1、 1 复习思考题 1.什么是微生物?包括哪些主要类群? .微生物( microorganism):是一切肉眼看不见或看不清的微小生物的总称。( 0.1mm) 微米级:光学显微镜下可见(细胞) 小(个体微小) 纳米级:电子显微镜下可见(细胞器,病毒) 单细胞 简(构造简单) 简单多细胞 微生物 非细胞(即“分子生物”) 原核类:细菌(真细菌,古生菌),放线菌,蓝细菌,原体,立克次氏体,衣原体等 低(进化地位低) 真核类:真菌(酵母菌,霉菌,蕈菌),原生动物,显微藻类 非细胞类:病毒,亚病毒(类病毒,拟病毒,朊病毒) 2.微生物有哪 五大特性 ? 体积小,面积 大;吸收多,转化快;生长旺,繁殖快;
2、适应强,易变异;分布广,种类多。 3.微生物的发展经历了几个阶段?各阶段的代表人物为谁? 史前期:各国劳动人民,未见微生物,先利用,如酿酒,发面,沤肥 初创期:列文虎克,自制显微镜,观察到细菌等微生物个体 奠基期:巴斯德,用实践 理论 实践的方法开展研究,建立微生物学及许多分支学科 发展期: e.buchner,发现微生物的代谢统一性,进入寻找人类动物病原菌的黄金时期 成熟期: j.watson 和 f.crick 揭示微生物的活动规律,微生物基因组的一眼就促进了生物信息时代 的到来。 4.研究微生物学的基本方法有哪些? 答:显微镜技术,无菌技术,纯种分离纯化技术,纯种培养技术,微生物保藏技术
3、 5.什么是无菌操作技术? 答: 2 在微生物转接过程中,一般在火焰旁进行,并用火焰直接灼烧接种环,以达到灭菌的目的,但一定要保证其冷却后方可进行转接,以免烫伤微生物。如果是转接液体培养物,则用预先已灭菌的玻璃吸管或吸嘴 6.细菌的基本形状 有 几种?细菌大小测量 的方法及 单位是什么? 3 种 单位: m 7.细菌细胞结构中一般结构和特殊结构分别包括哪些? 一般结构:细胞壁、细胞膜 、细胞质和核区特殊结构:鞭毛、菌毛、 8.革兰氏阳性菌和革兰氏阴性菌细胞壁 的主要成份分别是什么?肽聚糖单体是由哪三部分组成的?青霉素的作用位点是哪个部位? G+细菌的细胞壁:肽聚糖、磷壁酸 G-细菌的细胞壁:外
4、膜 3 部分:双糖单位 四肽尾 肽桥 青霉素的作用位点是 PBP2 9.何为原生质体、球状体、 L-型细菌? 生质体 指在人为条件下,用溶菌酶除尽原有细胞壁或用青霉素抑制新生细胞壁合成后,所得到的仅有一层细胞膜包裹的圆球状渗透敏感细胞,它们只能用等渗或高渗培养液保存或维持生长。 球状体 又称原生质球,指还残留了部分细胞壁(尤其是革兰氏阴性菌外层膜)的圆球形原生质体。 3 L 型细菌 指稳定的 L 型即那些实验室或宿主体内通过自发突变而形成的遗传性稳定的细胞壁缺损菌株。 10.何为 糖被 、芽孢、伴孢晶体? 菌毛、性菌毛及鞭毛的功能分别是什么? 糖被 包被与某些细胞壁外的一层厚度不定的透明胶状物
5、质。 芽孢 某些细菌在生长发育后期,在细胞内形成的一个圆形或椭圆形、厚壁、含水量低、抗逆性强的休眠构造,称为芽孢。 伴孢晶体 少数芽孢杆菌产生的糖蛋白昆虫毒素。 功能:菌毛多存在于革兰氏阴性致病菌中。它们借助菌毛可使自己牢固的黏附在宿主的呼吸道、消化道、或泌尿生殖道等粘膜上。性菌毛一般见于革兰氏阴性菌供体菌中,具有向受体菌传递遗传物质的作用。有的还是 RNA 噬菌体的特异性吸附受体。鞭毛具有运动功能。 11.细菌 主要 通过何种方式繁殖后代? 什么是菌落?细菌 菌落有何特点? 答:细菌的主要繁殖方式为裂殖。菌落 将单个细菌(或其他微生物)细胞或一小堆同种细胞接种到固体培养基表面(有时为内层),
6、当他占有一定的发展空间并处于适宜的培养 条件下,该细胞就会迅速生长繁殖并形成细胞堆,此即菌4 落。菌落的特点:湿润、较光滑、较透明、较黏稠、易挑取、质地均匀以及菌落各部分颜色一致。 12.放线菌的菌丝 按功能和形态 可分为几类型? 通常 通过什么方式繁殖后代? 答: 答:四类 基内菌丝会断裂成大量杆状菌状体的放线菌、菌丝顶端形成少量孢子的放线菌、具有孢囊并产孢囊孢子的放线菌、具有孢囊并产游动孢子的放线菌。通常借形成各种孢子进行繁殖的。 13.放线菌最主要的特性是什么?菌落有何特点? 放线菌是一类呈菌丝状生长和以孢子繁殖的陆生性较强的原核生物,大部分放线菌 都呈革兰氏阳性。 菌落特点 :小型、干
7、燥、不透明、表面呈致密的丝绒状,上有一薄层彩色的“干粉”;菌落和培养基连接紧密,难以挑取;菌落的正反面颜色常不一致,以及在菌落边缘的琼脂平面有变形现象。 14.多数蓝细菌具有哪两种重要的功能?完成这两种功能的场所分别在哪个部位? 大多数蓝细菌具有固氮和光合作用的功能。固氮作用主要发生在异形胞内,光合作用主要在类囊体的叶绿素 a 中进行。 14.酿酒 酵母通过何种方式 进行有性繁殖和无性繁殖 ?菌落有何特征? 通过牙殖的方式进行无性繁殖,通过产子囊孢子的方式进行有性繁殖。 菌落特 征:较湿润,较透明,表面较光滑,容易挑起,菌落质地均匀,正面与反面以及边缘与中央部位颜色较一致。 15.霉菌繁殖方式
8、可分为哪两 种 类 型 ?分别可产生哪些孢子? 霉菌的繁殖方式多种多样,通常可分为有性繁殖和无性繁殖。无性孢子有:孢囊孢子、分生孢子、节孢子、厚垣孢子。有性孢子有:卵孢子、接合孢子、子囊孢子、担孢子。 16.霉菌的菌落特征是什么? 5 霉菌的菌落特征:形态较大,质地疏松,外观干燥,不透明,呈现或松或紧的蛛网状、绒毛状、棉絮状或毡状;菌落与培养基的连接紧密,不易挑取,菌落正面与反面的颜色、构造,以及边缘 与中心的颜色、构造通常不一致。 17.霉菌的菌丝体可分为哪几种类型?它们分别可分化出哪些特化构造? 答:霉菌的菌丝体可分为两类:密布在固体营养基内部,主要执行吸收营养物质的营养菌丝体;伸展到空间
9、的气生菌丝体。营养菌丝体的特化构造:假根,匍匐菌丝,吸器,附着胞,附着枝,菌核,菌索,菌环和菌网;气生菌丝体的特化构造:结构简单的子实体,结构复杂的子实体,子囊果 18.什么是病毒?有何特点? 答:病毒是一类由核酸和蛋白质等少数几种成分组成的超显微非细胞生物,其本质是一类含DNA 或 RNA 的特殊遗传因子。特点: 1 形体及其微小,一般都能通过细菌滤器, 2 没有细胞构造,其主要成分仅为核酸和蛋白质两种, 3 每一种病毒只含一种核酸, 4 既无产能酶系,也无蛋白质和核酸合成酶系, 5 以核酸和蛋白质等元件的装配实现其大量繁殖, 6 在离体条件下,能以无生命的生物大分子存在,并可长期保持其侵染
10、活力。 7 对一般抗生素不敏感,但对干扰素敏感。 8 有些病毒的核酸还能整合到宿主的基因组中,并诱发潜伏性感染。 19.病毒大小 测量单位?其化学组成如何? 答:单位: nm。病毒粒的基本成分是核酸和蛋白质。核酸位于它的中心,称核心,蛋白质包围在核心周围,形 成了衣壳。 20.什么是烈性噬菌体?其增殖过程分哪几步? 答:凡在短时间内能连续完成吸附,侵入,增殖,成熟,裂解这五个阶段而实现其繁殖的噬菌体,称为烈性噬菌体。 吸附,侵入,增殖,成熟,裂解。 21.什么是一步生长曲线?可分为几个时期? 答:定量描述烈性噬菌体生长规律的实验曲线。 分为:潜伏期,裂解期,平稳期。 6 22.什么是溶源菌、温
11、和噬菌体? 答:凡能引起溶源性的噬菌体即称温和噬菌体,而其宿主就称溶源菌。 23.类病毒、拟病毒、朊病毒 化学组成如何 ? 答:类病毒:一类只含 RNA 一种成分, 专性寄生在活细胞内的分子病原体。 拟病毒:一类包裹在真病毒粒中的有缺陷的类病毒。 朊病毒:一类不含核酸的传染性蛋白质分子。 24.微生物 营养物质 六要素 包括哪些? 答:碳源,氮源,能源,生长因子,无机盐。 25.根据碳源、能源及电子供体的不同可将微生物划分为几种类型?举例说明。 答: 光能无机自养型 光能有机异养型 化能无机自养型 化能有机自养型 26.营养物质进入细胞的方式有几种?各有何特点? 答: 1自由扩散 特点: 物质
12、在扩散过程中没有发生任何反应; 不消耗能量;不能逆浓度运输; 运输 速率与膜内外物质的浓度差成正比 2协助扩散 特点: 不消耗能量 参与运输的物质本身的分子结构不发生变化 不能进行逆浓度运输 运输速率与膜内外物质的浓度差成正比 需要载体参与 3主动运输 特点: 物质运输过程中需要消耗能量和载体,而且可以进行逆浓度运输。 4基团移位 特点:基团移位是另一种类型的主动运输,它与主动运输方式的不同之处在于它有一个复 杂的运输系统来完成物质的运输,而物质在运输过程中发生化学变化 7 27.什么是培养基?配制培养基时应遵循什么原则? 答: 培养基是人工配制的,适合微生物 生长繁殖或产生代谢产物的营养基质
13、。 原则:目的明确 营养协调 理化条件适宜 经济节约 28.培养基按化学成分、物理状态、用途来划分可分为哪几种类型? 答: 化学成分:天然培养基、合成培养基、半合成培养基 物理状态:固体培养基、半固体培养基、液体培养基 用途:基础培养基、加富培养基、选择培养基、鉴别培养基 29.在化能异养微生物的生物氧化中,其基质脱氢和产能途径主要有哪几条?试比较各途径的主要特点。 (从产生的还原力、能量来了解) 答: 1、 EMP 途径 特点:基本代谢途径,产能效率低,提供多种中间代谢物作为 合成代谢原料, 有氧时与 TCA 环连接,无氧时丙酮酸及其进一步代谢产物乙醛被还原成各种发酵产物,与 发酵工业有密切
14、关系。 2、 HMP 途径 3、 ED 途径 4、 TCA 循环 特点: 1、为糖、脂、蛋白质三大物质转化中心枢纽。 2、循环中的某些中间产物是一些重要物质生物合成的前体; 3、生物体提供能量的主要形式; 4、为人类利用生物发酵生产所需产品提供主要的代谢途径。如:柠檬 酸发酵; Glu 发酵等。 30.呼吸分为哪几种类型? 答: 有氧呼吸 无氧呼吸 发酵 31.什么是紫膜?由何功能? 答: 在膜上呈斑 片状(直径约 0.5 mm)独立分布,其总面积约占细胞膜的一半,主要由细菌视 紫红质组成。 功能:能进行独特光合作用 8 32.何为生物固氮作用?能固氮的微生物有哪几类? 答: 微生物将氮还原为
15、氨的过程称为生物固氮 自生固氮菌 共生固氮菌 联合固氮菌 33.固氮过程需要满足哪些条件? 答: ( 1) ATP 的供应,( 2)还原力【 H】及其传递载体, (3)固氮酶,( 4)还原底物 N2 ,( 5)镁离子。 34.什么叫次生代谢和次生代谢物? 答: 次生代谢是指生物合成生命非必需物质并储存次生代谢产物的过程。次生代谢物是指 某些微生物生长到稳定期前后,以结构简单、代谢途径明确,产量较大的出生代谢物作前体,通过复杂的次生代谢途径所合成的各种结构复杂的化合物。 35.什么是纯培养?纯培养养的获得方法有哪些? 答: 纯培养是指只在单一种类存在的状态下所进行的生物培养。平板分离法(稀释涂布
16、平板法、稀释混合平板法、平板划线法、单细胞挑取法。 36.微生物的生长可通过哪些方法测定? 答: ( 1)称干重法( 2)比浊法( 3)测含氮量( 4)血球计数板法( 5)液体稀释法( 6)平板菌落计数法。 37.什么是典型生长曲线?它可分几个时期?各时期有何特点? 在生产实践有何指导作用? 答: .定量描述液体培养基中微生物群体生长规律的实验曲线,称为生长曲线。分为延滞期,指数期,稳定期,衰亡期四个时期。延滞期特点:生长速率常数为零;细胞形态变大或增长;细胞内的 RNA 尤其是 rRNA 含量增高,原声质呈嗜碱性;合成代谢十分活跃;对外界不良条件反应敏感。指数期特点:生长速率常数 R 最大,
17、因而细胞每分裂一次所需时间 代时或原生质增加一倍所需的倍增时间最短;细胞进行平衡生长,故菌体各部分的成分十分均匀;酶系活跃,代谢旺盛。稳定期特点:生长速率常数 R 等于零,即处于新繁殖的细胞数与 衰亡的细胞数相等。衰亡期特点:微生物的个体死亡速度超过新生速度,整个群体呈现负生长状态( R 为负值)。稳定期的生长规律对生产实践有着重要的指导意义,对以生产菌体或与菌体生长相平行的代谢产物为母的的某些发酵生产来说,稳定期是产物的最佳收获期;对维生素,碱基,氨基酸等物质进行生物测定来说,稳定期是最佳测定时期;此外,通过对稳定期到来原因的研究,还促进了连续培养原理的提出和工艺,技术的创建。 9 38.什
18、么是连续培养?有何优点? 答: 连续培养是指向培养容器中连续流加新鲜培养液,使微生物的液体培养物长期维持稳定,高速生长 状态的一种溢流培养技术,故又称开放培养。优点:高效;自控;产品质量较稳定;节约了大量动力,人力,水和蒸汽,且使水,气,电的负荷均衡合理。 39.试比较恒化器与恒浊器连续培养的不同。 答: 恒浊器是一种根据培养器内微生物的生长密度,并借光电控制系统来控制培养液流速,以获得菌体密度高,生长速度恒定的微生物细胞的连续培养器;与其相反,恒化器是一种设法使培养液流速保持不变,并使微生物始终在低于其最高生长速率的条件下进行生长繁殖额连续培养的装置。 40.根据微生物对温度的要求不同,可将
19、微生物分为哪几类? 答: 宽温微生 物,窄温微生物。 41.什么是最适 生长 温度和最适 生长 pH? 答: 42.根据微生物对氧的需求不同可将微生物分为哪几类? 了解图示。 43.什么是灭菌、消毒? 44.什么为抗代谢药物?磺胺类药物的作用机制是什么? 45.遗传变异的物质基础是什么?证明的著名实验有几个? 46.何谓基因突变?有哪几个共同特点? 答: 通过细胞表面受体介导的信号途径有下列四个步骤组成: 1,不同形式的胞外的信号刺激首先被细胞表面特异性受体所识别, 2,第一信使通过适当的分子开关机制实现信号的跨膜转导,产生细胞内第二信使, 3,信号放大 4,细胞启动反馈机制从而终止或降低细胞
20、反应。作用:维持生命活动的有序性。 47.证明基因突变的自发性和不对应性的实验有哪几个? (反过来如何?) 答: NO 通过扩散进入临近平滑肌细胞,激活具有鸟苷酸环化酶活性的 NO 受体,刺激声称第二信使 cGMP,而其作用是通过其依赖的蛋白激酶 G 的活化抑制肌动 肌球蛋白复合物通路,导致血管平滑肌舒张。 48.何谓 置换 、移码突变? 答: G 蛋白是三聚体 GTP 结合调节蛋白的简称。当配体与受体结合,三聚体 G蛋白解离,并发生 GDP 与 GTP 交换,游离的 Ga-GTP 处于活化的开启态,导致结合 并激活效应器蛋白,从而传递信号;当其水解形成 Ga-GDP 时,则处于失活的关闭态,
21、终止信号传递并导致三聚体 G 蛋白的重新组装,系统又恢复静息状态。 以 CAMP 为第二信使的信号通路,反映链:激素 -G 蛋白 O 连受体 -G蛋白 -腺苷酸环化酶 -CAMP-CAMP 依赖的蛋白激酶 -基因调控蛋白 -基因转录。 2, G 蛋白 O 连受体介导离子通道的调控。 10 激素 -G 蛋白 O 连受体 -G 蛋白 -质膜上的磷脂 C 的 B 异构体的活化-PIP2 水解成 IP3 和 DAG。 49.何谓光修复? 答: 把经 UV 照射后的微生物立即暴露于可见光下时,就可出现明显降低其死亡率的现象,此即光复活作用。 50.理解 诱变的育种的一般原则。 答: 1)选择简便有效的诱
22、变剂 2)挑选优良的出发菌株 3)处理单细胞或单孢子悬液 4)选用最适的诱变剂量 5)充分利用复合处理的协同效应 6)利用和创造形态、生理与产量间的相关指标 7)设计高效筛选方案 8)创造新型、高效筛选方法 51.何谓营养缺陷型?营养缺陷型筛选的主要步骤。 答: 野生型菌株经诱变剂处理后,由于发生了丧失某酶合成能力的突变,因而只能在加有该酶合成产物的培养基中才能生长,这类突变菌株称为营养缺陷型突变株,或简称营养缺陷型。 筛选步骤: 1)诱变剂处理 2)淘汰野生型 3)检出缺陷型 4)鉴定缺陷型 52.原核微生物与真核微生物各有哪些基因重组形式? ( 掌握其概念和了解一般过程。 ) 答: 原核:
23、 1)转化(受体菌直接吸收供体菌的 DNA 片段而获得后者部分遗传性状 的现象) 2)转导 (通过缺陷噬菌体的媒介,把供体细胞中的小片段 DNA 携带到受体细胞中,通过交换与整合,使后者获得前者部分遗传性状的现象) 3)接合(供体菌(雄性)通过性菌毛与受体菌(雌性)直接接触,把 F质粒或其携带的不同长度的核基因组片段传递给后者,使后者获得若干新遗传性状的现象) 真核: 1)有性杂交(一般指不同遗传型的两性细胞间发生的接合和随之进行的染色体重组,进而产生新遗传型后代的一种育种技术) 2)准性杂交(一种类似于有性生殖,但比它更为原始的两性生殖方式,这是一种在同种而不同 菌株的体细胞间发 生的融合,它可不借减数分裂而导致低频率基因重组并产生重组子)