不选。 客 户 基 本 信 息 登 记 联系人： 单位
2、： 联系电话： 邮箱： 传真： 邮编： 所在课题组： 课题组负责人： 联系地址： 1. 您需要选择以下哪种表达体系： 大肠杆菌表达系统 酵母表达系统 昆虫细胞表达系统 哺乳动物细胞 其他表达系统 2. 基因及蛋白信息： 基因名称： GenBank 登录号： 物种来源： 编码区长度： （ ） bp。 目标蛋白的基因序列 请附电子版在附件中说明： 基因来源 客户提供 cDNA （请提供序列及载体信息），生工钓取目的基因。 生工根据基因序列直接进行全基因合成。 生工根据基因序列进行密码子优化后再进行全基因合成。 其他方式： （ ）。 空表达载体 客户提供空表达载体（为保证实验顺利进行，请提供载体序列
3、及图谱以及其他信息）。 客户不提供空载体，生 工根据客户提供的空载体序列和图谱 进行表达载体构建。 构建好的重组表达载体 客户提供，（为保证实验顺利进行，请提供重组载体信息图谱及测序报告等全部信息） 由客户提供空载体序列和图谱等信息， 生工进行重组表达载体的构建。 引物序列 客户提供合成好的引物和引物的碱基组成信息。 客户提供序列，生工合成。 两端插入酶切位点和位置： （ ） 地址 : 上海市松江区香闵路 698 号 Add: 698 Xiang Min Road SongJiang Shanghai China 电话 /Tel: 86-21-37772436 传真 /Fax: 86-21-3
4、7772170 技术支持 /Support: 800-820-1016 邮箱 /Email: 网址 /Web: 哺乳动物载体 报告基因 GFP AP LacZ Luciferase 不带报告基因 抗性基因 neo zeocin hygromycin blasticibin 其他（ ）。 原核宿主菌 BL21(DE3) JM115 Rosetta-GAMI 其他 （ ） 。 酵母宿主菌 SMD1168 GS115 X-33 其他（ ）。 昆虫宿主细胞系 Sf 9 Sf 21 Sf High Five 其他（ ）。 哺乳动物宿主细胞系 293 293T NIH/3T3 COS-7 CHO 其他
5、（ ） 若客户提供构建好的表达载体 宿主菌名称： （ ） 菌液体积： （ ） 包含质粒： （ ） 培养条件： （ ） 保存温度： （ ） 目标蛋白性质 是否膜蛋白 是 否 是否核蛋白 是 否 是否转录因子 是 否 是否毒性蛋白 是 否 是否 有糖基化 是 否 蛋白来源 分泌蛋白 胞内蛋白 温度稳定范围： （ ） PH 稳定范围： （ ） PI 值： （ ） 分子量： （ ） 标签信息： （ ） 是否需要加入 Tag 不需要 需要（请标明需要何种标签 ）标签位置 5端 3端 一步纯化方法 Ni 柱亲和纯化。 GST 柱亲和纯化 Flag 抗体纯化 Flag 标签融合蛋白。 Streptavidi
6、n 纯化生物素融合蛋白。其他（ ） 纯度鉴定方法 SDS-PAGE Western Blot(请提供目标蛋白一抗 ) 其他（ ）。 相关文献信息 是否有人进行过蛋白表达研究。 是（相关研究文献：请提供 NCBI 页面链接或将原文附加在附件中。） 否 其他说明 3. 纯化好的蛋白用 于以下何种实验： （我们将根据您的实验目的推荐合适的蛋白纯化方案） 作为抗原 作为生化实验原材料 地址 : 上海市松江区香闵路 698 号 Add: 698 Xiang Min Road SongJiang Shanghai China 电话 /Tel: 86-21-37772436 传真 /Fax: 86-21-3
7、7772170 技术支持 /Support: 800-820-1016 邮箱 /Email: 网址 /Web: 蛋白晶体结构研究 细胞培养添加物 其他 （ 请填写 ） 4. 您是否尝试过自己表达、 纯化目标蛋白，结果如何？ 从未进行过表达尝试 进行过表达实验： 未检测到表达 ,症结所在（ ） 有表达， 目标蛋白表达量占全菌蛋白的百分比为： %。 目标蛋白存在于 上清中 沉淀中 两者都有（请附蛋白表达的电泳图谱，注明分子量。） 曾用过的表达条件：（ ） 如果形成包涵体，是否曾做过复性 是 复性条件是 结果如何： 否 尝试过何种纯化方法或文献中的方法（请附文献或说明）： 5. 表达条件 6.
8、对最终目的蛋白的要求 目标蛋白能否与纯化标签进行融合表达 目标蛋白不带纯化标签。 目标蛋白可与以下纯化标签进行融合表达 His Tag FLAG Tag MBP GST trxA Nus Biotin GFP 其他 （ ） 最终蛋白是否需要切除亲和标签 需要 （费用和周期相应增加） 不需要 切除亲和标签 所用的蛋白酶 肠激酶 /EK (推荐使用 ) 凝血酶 /Thrombin （推荐使用） 烟草蚀纹病毒蛋白酶 /TEV 如果形成包涵体，是否要求复性 是 否 蛋白纯度要求 纯度大于 80% 纯度大于 90% 纯度大于 95% 蛋白需求量 需要纯化好的目标蛋白（ ） mg 哺乳细胞表达条件 瞬时表
9、达获得 表达报告 未纯化蛋白 纯化蛋白 稳定表达获得 稳定细胞系 纯化蛋白 酵母多拷贝转化子筛选 需要运用 不同抗生素浓度筛选不同耐药浓度的克隆进行表达（费用和周期增加）。 地址 : 上海市松江区香闵路 698 号 Add: 698 Xiang Min Road SongJiang Shanghai China 电话 /Tel: 86-21-37772436 传真 /Fax: 86-21-37772170 技术支持 /Support: 800-820-1016 邮箱 /Email: 网址 /Web: 蛋白活性 需要 不需要 蛋白活性检测 一般由客户自己检测 蛋白再加工 蛋白复性研究 去除内毒素 过滤除菌 冰冻干燥 进一步质量检测要求 N 端测序 发货要求 其他 缓冲液（ ） 冻干（费用和周期相应增加） 默认 20mmol/LTris-HCl pH7.4 缓冲液 如其他特殊要求请注明 7. 其他需要附加说明的文字、图片、文献等 。
