1、1 . 免疫 ( immunity) 免疫 ( immune)是机体识别“自己”、排除“异己 (非己 )”过程中 所产生的生物学效应的总和。正常情况下免疫是维持内环境稳定 的一种生理性防御功能。 2 .免疫防御 ( immune defence ) 主要指机体对外来微生物及其毒素的免疫保护作用 应答过强或持续过长导致超敏反应 ; 应答过低或缺如导致免疫缺陷病。 3 . 免疫监视 ( immune surveillance) * 指免疫系统识别畸变和突变细胞 , 并将其清除的功能 ; * 免疫监视功能异常导致肿瘤发生或持续 病毒感染。 4 . 免疫自稳 ( immune homeostasis
2、) * 免疫系统通过调节网络实现免疫系统功能的相对稳定 ; * 自稳机制发生异常 (应答过强或过弱 ) 导致自身免疫病。 1 . 单克隆抗体 由单一 B 细胞克隆产生的高度均一 ( 属同一类、亚类、型别 )、 单一特异性 (仅针对特定抗原表位 ) 的抗体 , 称为单克隆抗体。通 常采用小鼠 B 细胞与骨髓瘤细胞形成的杂交瘤 ( hybridoma ) 技术 来制备 2 . 多克隆抗体 用普通抗原免疫动物所获得的抗体 , 由于抗原含多种抗原决 定簇 , 同时刺激多个 B 细胞克隆产生抗体 , 所获得的抗体是包括 多种特异性抗体的混合物 , 此为多克隆抗体。 3 . 基因工程抗体 借助 DNA 重
3、组技术和蛋白质工程技术 , 按人们的意愿在基 因水平上对 Ig 进行切割、拼接或修饰 , 重新组装成为新型抗体分 子 , 称为基因工程抗体。 4 . Ig 类别转换 Ig类型转换 (class switch）或称同种型转换 (isotype switch)是指一个 B淋巴细胞克隆在分化过程中 VH基因片段保持不变，而发生 CH基因节段的重排，比较 CH基因片段重排后基因编码的产物， V区相同而 C区不同，即 识别抗原特异性不变 ,而类或亚类发生改变。 这种类型转换在无明显诱因下可自发产生。 5 . Ig 独特型 免疫球蛋白独特型 是在不同个体的 抗体 上的 等位基因 。 6 . HVR/ CD
4、R 7 . 抗体 具有抗原结合部位，能与抗原分子上相应表位发生特异性 结合的具有免疫功能的球蛋白。 8 . ADCC 9 . 调理作用 1 . 补体 存在于人和脊椎动物血清、组织液中的一组球蛋白 , 经活化后 具有酶活性 , 发现时被认为是抗体发挥溶细胞作用的必要补充条 件 , 故称为补体 ( complement , C) 2 . 补体旁路激活途径 3 . 补体经典激活途径 由 C1 开始的补体激活途径 ; 其激活物主要是免疫复合物 ( immune complex , IC)。 1 . 识别阶段 C1 (C1q) 与 IC 中 Ig 补体结合位点结合 C1 脂酶形成 IC C1q C1q
5、C1r C1s(具有脂酶活性 ) 2 . 活化阶段 C1s 作用于后续成分 , 至形成 C3 转化酶和 C5 转化酶。 C4 C4a + C4b C1s C 4b 2b(C3 转化酶 ) C 4b2b3b(C5 转化酶 ) C2 C2a + C2b C3 C3b + C3a 4 . MBL 激活途径 MBL 途径与经典途径过程基本类似 , 但激活物质是细菌表面 甘露糖残基 , 激活过程始于细菌表面甘露糖残基与 MBL 结合。 MBL 与细菌表面甘露糖 残基结合 , 再与丝氨酸蛋白酶结合 , 形成 MBL 相关的丝氨酸蛋白酶 ( MBL-associated serine protease, M
6、ASP-1、 -2) 。 MASP 与活化的 C1q 具有同样的生物学活性 , 可水解 C4 和 C2 分子 , 继而形成 C3 转化酶 , 其后过程与经典途径相同。 1 . 细胞因子 是由细胞分泌、具有生物活性的小分子多肽物质的统称。 2 . 趋化因子 趋化性细胞因子 ( chemokine ) 是对血细胞具有趋化、激活 作用的因子。 3 . 集落刺激因子 集落刺激因子 ( colony stimulating factor , CSF) 是刺激不 同造血干细胞增殖、分化并使之在半固体培养基中形成集落的因 子。它包括 GM/ G/ M-CSF、 EPO、 SCF 和 TPO。 4 . 白细胞
7、介素 白细胞介素 ( interleukin , IL) 是介导白细胞或其他细胞间 相互作用的 CK 5 . 干扰素 干扰素 ( inteferon , IFN ) 是干扰病毒复制的 CK, 可分为 、三种。 * IFN- / (型 )主要由白细胞、成纤维细胞、病毒感染细胞 产生。 * IFN- (型 )主要由 活化 T 细胞、 NK 细胞产生。 6 . 肿瘤坏死因子 肿瘤坏死因子 ( tumor necrosis factor , TNF ) 是对某些肿 瘤具有胞毒活性的因子 , 包括 TNF- 和 TNF- 三、名词解释 1 . MHC 复合体 主要组织相容性复合体 (MHC) 是一组紧密
8、连锁的基因群 , 其编码的产物在启动特异性免疫应答中起重要作用 , 也决定个体 的组织相容性。 2 . HLA 抗原 HLA是具有高度多态性的 同种异体抗原 ，其化学本质为一类糖蛋白，由一条 重链 (被糖基化的 )和一条 轻链非共价结合而成。其肽链的氨基端向外 (约占整个分子的 3/4)，羧基端穿入细胞质，中间疏水部分在胞膜中。 HLA按其分布和功能分为 类抗原和 类抗原。 三、名词解释 1 . 酶联免疫吸附试验 ( ELISA) 酶联免疫吸附试验 ( ELISA) 将已知抗原或抗体吸附在固相 载体表面 , 使抗原抗体反应在固相表面上进行 , 用洗涤方法使 固相上的抗原抗体复合物与液相中游离抗
9、原或抗体分开。该 技术用于抗原或抗体的 定量检测。 2 . 放射免疫分析法 (RIA) 放射免疫分析法 ( RIA) 用放射性核素标记抗原或抗体进行的免疫学检测。 RLA 常用于微量抗原或抗体的定量检测。 3 . 免疫荧光技术 免疫荧光技术 用荧光素与抗体连接成荧光抗体 ,再与待检标 本中的抗原反应 , 在荧光显微镜下观察抗原抗体反应的部位。 该技术用于抗原的定位检测。 4 . 凝集反应 凝集反应 颗粒性抗原 (如细菌、细胞等 )与相应的抗体结合后 形成肉眼可见的凝集块 , 该类反应称为凝集反应。 5 . 直接凝集反应 直接凝集反应 将细菌或红细胞与相应抗体直接 反应 ,出现细 菌或红细胞凝集
10、的现象。 6 . 间接凝集反应 间接凝集反应 将可溶性抗原包被 (结合 )在无关载体颗粒表 面 , 再与相应抗体反应后 , 出现载体颗粒凝集的现象。 7 . 对流免疫电泳 对流免疫电泳 在琼脂糖电泳凝胶的正负极端打孔 ,并分别加 入抗体和抗原 , 在电场的作用下 , 抗体和抗原作定向扩散。其 中抗体由于电渗作用 , 扩散方向为正极负极 , 而抗原则由于 电泳作用 , 扩散方向为负极正极 , 在二者比例适当的位置出 现沉淀线。对流免疫电泳用于抗原或抗体的定性检测。 四、问答题 1 . 从外周血分离淋 巴细胞的方法有哪些 ? 1 . (1 ) 依靠淋巴细胞物理特征的分离方法有以下几种 : 葡聚糖
11、-泛影葡胺 ( Ficoll)等密度梯度离心法 根据淋巴细 胞的比重将其与其他血细胞成分分离。 尼龙绵分离法 根据 B 淋巴细胞粘附于尼龙棉的特性 , 将 B 细胞与 T 细胞分开。 (2 ) 依靠表面标记的分离方法 : E 花环分离法 T 细胞表面的 CD2 是绵羊红细胞 (SRBC) 受 体 ,能使 T 细胞与 SRBC 结合形成 E 花环。因花环形成后比重变 大 , 采用密度梯度离心即可将 T 细胞从其他淋巴细胞中分离出来。 免疫磁珠分离 法 将某种表面标记特异性抗体包被在磁性 微珠上 , 与磁珠交联的抗体能够特异性结合具有这种表面标记 的细胞 , 然后用强磁场可将具有这种表面标记的细胞
12、分离出来。 流式细胞术分离法 利用各种荧光素标记的表面标记特 异性抗体 , 使不同表面标记的细胞结合上不同的荧光素 , 借助 荧光活化细胞分选仪 ( FACS) 将各种细胞分离开来。 2 . 简述细胞毒试验的原理。 2 . (1 ) 对于可溶性物质 (如抗体、补体、肿瘤坏死因子等 )导致的靶细胞破坏 , 可以采用简单的染色法来进行检测。原理是当靶 细胞破坏时 , 其胞膜完整性被 破坏 , 当用染料 (如台盼蓝、酚红、 结晶紫等 )染色时 , 损伤的细胞浆将会着色 , 而未受损的靶细胞 因胞膜完整 , 会拒染。结合光密度的测定 , 能够进行定量检测。 (2 ) 对于效应细胞 (如 CTL、 NK
13、 等 )对靶细胞的损伤 , 可以采用 同位素释放法、酶释放法来进行测定。其原理如下 : 5 1Cr 释放法 : 用 Na5 1 2 CrO4 标记靶细胞 , 若效应细胞损伤靶 细胞 , 5 1Cr 将释放进入上清液 , 检测上清液中的放射活性 , 即可 计算出效应细胞对靶细胞的杀伤活性。 酶释放法 : 靶细胞内具有多种酶 , 当靶细胞 受损时 , 这些酶 将从胞内释放至上清液 , 通过上清液中酶活性的检测 , 可以计 算出效应细胞杀伤靶细胞的活性。最常检测的酶是乳酸脱氢 酶。 (3) 细胞凋亡检测法 : 某些因素能够诱导靶细胞发生凋亡 , 这 也是免疫应答杀伤靶细胞的一种形式。凋亡是细胞内源性
14、 DNA 酶被激活 , 将染色体 DNA 酶解 , 使细胞发生程序性死亡。 可以采用 DNA ladder 法、 TUNEL 法等方法来检测靶细胞的凋 亡事件 , 从而评估对靶细胞杀伤的效应。 3 . 简述细胞因子的检测原理。 3 . 细胞因子检测可以分为三类。 (1 ) 生物活性检测法 : 根据细胞因子的生物学活性来检测其含 量。该方法包括细胞增殖试验 ( 如 IL-2 检测 )、细胞毒试验 ( 如 TNF 检测 ) 、保护细胞免受病毒致病 ( 如干扰素检测 )等。 (2 ) 免疫学检测法 : 用抗细胞因子抗体进行抗原抗体反应 , 根 据抗原抗体反应检测的基本原理 , 对细胞因子的含量进行测
15、 定。该法包括 ELISA、 RIA 和免疫印迹等。 (3 ) 分子生物学检测法 : 根据细胞因子基因的核苷酸序列 , 设 计相应引物 , 借助反转录 PCR 测定待测细胞中该细胞因子 mRNA 的含量 , 从而评估该细 胞因子基因表达的情况。 四、问答题 1 . 何为 HLA 基因复合体的多基因性和多态性 ? 试述其生物学意 义。 1 . HLA 复合体的多基因性是指 HLA 复合体中 ,结构和功能相似的基因座位有多个。多态性是指随机婚配的群体中 , 同一基因 座位上有众多的等位基因 , 可编码两种以上产物。 HLA 复合 体是目前已知人类基因组中最复杂的多态性系统。 因为 HLA 复合体中
16、基因座位众多 , 每一基因座均有众多 复等位基因 , 各座位等位基因随机组合 , 导致 HLA 基因型的极 端复杂性和表型的极端多样性。人是二倍体生物 , HLA 复合 体中的等位基因均为共显性 , 从而增加了 HLA 表型的多样性。 HLA 表型的多样性一方面有利于群体适应复杂的环境改 变 , 从而维持种群的生存。因为 MHC 的主要生物学功能是提 呈抗原 , 启动特异性免疫应答 , 其多样性赋予群体 ( 多态性 ) 和 个体 (多基因性 ) 提呈抗原的多样性。另一方面在群体中难以 寻找到 HLA 型别完全一致的个体 , 可用于个体识别 , 但不利于 寻找同种移植物供者。 2 . 比较 HLA 类和 HLA 类分子在结构、组织分布和提呈抗原 方面的特点。
