1、高效液相色谱 仪 期间核查方法 一、依据和目的 保证 高效液相色谱仪 的正常运行，在两次检定 /校准之间进行期间核查，验证该设备是否保持检定 /校准时的状态，确保其检验数据的有效性和准确性。 二、使用范围 该运行检查方法适用于使用中的 1200 高效液相色谱仪 的期间核查检查方法。 三、基本原理 高效液相色谱是 色谱法 的一个重要分支，以液体为 流动相 ，采用高压输液系统，将具有不同 极性 的单一溶剂或不同比例的 混合溶剂 、缓冲液等流动相泵入装有固定相的 色谱柱 ，在柱内各成分被分离后，进入检测器进行检测，从而实现对试样 的分析。 四、仪器工作条件及要求 1、环境温度： 15 35 环境湿度
2、： 75RH% 2、室内无强磁场干扰； 3、室内部不存在妨碍仪器正常工作的震动； 4、室内清洁，无腐蚀性气体； 5、稳压器正常，并保持良好接地； 6、供电电源：交流电压 220V10%； 7、排风设备完好，排风量达到实验要求； 8、仪器放置在坚固的实验台上，并避免阳光直射。 五、核查方法 1、通用技术要求 (1) 检查贮液器是否清洁； (2) 检查滤头是否堵塞； (3) 检查仪器电源线、信号线等插接是否紧密； (4) 检查各开关、旋钮、按键等功能是否正常，指示灯是否灵敏； 将仪器各部分连接好，以 100%甲醇为流动相，流量为 1.0mL/min，启动仪器，待压力平稳后保持 10min，用滤纸检
3、查各管路接口应无湿迹 2、 泵流量设定值误差 SS 、流量稳定性误差的检定 SR 分别设定流 量为 0.5 mL/min 、 1.0 mL/min、 2.0 mL/min，启动仪器，压力稳定后，在流动相出口处用事先清洗称重过的容量瓶收集流动相，同时用秒表计时，收集 5 min流出的流动相，在分析天平上称重，按式（ 1 ）、式（ 2 ）计算 SS 和SR 。 %1 0 0/)( ssmS FFFS （ 1） %100/)( minmR FFFS （ 2） 式中： mF tWWFm /12 , 流量实测值， mL/min； 2W 容量瓶 +流动相的质量， g; 1W 容量瓶的质量， g； 试验温度
4、下流动相的密度， g/mL； t 收集流动相的时间， min； mF 同一组测量的算术平均值， mL/min； SF 流量设定值， mL/min； mF 同一组测量中流量最大值， mL/min； inF 同一组测量中流量最小值， mL/min； 流量设定值， mL/min 0.5 1.0 1.5 测量次数 3 3 3 收集流动相时间， min 5 5 5 允许误差 SS 5% 3% 2% SR 3% 2% 2% 3、 基线噪声和基线漂移 选用 C18 色谱柱，以甲醇 ： 0.02mol/L 乙酸铵 =5： 95 为流动相，流速为 1.0 mL/min，紫外检测器的波长选在 230nm，检测灵敏
5、度调到最灵敏档， 开机预热，待仪器稳定后记录基线 10 min，由检测器的衰减倍数和测得的基线峰 -峰高对应标度，计算基线噪声，用检测器自身的物理量（ AU）作单位表示。 KBNd (3) 式中： dN 检测器基线噪声； K 衰减倍数； B 测得的基线峰 -峰高对应的记录仪标度， AU。 基线漂移用 1 小时内基线偏离原点的值（ AU/ h）表示。看基线噪声是否不超过5 10-4AU，基线漂移是否不超过 5 10-3AU/ h 4、 整机性能（定性、定量重复性） 选用 C18色谱柱，根据检测器选择流动相和测量参数： 以甲醇 ： 0.02mol/L 乙酸铵 =5： 95 为流动相 ，流速为 1.
6、0 mL/min，紫外检测器的波长选在 230 nm，基线稳定后由进样器注入 20 L 的 25 g/mL 苯甲酸 标准溶液 ， 连续测量 6 次，记录色谱峰的保留时间和峰面积。按式（ 5）计算相对标准偏差 RSD。 %1001)16/()(6 1 2 xxxR S D i i（定性（定量） （ 4） 式中： RSD（ 定性（定量） 定性（定量）测量重复性相对标准偏差； ix 第 i次测量的保留时间或峰面积； x 6 次测量结果的算术平均值； i 测量序号。 六 、结果 处理 对仪器核查结果，应填写仪器设备期间核查记录。如果该仪器已经偏离校准状态，应查找原因，并采取维修、重新检定或停用、报废等相应措施，维修后的仪器经检定或核查达到技术性能要求后方能投入使用。
