1、 第 1 页 共 31 页 高效液相色谱仪 （岛津 LC 2010AHT） 确认方案 （方案编号： zl-08-2013） 第 2 页 共 31 页 目录 1. 确认方案审批表 2.概述 3.确认目的 4.确认范围 5.人员职责 6.相关文件 7.仪器、仪表校验 8.确认计划与进度 9. 确认步骤 9.1 运行确认 （ OQ） 9.2 性能确认 （ PQ） 10.偏差处理记录 11. 确认结果评定与结论 12.再确认项目及检查周期 13.确认人员培训 14.附件 第 3 页 共 31 页 1.确认方案 审 批 起草 起草部门 姓名 日期 年 月 日 年 月 日 年 月 日 审核 审核部门 姓名
2、 日期 年 月 日 年 月 日 年 月 日 年 月 日 年 月 日 批准 批准部门 姓名 日期 年 月 日 年 月 日 第 4 页 共 31 页 2.概述 2.1 设备基本信息 设备名称：高 效液相色谱仪 设备型号： LC-2010AHT 国别：日本 厂名 ： 岛津 2.2 设备系统描述 设备结构： LC-2010AHT 是主要由 4 液低压梯度、自动进样器、柱温箱、 UV 检测部组成的一体型高效液相色谱仪， 外接 RID-10A 型 示差 检测器、打印机和稳压电源， 各部分的操作均可由工作站或液晶 控制 面板控制。 工作原理： LC-2010AHT 检测步骤主要包括流路清洗、色谱柱平衡及检测
3、器平衡、样品处理、自动进样程序设定、自动进样、后处理及数据处理等， LC-2010AHT 根据不同色谱柱对样品在色谱柱内的保留时间不同，用流动相将样品通过色谱柱洗脱，再通过适合的检测器对洗脱的样品成份进行分析。 设备用途： 低分子量肝素钙及立迈青、小牛血去蛋白提取物及睿保特、干扰素原液、肝素钠和部分原辅料等相关项目的定性、定量分析检验。 2.3 设备技术参数 2.3.1 输液泵 方式设定输液泵参数时，请参照以下参数表： ISO.方式 ： 参数名称 内容 设定范围 步进 初始值 备注 Method 画面 FLOW 流量 0-5.000（ ml/min） 0.001 0 参数画面 P.MAX 压力
4、上限值 1.0-37.8（ Mpa） 0.1 9.8 10-385（ kgf/cm2） 1 100 142-5477（ Psi） 1 1422 10-378（ bar） 1 98 P.MIN 压力下限值 0-34.3（ Mpa） 0.1 0 0-350（ kgf/cm2） 1 0.0 0-4979（ Psi） 1 0 0-343（ bar） 1 0 第 5 页 共 31 页 PORT 使用的流动相通道的选择 1-4 1 1 1：流动相通道 A 2：流动相通道 B 3：流动相通道 C 4：流动相通道 D DEGAS 脱气装置ON/OFF 控制 0.1 1 O:OFF I:ON GRAD.方式 参
5、 数名称 内容 设定范围 步进 初始值 备注 Method 画面 FLOW 流量 0-5.000（ ml/min） 0.001 100 A.CONC A 液浓度（ %） 0-100.0（ %） 0.1 100 A.CONC 不能在 Tim Program 上使用 B.CONC B 液浓度（ %） 0-100.0（ %） 0.1 100 C.CONC C 液浓度（ %） 0-100.0（ %） 0.1 100 D.CONC D 液浓度（ %） 0-100.0（ %） 0.1 100 参数画面 P.MAX 压力上限值 1.0-37.8（ Mpa） 0.1 9.8 10-385（ kgf/cm2）
6、1 100 142-5477（ Psi） 1 1422 10-378（ bar） 1 98 P.MIN 压力下限值 0-34.3（ Mpa） 0.1 0 0-350（ kgf/cm2） 1 0.0 0-4979（ Psi） 1 0 0-343（ bar） 1 0 B.CURV B液的梯度曲线 -10 10 1 0 C.CURV C液的梯度曲线 -10 10 1 0 D.CURV D液的梯度曲线 -10 10 1 0 DEGAS 脱气装置ON/OFF 控制 0.1 1 O:OFF I:ON 2.3.2 柱温箱和外围设备 设定柱温箱和外围设备的参数时，请参照以下的一览表： 第 6 页 共 31 页
7、 参数名称 内容 设定范围 步进 初始值 备注 Method 画面 OVENT 柱温箱温度 0（ 0 为 OFF） 4-60 1 40 T.MAX 柱温箱温度上限值 5-65 1 65 EVENT EVENT1、 2 继电器输出的 ON/OFF 0、 1、 2、 12 1 0 0： EVENT1、 2 都为 OFF 1：仅 EVENT1 为 ON 2：仅 EVENT2 为 ON 12： EVENT1、 2 都为 ON EVENT3 EVENT3 继电器输出的 ON/OFF 0.1 1 0 仅限选择板设定时 O:OFF I:ON EVENT4 EVENT4 继电器输出的 ON/OFF 0.1 1
8、 0 仅限选择板设定时 O:OFF I:ON EVENT5 EVENT5 继电器输出的 ON/OFF 0.1 1 0 仅限选择板设定时 O:OFF I:ON SMPLE.C 试样冷却器调温 0.1 1 仅限 LC-2010C O:OFF I:ON 2.3.3 UV-VIS 检测器 设定 UV-VIS 检测器的参数时，请参照以下的一览表： 参数名称 内容 设定范围 步进 初始值 备注 Method 画面 WAVE 波长 1 190-600（ nm） 1 254 注意： DUAL=1 时，必须使用190 WAVE、 WAVE2 370或 371 WAVE、 WAVE600 。不能进行WAVE=19
9、0 、 WAVE2=600等设定 参数画面 WAVE2 波长 2 190-600（ nm） 1 254 LAMP 灯 （ ON/OFF） 0、 1 1 1 O:OFF I:ON DUAL 2 波长方式的设定 0、 1 1 0 O:SINGLE I:DUAL AUXRNG1 AUX 量程 1 1 6 1 3 1:0.5（ AU/V） 第 7 页 共 31 页 2:1（ AU/V） 3:2（ AU/V） 4:4（ AU/V） 5:1.25（ AU/V） 6:2.5（ AU/V） RESP 响应 1 10 1 4 1:0.5（ AU/V） 2:1（ AU/V） 3:2（ AU/V） 4:4（ AU/
10、V） 5:1.25（ AU/V） 6:2.5（ AU/V） POL 极性 -1、 1 -1： - 1： + SVLVL 溶剂再循环阀切换水平值 0 1 0.0001 0.0000 溶剂再循环阀硬连接时显示。 CELL.T 池调温设定 0、 1、 2 1 0： OFF 1:LOW(40) 2:HIGH(50) 3.确认 目的 为确认 LC-2010AHT 高 效液相色谱仪 检测数据准确可靠，性能稳定，特制订本确认方案，对LC-2010AHT 高 效液相色谱仪 进行确认。 4.确认范围 本方案适用于 LC-2010AHT 高 效液相色谱仪 的运行和性能确认。 5.人员职责 成员 人员 职责 验证专
11、员 负责对现场监控，协助编制验证方案、验 证报告，对验证结果进行收集并交验证小组编写验证报告；监督验证过程按验证方案执行 QC人员 负责确认用对照品、样品及其它消耗性备品的准备，负责备品、备件的保存，负责设备仪器的操作，负责记录各种测试结果。 负责收集各项确认、试验记录， 负责起草仪器使用、维护保养的标准操作规程。 QC经理 负责组织确认方案和确认报告的起草，方案经批准后组织实施培训，对确认结果进行分析评价。 QA经理 负责验证方案和报告的审核，负责对验证过程实施监督，负责对偏差作出处理意见 第 8 页 共 31 页 质量部经理 审核批准确认 方案、报告，对确认偏差进行分析并审核批准解决方案。
12、对最终确认结果进行评价。 验证小组 审核、批准确认方案，确认报告。为编写方案的人员提供指南，为执行方案提供时间表。包括：必须人员的大概数量，所要求的时间长度，如何进行分析等。审阅和检验必要的标准操作程序。评估所有的测试结果，对确认偏差进行分析及提出解决方案，并组织施。 6.相关文件 中国药典 2010 年版二部 中华人民共和国国家计量检定规程液相色谱仪（ JJG705-2002） 高效液相色谱法标准操作规程 高效液相色谱仪使用维护规程 高效 液相色谱柱使用维护规程 注射用低分子量肝素钙标准操作规程 岛津 LC-2010AHT 高效液相色谱仪操作说明书 文件检查记录见附件一 7. 仪器 、 仪表
13、校验 验证前对验证过程中涉及到的仪器仪表等检验仪器进行确认，保证其在有效期内。 仪器 、 仪表校验 见附件二 8. 确认计划与进度 运行确认（ OQ）：从 2013 年 02 月 01 日到 2013 年 02 月 28 日 性能确认（ PQ）：从 2013 年 04 月 01 日到 2013 年 04 月 30 日 9. 确认步骤 9.1 运行确认： 9.1.1 准备： 用 0.22 m 滤膜滤过纯化水 500ml。 将管路滤头都放在已过滤的纯化水中，查看废液收集瓶有是否有足够容量。 查看电源是否通电。 仪器网络、管路是否联接好。 9.1.2 开机确认： 自检：打开 HPLC 电源开关，仪器
14、进入自检程序，自检通过标明仪器的各部件正常。 紫外检测器与工作站联接：打开计算机，当仪器自检通过后，打开 LCsolution 工作站，打开第 9 页 共 31 页 紫外通道，仪器会发出一声“滴”响声，工作站界面显示绿色 Ready 字样，表明工作站与主机联接正常。 示差检测器与工作站联接：打开示差检测器及连 接器，打开工作站示差通道，工作站界面显示绿色 Ready 字样时，表明示差检测器与工作站联接正常。 打印机与工作站联接：打开工作站中任意一份数据，添加到报告模板中，点击打印，查看打印机是否能正常打印数据报告。 紫外工作站对仪器的控制：点击排气、清洗程序按钮，查看仪器是否能按照设定程序进行
15、排气、清洗管路；点击柱温箱控制按钮，查看柱温箱温度显示是否能正常升温；点击泵控制按钮，查看泵是否能正常开启；点击基线归零按钮，查看基线是否能归零。 示差工作站对示差检测器的控制：点击检测池冲洗按钮【 RID(检测器 A)R.流速开 /关】，查看示差检测器上冲洗灯（ R flow）是否亮起；点击检测器平衡按钮【平衡 RID(检测器 A)】，查看工作站中基线是否出现平衡峰；点击检测器归零按钮【检测器 A 零点】，查看工作站中基线是否能归零。 9.1.3 Auto Validation 9.1.3.1 确认项目： 波长准确性检查 D2 灯能量检查 输液稳定性的检查 调温精确度的检查 吸光度的准确度的
16、检查 UV-VIS 检测器基线漂移的检查 UV-VIS 检测器基线噪声的检查 压力极限的检查 9.1.3.2 仪器与设备 ： 名称 型号 /规格 编号 是否在有效期内 阻尼管 / 228-18871-91 / 9.1.3.3 测试条件： 流动相：已过滤的纯化水 检测器：紫外检测器，波长为 250nm 第 10 页 共 31 页 柱温： 35 流速： 1.0ml/min 9.1.5.4 测试方法和步骤： 将 A、 B、 C、 D 流路放入纯化水中。 装入阻尼管。 选择输液方式（梯度洗脱），设定流动相流速、紫外检查波长、柱温。 色谱柱、检测器平衡。 按液晶控制面板上 VP 键，显示 VP/TOP
17、界面。在 VP/TOP 界面上按 F3VALID键，选择第 3 项，按 Enter 键，显示 Auto Validation 界面。 按 F1START键， Auto Validation 开始，流路 B 开始清洗。 等待清洗结束，切换至下一界面，依次开始波长准确度检查、 D2 灯能量检查、输液稳定性的检查、调温精确度的检查、吸光度的准确度的检查、 UV-VIS 检测器基线漂移和噪声的检查、压力极限的检查。 结果检查：检查结束，输入界面右显示的各检查项目的编号（数字键），可显示检查结果。 实验所需试药及试液制备记录见附件三 Auto Validation 记录见附件四 高效液相色谱仪运行确认记
18、录见附件五 运行确认合格之后要填写阶段运行确认表见附件六 9.2 性能确认： 考察仪器运行的可靠性、主要运行参数的稳定性和结果的重现性。 9.2.1 流量准确度： 9.2.1.1 仪器与设备：秒表、阻尼管。 9.2.1.2 测试条件： 流动相：已过滤的纯化水 柱温： 35 9.2.1.3 测试方法和步骤： 分别设定流速为 0.2ml/min， 0.5ml/min， 1.0ml/min 等值进行校验，这些流速覆盖了实验室使用的流速范围。待流速稳定后，在流动相流出口处分别用已称定重量的称量瓶准 确收集流动相，用秒表计时 10 分钟，不同流速各测量 3 次，称量完成后用天平称定称量瓶和水的总重，计算得出流速是否准确。
