1、本科毕业论文系列开题报告水产养殖饥饿和再投喂对黑魢消化器官组织学的影响一、选题的背景与意义1论文的选题背景黑鱾（GIRELLALEONINA）隶属于鲈形目、鱾科、鱾属，是一种岛礁性鱼类，适合人工养殖，在浙江南部以及福建、广东沿海利用其野生苗种已开展养殖。但其养殖技术缺乏科学指导，不利于黑鱾养殖规模的扩大。国内外对补偿生长的研究有大量的文献报道，但黑魢的相关研究尚未有人涉及。2选题的意义通过比较正常组与饥饿及恢复投喂组的黑魢消化器官组织结构的变化，从而探明饥饿对鱼体消化组织的损伤程度及恢复投喂以后的组织自我修复能力，为黑魢的补偿生长和节约饲料提高养殖生产效益提供理论依据。二、研究的基本内容与拟解
2、决的主要问题（一）研究的基本内容对所获得的正常组与饥饿及恢复投喂组的样品材料用常规的石蜡组织切片技术制作封片。观察肝脏、胃、肠道的组织学变化，并用目微尺测量胃上皮的高度，肠上皮的高度，肠直径和其皱襞高度。观察内容如下1胃上皮的高度、胃腺中的分泌颗粒数量的变化、纹状缘的变化及胃腺腔的变化。2肠直径的大小、皱皮高度的变化、纹状缘的排列变化，及各层结构的厚度变化。3肝细胞的大小变化、细胞界限是否明显、细胞内的分泌颗粒的数量变化、窦状间隙的变化。（二）拟解决的主要问题1活体取样的时间选择2如何制作出合格的切片，使其有可描述的组织变化3如何确定观察的组织结构，观察哪些变化三、研究的方法与技术路线（一）研
3、究的方法1饲养条件温度2526，盐度25。黑魢体重5G28G。将72尾鱼分成4组，对照组和三个处理组（饥饿5D、10D、15D），每组设置3个平行，每个平行饲养箱放6尾黑魢幼鱼。2对照组（不停食正常投喂）记为C，饥饿处理组5D、10D、15D分别记为A5、A10、A15，恢复投喂5天，记为A5F，A10F，A15F。3解剖获得正常和饥饿5D、10D、15D及再投喂5D后的黑魢幼鱼的肝脏和消化道组织。每组随机取34尾，4每次取样时同时称量鱼的体重，将鱼的胃、肠组织和肝脏组织用BOUINS液固定，常规石蜡切片，厚度为7M，取样时取较好的组织，制片时作45个片，以期看到有代表性的消化道组织变化。5结
4、果的分析OLYMPUS显微镜观察、拍照，在老师的指导下挑选到期望的组织变化和照片。（二）技术路线四、研究的总体安排与进度2010120103查询与论文有关的资料、熟悉基本的实验操作。实验室养殖黑魢，积累养殖经验。2010320104准备开题材料，并参加开题答辩20106201010开展实验，并取样固定。进行样品的固定201010201012对固定材料进行包埋切片及染色2011120113观察切片并拍照，写一篇2000字以上的综述并翻译两篇相关的外文文献。2011420115写好论文并修改，参加毕业论文答辩五、主要参考文献1BISBALGA,BENGTSONDADESCRIPTIONOFTHES
5、TARVINGCONDITIONINSUMMERFLOUNDER,PARALICHTHYSDENTATUS,EARLYLIFEHISTORYSTAGESJFISHBULL,1995,932172302陈雷,姜志强,吴丹饥饿和再投喂对漠斑牙鲆生化组成的影响J大连水产学院饥饿及再投喂对黑魢消化系统组织学的影响连续投喂的对照组取样饥饿5D对黑魢消化器官（胃、肠、肝）的影响饥饿10D对黑魢消化器官（胃、肠、肝）的影响饥饿15D对黑魢消化器官（胃、肠、肝）的影响恢复投喂5D后黑魢消化器官（胃、肠、肝）的变化恢复投喂5D后黑魢消化器官（胃、肠、肝）的变化恢复投喂5D后黑魢消化器官（胃、肠、肝）的变化连续投
6、喂的对照组取样作普通石蜡切片，封片并观察结果分析与论文写作学报,2009,013柴鹏,李吉方,吴蒙蒙,陈竟敏饥饿和再投喂对锦鲤幼鱼几种消化酶活性的影响J水利渔业,2007,044樊启学,程鹏,刘文奎饥饿和再投喂对翘嘴鲌幼鱼消化酶活性的影响J中国水产科学,2008,035韩强,胡先成,王艳饥饿和再投喂对鲈鱼稚鱼蛋白酶活力的影响J重庆师范大学学报自然科学版,2008,046姜志强,贾泽梅,韩延波美国红鱼继饥饿后的补偿生长及其机制J水产学报,2002,017楼宝,毛国民,陈雪昌浅谈鱼类的补偿生长COMPENSATORYGROWTHJ现代渔业信息,2006,038龙章强,彭士明,陈立侨,刘超,张伟,王
7、玥,叶金云饥饿与再投喂对黑鲷幼鱼体质量变化、生化组成及肝脏消化酶活性的影响J中国水产科学,2008,049李程琼,冯健,刘永坚,谭丽华,田丽霞,梁桂英奥尼罗非鱼多重周期饥饿后的补偿生长J中山大学学报自然科学版,2005,0410龙章强,彭士明,陈立侨,刘超,张伟,王玥,叶金云饥饿与再投喂对黑鲷幼鱼体质量变化、生化组成及肝脏消化酶活性的影响J中国水产科学,2008,0411李霞,姜志强,谭晓珍,等饥饿和再投喂对美国红鱼消化器官组织学的影响J中国水产科学,2002,9321121412侯凤霞,张健东,叶富良,陈刚,周晖,施刚,汤保贵饥饿和再投喂对尼罗罗非鱼蛋白酶活性的影响J广东海洋大学学报,200
8、7,0413马爱军,雷霁霖真鲷幼鱼消化道组织学研究J中国水产科学,1999,0214MADDOCKDM,BURTONMPMSOMEEFFECTSOFSTARVATIONONTHELIPIDANDSKELETALMUSLELAYERSOFTHEWINTERFLOUNDER,PLEURONECTESAMERICANUSJCANJZOOL,1994,721672167915钱周兴,徐永清,方一峰饥饿对鱼类的影响J生物学通报,2006,0616孙平,李亚珂补偿生长研究进展J科技创新导报,2008,0917宋昭彬,何学福饥饿对南方鲇仔稚鱼消化系统的形态和组织学影J水生生物学报,2000,318沈文英,林
9、浩然,张为民饥饿和再投喂对草鱼鱼种生物化学组成的影响J动物学报,1999,45440441219宋昭彬,何学福鱼类饥饿研究现状J动物学杂志,1998,0120沈文英,金叶飞,金俊,丁雪春饥饿和再投喂对白鲫生物化学组分的影响J绍兴文理学院学报,2002,0821吴立新,董双林水产动物继饥饿或营养不足后的补偿生长研究进展J应用生态学报,2000,0622王庆奎,姜志强,王静波,等饥饿和恢复投喂对牙鲆代谢的影响J大连水产学院学报,2004,19424825123王吉桥,毛连菊,姜静颖,等鲤、鲢、鳙、草鱼苗和鱼种饥饿致死时间的研究J大连水产学院学报,1993,82586524王岩,崔正贺鱼类补偿生长研
10、究中的几个问题J上海水产大学学报,2003,0325谢小军,邓利,张波饥饿对鱼类生理生态学影响的研究进展J水生生物学报,1998,2218118826谢小军,邓利,张波饥饿对鱼类生理生态学影响的研究进展J水生生物学报,1998,2218118827张波,谢小军南方鲇的饥饿代谢研究J海洋与湖沼,2000,31548048428张波,孙耀,唐启升饥饿对真鲷生长及生化组成的影响J水产学报,2000,03毕业论文文献综述水产养殖饥饿及再投喂对鱼类消化器官组织学的影响摘要我国对补偿生长的研究报道始于80年代，期间对超补偿生长，完全补偿生长等不同的4类补偿生长类型研究甚多。由于补偿生长在动物饲养中的重要作
11、用，它已成为当今动物养殖业研究的重要部分。针对水产动物补偿生长的研究较为广泛，涉及鱼类、贝类、甲壳类中的30多个种。在一些兽类中，补偿生长规律已被利用并获得一定的经济效益。通过比较饥饿和恢复投喂后消化器官结构的变化和鱼体生长情况,可以看出结构的恢复与补偿生长是一致的,结构达到或超过对照组,补偿生长才可发生。本文主要介绍和归纳了80年代至今的一些有关文献和研究进展及其研究的种类。关键词饥饿；再投喂；消化道；组织学；切片近年来，国内外许多学者对饥饿条件下鱼类生理生态学变化和能量代谢及其恢复进食后的生长现象进行了深入的研究，有关补偿生长的类型及其机理的研究也颇多，补偿生长是动物生长发育过程中由于暂时
12、性食物短缺导致的体重发育补偿，利用补偿生长理论投喂鱼类是一种科学的投喂方式。它能够提高饵料转化率、生态转化效率，降低饵料系数；可以防止鱼体肥胖，降低体脂，提升商品鱼的品质，还可以控制“性早熟”的发生。鱼类消化道组织学的变化与补偿生长是一致的，本文的写作是为了日后作关于黑魢消化道组织且片提供理论依据。1、饥饿再投喂及补偿生长在水产养殖中的研究在80年代国内首次报道了有关超补偿生长的研究，在1998年谢小军从量的角度将补偿生长分为4类（1）超补偿生长经过一段时间饥饿后再复食一段时间，鱼的体重增加超过相同时间连续喂食组鱼的体重增加量。如红鳟饥饿了3周后饱食3周，具有超补偿生长能力。（2）完全补偿生长
13、指饥饿后恢复生长的个体，其体重的增加量能达到或接近在相同时间内持续喂食组个体的增重量。南方鲇饥饿16D后饱食3周，具有完全补偿生长能力。（3）部分（有限）补偿生长指在饥饿后复食能正常生长，甚至生长速度在短期内有所加快，但体重增加不能赶上相同时间内持续喂食组。如杂交罗非鱼饥饿2周、4周后喂食至第8周，最终体重未能赶上对照组，只具有部分补偿生长能力。王岩等认为这是因为杂交罗非鱼的补偿生长能力较差或高温下饥饿引起的体重损失过大，或二者兼有。（4）不能补偿生长在恢复生长时不仅体重不能赶上持续喂食组，连生长速度也不及正常水平。如饥饿60D的南方鲇就不具备补偿能力。谢小军认为可能是饥饿处理已对鱼的生理状况
14、造成一定的危害。近年来，有关饥饿再投喂的水产研究种类已达30多种包括鱼类，贝类，甲壳类，其中海水鱼类的研究也渐渐多起来，例如美国虹鳟，日本黄姑鱼，真鲷等。2、饥饿再投喂对鱼类影响的研究现状21省内对黄姑鱼饥饿再投喂的研究最近的有关黄姑鱼的饥饿再投喂后消化道的研究并作切片的文献是07年楼宝等人的饥饿和再投喂对日本黄姑鱼代谢率和消化器官组织学的影响。文章得出黄姑鱼饥饿再投喂后消化道的形态变化是饥饿后，S5（饥饿5D）组变化较小。S10（饥饿10D）和S15（饥饿15D）组变化明显，胃体积缩小，壁变薄肠管萎缩,直径变小，肠系膜上脂肪减少肝脏体积缩小，颜色变淡胆囊变小，呈黄白色食道无明显变化。恢复投喂
15、后，S5组基本恢复到对照组水平，S10和S15组尚未恢复到对照组水平即发生了不完全补偿生长。消化器官组织结构的变化是（1）胃S0（对照组连续投喂）组的胃黏膜上皮为柱状细胞，细胞间界限明显，胃腺细胞中含有红色分泌颗粒，且腺细胞排列规整。饥饿后，S5组与对照组相比变化不大，胃腺细胞排列顺序出现杂乱，柱状上皮细胞高度略有减少；S10组上皮细胞界限不清，纹状缘不规则，胃腺细胞收缩，分泌颗粒减少。S15组上皮细胞结构不完整,胃腺杂乱，腺腔成缝状，分泌颗粒更少。恢复投喂后，S5组已恢复到了对照组水平，S10和S15组上皮细胞高度增加，界限清晰，但腺腔仍较小。（2）肠S0组的肠上皮为单层柱状细胞，游离端具有
16、排列整齐的纹状缘，细胞间夹有杯状细胞。饥饿后，S5组和S10组皱壁高度下降,纹状缘不完整；S15组纹状缘消失，个别的地方上皮脱落，组织结构模糊。再投喂后S15组肠直径、皱壁高度、上皮细胞高度均有所增加，但上皮细胞排列不整齐，纹状缘不明显；S5组和S10组纹状缘发达，皱壁和柱状细胞的高度与对照组相比无明显差异。（3）肝胰脏日本黄姑鱼的胰脏镶嵌在肝脏细胞内，胰脏内具有大量的颗粒细胞,S0组肝细胞内充满体积较大的脂质空泡，细胞核被挤到一侧，肝细胞为不规则的多边形,细胞界限明显。饥饿时，S5、S10和S15组程度不同地表现为肝组织致密，肝细胞体积缩小，脂质空泡数量减少,其内血细胞增多，排列不规则，细胞
17、内分泌颗粒减少，细胞界限不清晰。恢复投喂后，S5和S10组肝细胞明显增大，脂滴也增多，细胞界限明显，与对照组无差异；S15组恢复投喂后脂滴数量有所增加，但肝细胞排列比较杂乱。通过比较饥饿和恢复投喂后日本黄姑鱼消化器官结构的变化和生长状况,可以看出结构的恢复与生长是一致的。在恢复投喂实验结束时,S5组体重低于对照组,但高于S10组,S10组高于S15组S5组、S10组和S15组胃、肠和肝胰脏均有所恢复,S5组尚未恢复到对照组水平,S15组也有所恢复但未达到S10组的水平,S10组的恢复程度介于S5组和S15组之间。这说明消化器官的结构和功能是相辅相成,从组织学角度揭示了日本黄姑鱼补偿生长的机理。
18、22用石蜡切片方法观察和分析饥饿和再投喂对美国红鱼SCIAENOPSOCELLATUS消化器官形态结构和组织学的影响，是省外报道的这方面研究。研究表明美国红鱼饥饿后，胃、幽门盲囊、肠和肝胰腺发生程度不同的变化，而食道变化不明显。表现为腹腔内脂肪逐渐被吸收，肝细胞也由于脂滴数量的减少而体积缩小，整个肝胰腺切面非常致密，胰腺泡直径缩小。美国红鱼消化管的主要变化是肠直径缩小，皱襞的高度降低，柱状上皮细胞变小、脱落,纹状缘由不规则至消失；胃皱襞和上皮细胞变小，胃腺收缩，分泌颗粒减少。从恢复投喂后组织的恢复情况看，肝胰腺恢复最快，肠次之，然后是胃和幽门盲囊。肝胰腺和肠在体内具有重要的储存和吸收功能,两者
19、结构的恢复情况直接影响鱼的生理机能。再投喂过程中S5组肝胰腺和肠结构基本上恢复到对照组水平，尤其是肠直径已超过对照组，而胃和幽门盲囊不及对照组。S10和S15组恢复程度未达到对照组水平。文章还介绍到饥饿对美洲黄盖鲽PAMERICANU、犬齿牙鲆PARALICHTHYSDENTATUS、南方鲇等的消化器官组织的影响。有关饥饿引起消化器官变化的研究较多，但饥饿再投喂后恢复情况的报道较少，笔者认为这部分工作可从组织学角度揭示鱼补偿生长的机理。饥饿后消化器官不同程度的受到影响，投喂后，各器官有一恢复过程，此阶段结构的变化与饥饿时间、再投喂的时间有一定关系，尚需深入研究。3、海水鱼类的组织学和形态学研究
20、鱼类消化道对食物的消化和吸收是直接关系鱼类生长、发育乃至繁殖的重要生命活动，消化遭的组织学和形态学研究是认识和探讨鱼类摄食、消化及吸收生理机制的基础和途径之一。这方面的研究报道很多，对真鲷，鮃等经济鱼类的报道犹多，下面介绍真鲷的组织学和形态的研究。真鲷是我国重要的海水经济鱼类之一，具有很高的经济价值，并已广泛进行人工育苗和养殖。31食道食道组织分为三层粘膜层、肌肉层和浆膜层。粘膜层向食道腔突起形成许多纵行褶皱，其上有许多指状突起食道绒毛，上皮为复层上皮构成，表层为一层扁平细胞，其下为一层大而高的杯状细胞和其它粘液分泌细胞。由多层细胞构成。在食道绒毛的顶端及侧面常有突起的单层柱状上皮区域，细胞内
21、染色较深。距M观察，食道表层细胞由口咽腔部分的多边形、表面平坦具微褶脊的上皮细胞渐渐过度成为不规财形、表面微隆起的具微褶脊的上皮细胞。表面也可见许多杯状细胞开口及其分泌物颗粒。上皮下面为由致密结缔组织构成的周有膜，粘膜下层为疏橙结缔组织，较厚，两者延绵不断，分界不明显，肌肉层分内外两层，内层为纵肌，外层为环肌，两者均为横纹肌。32胃胃组织也由粘膜层、粘膜下层、肌肉层和浆膜层构成，粘膜层也形成许多褶皱，但比食道的平缓。上皮细胞表面较平滑无微褶，而且被纵横交错的小沟分隔成许多小区，在贲门部和盲囊部。各小区均有胃小凹分布，而在幽门部无胃小凹。从光镜切片观察，胃粘膜层上皮与食道的不同，为典型的单层柱状
22、上皮，核位于细胞基部。胃腺为单盲囊状腺，与胃粘膜表面呈垂直方向作平行排列偶有弯曲或分支。每一胃腺为由周有膜向上伸出的网状纤维所包围；从胃腺横切面看，各胃腺直径大小近似，每一腺管管壁均由排列较规财的数个腺细胞组成，中间为管腔。腺细胞为柱状细胞内充满着色较深的酶元颗粒，核多为圆形。粘膜层下连粘膜下层。胃肌肉层发达，内层为环肌，外层为纵肌，与食道肌肉层构成正相反，肌肉由平滑肌构成。幽门环肌明显加厚括约肌。33小肠小肠组织同样由粘膜层及其下层、肌肉层和浆膜层构成。粘膜层形成非常丰富的褶皱小肠绒毛，小肠绒毛常常有分支。上皮由单层柱状上皮细胞组成，排列紧密；其问也散布较多杯状细胞，上皮细胞游离面具明显的纹
23、状缘，即丰富的微绒毛。与胃上皮细胞不同的是，小肠上皮细胞质染色较深，表明它台有较多的酶类物质。上皮细胞呈多角形，表面布满微绒毛，细胞之间微绒毛少，细胞界限清楚，上皮表面可见较多的杯状细胞。对于水产动物的补偿生长研究还需完善，每种鱼类都有不同的生理组织，例如一些鱼没有胃或者胃的结构不同，海水种淡水中又有差异等等，总的来说这方面的研究存在的问题大致有（1）研究的方法有些有待改进（2）每个种的饥饿时间还有待发现和调整（3）这类的研究资料并不丰富（4）研究成果的商业化应用也需探求。希望这方面的研究可以向分子水平发展，联系多学科从多角度来研究。参考文献1孙平,李亚珂补偿生长研究进展J科技创新导报,200
24、8,092吴立新,董双林水产动物继饥饿或营养不足后的补偿生长研究进展J应用生态学报,2000,063姜志强,贾泽梅,韩延波美国红鱼继饥饿后的补偿生长及其机制J水产学报,2002,014李霞,姜志强,谭晓珍,等饥饿和再投喂对美国红鱼消化器官组织学的影响J中国水产科学,2002,932112145谢小军,邓利,张波饥饿对鱼类生理生态学影响的研究进展J水生生物学报,1998,221811886宋昭彬,何学福饥饿对南方鲇仔稚鱼消化系统的形态和组织学影J水生生物学报,2000,37张波,谢小军南方鲇的饥饿代谢研究J海洋与湖沼,2000,3154804848王庆奎,姜志强,王静波,等饥饿和恢复投喂对牙鲆代
25、谢的影响J大连水产学院学报,2004,1942482519谢小军,邓利,张波饥饿对鱼类生理生态学影响的研究进展J水生生物学报,1998,2218118810王吉桥,毛连菊,姜静颖等鲤、鲢、鳙、草鱼苗和鱼种饥饿致死时间的研究J大连水产学院学报,1993,82586511沈文英,林浩然,张为民饥饿和再投喂对草鱼鱼种生物化学组成的影响J动物学报,1999,45440441212宋昭彬,何学福鱼类饥饿研究现状J动物学杂志,1998,0113王岩,崔正贺鱼类补偿生长研究中的几个问题J上海水产大学学报,2003,0314楼宝,毛国民,陈雪昌浅谈鱼类的补偿生长COMPENSATORYGROWTHJ现代渔业信
26、息,2006,0315钱周兴,徐永清,方一峰饥饿对鱼类的影响J生物学通报,2006,0616龙章强,彭士明,陈立侨等饥饿与再投喂对黑鲷幼鱼体质量变化、生化组成及肝脏消化酶活性的影响J中国水产科学,2008,0417柴鹏,李吉方,吴蒙蒙等饥饿和再投喂对锦鲤幼鱼几种消化酶活性的影响J水利渔业,2007,0418樊启学,程鹏,刘文奎饥饿和再投喂对翘嘴鲌幼鱼消化酶活性的影响J中国水产科学,2008,0319陈雷,姜志强,吴丹饥饿和再投喂对漠斑牙鲆生化组成的影响J大连水产学院学报,2009,0120李程琼,冯健,刘永坚等奥尼罗非鱼多重周期饥饿后的补偿生长J中山大学学报自然科学版,2005,0421侯凤霞
27、,张健东,叶富良等饥饿和再投喂对尼罗罗非鱼蛋白酶活性的影响J广东海洋大学学报,2007,0422韩强,胡先成,王艳饥饿和再投喂对鲈鱼稚鱼蛋白酶活力的影响J重庆师范大学学报自然科学版,2008,0423龙章强,彭士明,陈立侨等饥饿与再投喂对黑鲷幼鱼体质量变化、生化组成及肝脏消化酶活性的影响J中国水产科学,2008,0424张波,孙耀,唐启升饥饿对真鲷生长及生化组成的影响J水产学报,2000,0325沈文英,金叶飞,金俊等饥饿和再投喂对白鲫生物化学组分的影响J绍兴文理学院学报,2002,0826马爱军,雷霁霖真鲷幼鱼消化道组织学研究J中国水产科学,1999,02本科毕业设计（20_届）饥饿和再投喂
28、对黑魢消化道组织学的影响目录1引言152材料与方法1621材料1622实验条件1623实验设计1624实验方法1625数据处理及统计163结果1631不同饥饿时间下黑鱾幼鱼的体重变化1632饥饿及再投喂后消化器官形态和组织学结构的变化17321胃17322肠18323肝194讨论1941饥饿后消化器官组织结构1942再投喂的组织修复过程及意义2043黒鱾消化器官组织学变化与补偿生长20致谢错误未定义书签。参考文献25摘要用石蜡切片方法观察和分析了饥饿和再投喂对黒鱾（GIRELLALEONINE）幼鱼2160G10G的消化器官形态结构和组织学的影响。形态结构结果显示饥饿与再投喂前后食道变化不明显
29、,而饥饿10、15D的实验鱼胃壁变薄,幽门盲囊变小,肠管收缩,呈透明状,肝胰腺萎缩；从组织结构看,食道无明显变化。饥饿时间不同,各组织受损害和恢复程度也不同。饥饿5D的实验鱼与对照组基本无异而饥饿10D、15D后消化器官组织变化较明显皱襞和上皮细胞高度均减少,分泌颗粒减少。胃腺细胞收缩,结构不完整幽门盲囊长度和直径变小肠直径变小,微绒毛退化肝组织致密,肝细胞内脂滴减少,体积缩小胰腺泡缩小,排列不规则。再投喂后，各主要结构均有所恢复,有些恢复到饥饿前水平,但大部分未能达到。研究表明饥饿5D的实验组体重在恢复投喂后可以恢复甚至超过对照组的体重，而饥饿10D和15D的不能恢复到对照组水平。肝组织细胞
30、在饥饿后的变化在10D和15D变化非常明显具体为细胞轮廓变得不清晰，细胞间隙变大，细胞核变小变明显肠在饥饿前后的主要变化是肠壁的厚度和肠细胞的高度，胃的主要变化在胃壁细胞的高度和胃内褶。关键词黒鱾；饥饿和再投喂；消化道组织ABSTRACTTHEYOUNGGIRELLALEONINEWEREEMPLOYED,BODYWEIGHT216010G,TOCONDUCTA20DAYPERIODEXPERIMENTTHEFISHESWERESTARVEDFOR0CONTROL,5DA5,10DA10AND15DA15,RESPECTIVELY,ANDTHENREEFEDFOR30D,25D,20DAND1
31、5DTHEMORPHOLOGYRESEARCHSHOWSTHATTHEREARENOOBVIOUSDIFFERENCESINALIMENTARYCANALBEFOREANDAFTERSTARVATIONFORTHEFISHSTARVEDFOR10DAND15DA10,A15,THESTOMACHWALLDECREASESINHEIGHTTHEPYLORICCAECUMARESHORTERANDTHINNERTHEGUTISSHRUNKENANDHYALINE,ANDTHEHEPATOPANCREASISATROPHIEDANDTURMERICCOLORTHEHISTOLOGYRESULTSSH
32、OWTHATTHEEFFECTSONLOGICALEXCEPTALIMENTARYCANALAREDIFFERENTWITHSTARVATIONTIMEA5AREASWELLASTHECONTROL,BUTA10ANDA15AREOBVIOUSLYDIFFERENTTHATTHEHEIGHTSOFTHEEPITHELIALCELLS,THERUGAE,THELIPIDINHEPATOPANCREASANDSECRETARYGRANULESALLDECREASETHEGASTRICGLANDCELLSARESHRUNKEDTHELENGTHANDDIAMETERINPYLORICCAEUMARE
33、SHORTERANDTHINNERTHEDIAMETERININTESTINEISTHINNERANDTHEMICROVILLIDETERIORATETHEHEPATICCELLSARESHRINKAGETHEACINUSOFPANCREASAREALSOSHRINKAGE,ANDTHESTRUCTUREOFGLANDLOOKSNORMALAFTERTHEREFEEDING,LOTSOFTISSUESRECOVERINSOMEDEGREE,BUTTHEMOSTCANNOTREACHTHENORMALLEVELRESEARCHSHOWSTHATHUNGER5DAYSOFTHEWEIGHTISIN
34、RECOVERYAFTERFEEDCANRECOVEREVENTHANTHECONTROLGROUPWEIGHT,ANDHUNGER10DAYSOF15DAYSCANNOTRESUMETOTHECONTROLGROUPLEVELLIVERTISSUECELLSINTHECHANGEINHUNGER10DAYSAFTER15DAYSCHANGEVERYOBVIOUSSPECIFICFORCELLCONTOURBECOMEUNCLEARANDINTERCELLULARGREATEN,SMALLERTOBECOMECLEARINTHENUCLEUSJIBOWELHUNGEROBSERVATIONBL
35、ACKWHENCHANGEDBEFOREANDAFTERTHETHICKNESSANDBOWELMAINLYDEPENDSONTHEHEIGHTOFINTESTINALCELLSTHEMAINCHANGEINTHESTOMACHANDTHESTOMACHWALLCELLSALTITUDECHANGEWITHINTHEPLAITOFCHANGEKEYWORDSGIRELLALEONINESTARVATIONANDREFEEDINGDIGESTIVESYSTEM1引言鱼类消化道对食物的消化和吸收是直接关系鱼类生长、发育乃至繁殖的重要生命活动，消化道的组织学和形态学研究是认识和探讨鱼类摄食、消化及吸
36、收生理机制的基础和途径之一。这方面的研究报道很多，对真鲷（PAGROSOMUSMAJOR）26、牙鮃（PARALICHTHYSLETHOSTIGMA）5等经济鱼类的报道犹多，黒鱾的相关报道比较少。马爱军、雷霁霖26对真鲷幼鱼消化道组织学研究提供了鱼类消化道组织学研究的依据。文献阐述了6个月大真鲷的组织学特点。鱼类的食道组织分为三层粘膜层、肌肉层和浆膜层。粘膜层向食道腔突起形成许多纵行褶皱，其上有许多指状突起食道绒毛，上皮为复层上皮构成，表层为一层扁平细胞，其下为一层大而高的杯状细胞和其它粘液分泌细胞。由多层细胞构成。在食道绒毛的顶端及侧面常有突起的单层柱状上皮区域，细胞内染色较深。胃组织可分四
37、层，由粘膜层、粘膜下层、肌肉层和浆膜层构成，粘膜层也形成许多褶皱，但比食道的平缓。上皮细胞表面较平滑无微褶，而且被纵横交错的小沟分隔成许多小区，在贲门部和盲囊部。各小区均有胃小凹分布，而在幽门部无胃小凹。从光镜切片观察，胃粘膜层上皮与食道的不同，为典型的单层柱状上皮，核位于细胞基部。胃腺为单盲囊状腺，与胃粘膜表面呈垂直方向作平行排列。小肠组织同样由粘膜层及其下层、肌肉层和浆膜层构成。粘膜层形成非常丰富的褶皱小肠绒毛，小肠绒毛常常有分支。上皮由单层柱状上皮细胞组成，排列紧密；其问也散布较多杯状细胞，上皮细胞游离面具明显的纹状缘，即丰富的微绒毛。与胃上皮细胞不同的是，小肠上皮细胞质染色较深，表明它
38、台有较多的酶类物质。上皮细胞呈多角形，表面布满微绒毛，细胞之间微绒毛少，细胞界限清楚，上皮表面可见较多的杯状细胞。利用补偿生长理论投喂鱼类是一种科学的投喂方式，它能够提高饵料转化率、生态转化效率，降低饵料系数；可以防止鱼体肥胖，降低体脂，提升商品鱼的品质，还可以控制“性早熟”的发生。鱼类消化道组织学的变化与补偿生长有着内在的联系。饥饿和再投喂对鱼类生长、生化组成、繁殖的影响，国内外已有许多学者做过研究，对消化器官组织学的影响在大西洋鲱CLUPEAHARENGUS28、鲽PLEURONECTESPLATESSA9、虹鳟SALMOGAIRDNERI11、南方鲇SILURUSMERIDIONALIS
39、5和美国红鱼（SCIAENOPSOCELLATUS）1等见过报道。黑鱾（GIRELLALEONINA）隶属于鲈形目、鱾科、鱾属，是一种岛礁性鱼类，适合人工养殖，在浙江南部以及福建、广东沿海利用其野生苗种已开展养殖。但其养殖技术缺乏科学指导，不利于黑鱾养殖规模的扩大。迄今，国外对黑鱾的研究主要集中于黑鱾的分类鉴定、种的命名、野生黑鱾的食性等方面，如NAOKIYAGISHITANAOKIETAL,2003报道了饲养黑鱾的进化趋势，SHIROITOISHIROETAL,2006研究了两种鱾鱼的物种形成过程；国内仅见姚善成1998对黑鱾种群和地理变异的研究、陈舜2008对黑鱾网箱养殖的研究及孙敏200
40、9对黑鱾血液生理和消化酶活力的研究。黒鱾的消化系统分为消化管和消化腺两部分。消化管主要包括食道、胃、幽门盲囊和肠,食道与胃分界明显，胃为卜型,胃壁较厚,有褶皱突向管腔；肠具有弹性。消化腺分为肝胰腺和胰腺。本课题只取了胃、肝、肠三种组织做研究对象，研究了黒鱾（GIRELLALEONINE）在不同饥饿时间和恢复再投喂5天后黒鱾的体重及肝、肠、胃消化器官组织结构的变化和恢复情况，旨在为黑鱾的补偿生长研究提供组织学依据。2材料与方法21材料实验用黑鱾幼鱼为野生鱼苗，取自平阳县南麂岛自然保护区，共100余尾。运回实验室后在500L饲养槽内暂养2周。每天投饵2次，待摄食和生长正常后，于2009年9月开始实
41、验。22实验条件实验在循环流水养鱼系统中进行，实验用水为经沉淀和砂滤后的自然海水，盐度2505，温度控制在2205，光照250LX350LX，PH不低于78。投喂的饲料为“神彩牌”浮性颗粒饲料，粒径65256M，平均粒重201012MG，蛋白质含量40。投食后1H收集残饵。取经驯化后的健康幼鱼72尾，平均体重为（2141096）G，随机放入12个体积为15L的长方形塑料水槽内，每槽6尾。在实验条件下适应15D后开始实验。投饵时间为每天的700和1700。23实验设计实验设一个对照组和3个饥饿处理组，每一处理组3个平行，每一平行6尾鱼。对照组（A0）连续投喂20D；饥饿处理组（A5、A10、A1
42、5）分别为持续饥饿5D、10D、15D，恢复投喂后5D，分别记为A5F、A10F、A15F，总实验天数为20D。24实验方法实验开始时、饥饿结束以及恢复投喂5D后分别测量各组鱼体重，每组随机取35尾，活体解剖分别取肝脏、肠道、胃，并称量肝重和空壳重。用BOUINS液固定，常规石蜡切片，伊红美兰染色，常规石蜡切片，厚度为7UM，每组取4到5个片，OLYMPUSBX51显微镜观察、拍照，用目微尺测量胃上皮细胞高度，肠直径、肠上皮细胞高度。25数据处理及统计饥饿和再投喂过程中比肝重的计算公式为比肝重100肝脏重量/空壳体重。胃上皮细胞高度、肠直径、肠上皮细胞高度等测量数据用SPSS统计处理，以P00
43、5作为差异显著水平。3结果31不同饥饿时间下黑鱾幼鱼的体重变化在实验开始时、饥饿结束以及恢复投喂5D后分别测量各组鱼体重，结果见表1、图1，由表1可见饥饿后A5、A10和A15体重不同程度的下降，其中恢复投喂后A5组恢复的最快而且生长速度超过对照组，A10和A15也有所恢复但没有恢复到对照组水平，由图1可知饥饿过程中A5、A10和A15体重的损耗速度依次降低而恢复投喂后体重的增长速度依次升高且都超过对照组，但并没有持续很久只有A5恢复到对照组水平。表1饥饿及恢复投喂后黑鱾幼鱼体重的变化TABLE1WEIGHTCHANGESBEFOREANDAFTERTHEEXPERIMENT组别GROUP饥饿
44、前体重（G）BODYWEIGHTBEFORESTARVATION饥饿后体重（G）BODYWEIGHTAFTERSTARVATION恢复投喂5D后体重（G）BODYWEIGHTAFTERRECOVERYFEEDINGA02137078A5213910420360992633105A10214311419861052302114A1521481131941102229811617192123252729051015202530实验时间（D）体重（G）A0A5A10A15图1黑鱾幼鱼在饥饿及恢复生长后体重的变化FIG1THECHANGEOFWETBODYWEIGHTOFGIRELLALEONINAD
45、URINGSTARVATIONANDAFTERRECOVERYGROWTH32饥饿及再投喂后消化器官形态和组织学结构的变化321胃对照组及饥饿处理后3组的胃组织结构变化见图版。上皮细胞高度见表2。从胃组织结构上看，A0组胃上皮为单层柱状细胞，胃腺细胞中含有深紫色（美兰的染色效果）的分泌颗粒图版1。饥饿后胃形态结构均有不同程度的变化，主要表现在胃体积变小，胃壁变薄，胃内褶高度变低。5D饥饿后，A5组上皮细胞高度下降，下降到4638UM，没有对照组水平（表2）；A10组上皮细胞界限不清，纹状缘不规则，胃腺细胞收缩，分泌颗粒减少（图版3、表2）。A15组上皮细胞结构不完整，胃腺杂乱，腺腔成缝状，分泌
46、颗粒更少图版4、表2。投喂后，A15F组上皮细胞高度增加，由2700UM增加到3956UM，但与对照组相差甚远，界限清晰，胃腺内分泌颗粒增多（表2），但腺腔仍较小（图版7）；A10F组上皮高度增加，腺泡结构基本完整图版6、表2。A5F组基本同对照组水平图版5。表2饥饿和再投喂后胃结构的变化TABLE2CHANGESOFSTOMACHAFTERSTARVATIONANDREFEEDING分组GROUP分泌颗粒数量AMOUNTOFSECRETARYGRANULE上皮细胞高度/MHEIGHTOFEPITHELIAA0多4915A5多4638A10较多3826A15少2700A5F多4921A10F较
47、多4242A15F较多3956322肠对照组及饥饿后肠的变化及再投喂后肠的恢复情况见图版，肠直径、肠上皮高度见表3。A0组肠上皮为单层柱状细胞，游离端具排列整齐的纹状缘，细胞间夹有数量较多的杯状细胞图版1。饥饿后，表现为肠直径变小，皱襞高度下降（表3），纹状缘结构不完整，A5和A10（图版2和图版3）A15组纹状缘消失，个别地方上皮脱落图版4。再投喂后，A15组肠直径、皱襞高度、上皮细胞高度均有所增加（表2），但上皮细胞排列不整齐，纹状缘不明显。A5组肠直径大于对照组，纹状缘发达，皱襞和柱状细胞的高度接近和大于对照组图版6。A10组肠变化介于A5和A15之间，恢复水平接近对照组。表3饥饿和再投
48、喂后肠结构的变化TABLE3CHANGESOFINTESTINEAFTERSTARVATIONANDREFEEDING分组GROUP肠直径/CMDIAMETEROFINTESTINE上皮细胞高度/MHEIGHTOFEPITHELIAA00484989A50424872A100384156A150333825A5F0505021A10F0544563A15F0394282323肝饥饿后肝组织的变化及再投喂后肝的恢复情况见图版，肝比重和分泌颗粒数量变化见表4。A0组肝胰腺由肝组织和胰腺泡组成，肝细胞内充满体积较大的脂质空泡，细胞核被挤到一侧，细胞索之间有窦状隙图版1。胰腺泡不均匀分布在肝组织中，细
49、胞含有嗜酸性的酶原颗粒。饥饿时，A5、A10（图版2和图版3）和A15组程度不同地表现为肝组织致密，肝细胞体积缩小，脂质空泡数量减少，窦状隙明显，其内血细胞增多，胰腺泡缩小，排列不规则，细胞内的分泌颗粒减少，A15尤其明显图版4。投喂后，A15组肝细胞中脂滴数量有所增加，但胰腺泡比较致密，且排列较杂乱（图版7）。A10组肝细胞明显增大，脂滴也增大、增多，细胞界限比较清晰，大多数胰腺泡比较松散图版6。A5组肝细胞排列整齐，胰腺泡为锥体形，腺泡结构完整，同对照组图版5。表4饥饿和再投喂后比肝重和肝脏结构变化TABLE4CHANGESOFHEPATOPANCREASAFTERSTARVATIONANDREFEEDING分组GROUP肝质量比/LIVER/EMPTYBODYWEIGHT分泌颗粒数量AMOUNTOFSECRETARYGRANULEA0145040较多A5124032较多A10078015少A15076011少A5F172006较多续表4A10F150033较多A15F200025较多4讨论41饥饿后消化器官组织结构饥饿后黒鱾的干胰脏、胃、肠都发生了不同程度的变化，表现为胃体积变小、胃消化酶颗粒分泌减少，肠壁变薄，肝细胞变小细胞间隙变大。这些变化分别与犬齿
