1、坐骨神经-腓肠肌标本制备 Preparation of Sciatic Nerve-Gastrocnemius Muscle Specimen,谈智Department of Physiology,生理学实验课的目的Purpose of this Course,验证和巩固生理学的基本理论了解获得生理学知识的科学方法掌握生理学实验的基本操作技术培养严肃的态度、严格的要求、严密的方法培养对事物观察、分析、综合的能力，独立思考解决问题的能力以及创新的精神和创新的能力,实验课的要求Requirements of this Course,实验前: 预习教材并积极思考实验中：仔细观察并动手操作；爱护仪器器
2、械和实验动物 实验后：保持卫生清洁，写好实验报告并可进入论坛讨论,实验报告的一般格式The Format of Experimental Reports,姓名、班级、组别 (Name, class & group)实验题目、日期 (Title & Date)实验目的、原理 (Purpose & Principle) 实验对象 (Subject)实验器材和实验方法 (Materials & Methods)实验结果 (Results)讨论 (Discussion)结论 (Conclusion),撰写实验报告或在以后的科研论文中如何区分结果、讨论、结论： 1、结果:结果是实验产生的纯客观的描述，多
3、以图表、数据形式进行表述。 2、讨论:对实验结果进行理论上的分析和论证对本实验研究方法的科学性和局限性的探讨提出可供深入研究的问题，或本实验尚待进一步解决的问题对未来研究及如何推广研究提出建议。,3、结论：结论呈现的是研究中的客观事实，应是基本肯定的，也可以是否定的，并可以在相同背景下重复出现；它是对研究工作的一个小结，交代所研究的问题，所获得的结论以及解决问题所达到的程度，还可以对今后的研究指出方向，提出新的课题。,坐骨神经-腓肠肌标本制备 Preparation of Sciatic Nerve - Gastrocnemius Muscle Specimen,1、熟悉并掌握蟾蜍或蛙坐骨神经
4、腓肠肌标本的制备方法2、熟悉并掌握生理学实验常用器械的使用和基本操作技术,实验目的 (Purpose),实验原理 (Principle),为什么要做这个实验？,在生理学实验中常利用蛙的坐骨神经-腓肠肌标本研究神经、肌肉的兴奋、兴奋性；刺激与反应的规律和肌肉收缩的特征等，制备坐骨神经腓肠肌标本是生理学实验的一项基本操作技术。,为什么实验动物选蟾蜍？,两栖动物一些基本生命活动和生理机能与温血动物近似，而其离体组织、器官保持活性所需的条件比较简单，易于控制和掌握，所以生理实验中常选择蟾蜍或青蛙的离体组织或器官作为实验标本。,怎样保持离体器官的活性？,任氏液是种比较接近两栖动物内环境的液体，可以用来延
5、长青蛙心脏在体外跳动时间、保持两栖类其他离体组织器官生理活性等,实验对象 (Subject): 蟾蜍或蛙 Toad or Frog,实验药品(Drug):任氏液(Ringers solution),原 液 成 分 :20%NaCl(ml) 32.5 10%KCl(ml) 1.4 10%CaCl2(ml) 1.25%NaHCO3(ml) 4.0 1% NaH2PO4(ml) 1.0C6H12O6(g) 2.0 (可不加,为什么？) H2O加至(ml) 1000,实验器械 (Tools),毁髓针：用于破坏蛙的脑和脊髓，怎么破坏？-视频剪刀：普通剪刀用于剪皮肤、肌肉和骨等粗硬组织；细剪刀或眼科剪刀用
6、于剪神经血管和心包膜等细软组织；禁用眼科剪刀剪皮肤、肌肉或其他粗硬物 镊子：圆头镊子对组织损伤较小，用于夹捏组织和牵提切口；有齿镊子用于夹捏骨头和剥脱蛙皮；眼科镊子有直弯两种，用于分离神经、血管和夹捏细软组织，切不可用镊子直接夹捏或牵提神经血管，为什么？,玻璃分针：用于分离血管神经等组织，不可用力过猛以防折断蛙板：用于固定蛙类，以便进行解剖和实验锌铜弓：用于对标本施加刺激，以检查其兴奋性，锌铜弓的原理？,实验器械 (Tools),锌铜弓用金属锌和铜铆接而成，锌铜弓在极性溶液中形成回路时，锌与铜两极产生约0.50.7V的直流电压，因此可用来刺激神经和肌肉，使神经或肌肉兴奋。这种刺激仅在锌铜弓与神
7、经或肌肉接触瞬间产生，持续接触不能使神经或肌肉兴奋,为什么？,锌铜弓原理简介：,金属与溶液之间便产生了电位差电极电位。如果将Zn和Cu一端接触，则在接触部位电流由Cu向Zn方向流动；而在溶液中则相反，由Zn向Cu流动。当锌铜弓接触组织时（注意：表面必须湿润），电流便沿Zn可兴奋组织Cu方向流动，而产生流动作用。这样，锌铜弓好像一个电池，Zn如同其阳极，Cu好像阴极而发挥作用。神经或肌肉的电刺激阈值非常小，所以仅用锌铜弓接触，即可构成刺激，以便检验组织的机能活性。,Cu和Zn外部电子分布可以由上页第一段解释，内部怎么理解？,实验方法 (Methods)视频,捣毁蟾蜍脑、脊髓 小心毒液，双毁髓时应
8、注意使蟾蜍头部前俯，防止耳后腺分泌物射入实验者眼内，如被射入，应立即用生理盐水冲洗眼睛。剪除蟾蜍躯干上部、内脏剥皮,剥皮后蛙的后肢：,分离两腿，制作坐骨神经腓肠肌标本,1、 分离两腿 (separate the two legs) 2、 游离结扎腓肠肌 (dissociate & ligaturethe Gastrocnemius) 3、 游离坐骨神经 (dissociate the sciatic nerve) 4、 游离、剪断股骨 (free & cut the thigh bone) 5、 剪断膝关节 (cut the knee joint),完成制作, 用锌铜弓检查标本兴奋性 Check the excitability of the specimen,注意事项（Attention）,1、小心毒液，双毁髓时应注意使蟾蜍头部前俯，防止耳后腺分泌物射入实验者眼内，如被射入，应立即用生理盐水冲洗眼睛。 2、正规操作，合理利用器械3、注意湿润标本4、分离神经要用玻璃分针，避免用金属或手接触神经，或夹伤神经.5、股骨头不可剪太短，否则无法固定,谢谢！,
