1、本科毕业论文系列开题报告生物技术褶皱臂尾轮虫对2种赤潮微藻摄食的研究一、选题的背景与意义褶皱臂尾轮虫BRACHIONUSPLICATILIS属轮虫动物门，单生殖巢纲，游泳目，褶皱轮虫科，臂尾轮虫属以下简称轮虫，是多种海产经济动物幼体理想的开口饵料。轮虫的适应能力强，生长快，繁殖迅速，营养丰富，大小适口，体内含有粗蛋白达6070，而且活体轮虫不会造成水质污染，因此近十多年来，以轮虫作为鱼虾蟹幼体开口饵料的人工育苗技术已普遍受到人们的重视，因此能否持续生产轮虫，已成为水产动物种苗生产不可短缺的环节。此外，轮虫不仅在水域生态系统结构和功能上具有重要意义、对水产养殖有重要饵料学价值，而且在世界范围内还
2、可作为环境监测和生态毒理学研究受试生物。从20世纪90年代开始，日本进行轮虫工厂化连续培养技术的研究，并已取得初步成果。1980年以来，我国在轮虫的培养技术方面虽然已有过研究，但直到近几年这些研究才得到进一步加强，这对指导轮虫培养生产将起到重要的作用。目前，国内外对轮虫的研究主要都集中在培养技术、饵料生物的饵料效果、急性毒性实验、种群数量和实验种群动态等方面，而对轮虫基础摄食的研究却较少。本文以养殖生产中常用、又易于大量培养、且为典型滤食性的褶皱臂尾轮虫为实验材料，旨在研究不同浓度2种赤潮微藻对其摄食的影响，以及光照和温度对褶皱臂尾轮虫对2种赤潮微藻摄食的影响，以期揭示食物种类和浓度对浮游动物
3、摄食的影响机制，为赤潮微藻和浮游动物关系的研究提供有价值的参考资料。二、研究的基本内容1、褶皱臂尾轮虫对2种赤潮微藻的摄食率和滤水率；2、光照对褶皱臂尾轮虫对2种赤潮微藻摄食的影响；3、温度对褶皱臂尾轮虫对2种赤潮微藻摄食的影响；4、建立一套有效地培养浮游动物微藻的混合培养体系。三、研究的方法与技术路线（一）研究方法1、利用饵料浓度差减法（BATCHCULTUREFEEDINGEXPERIMENT）测定褶皱臂尾轮虫对2种赤潮微藻的摄食率，采用计数框于显微镜下对藻细胞进行计数，按照FROST（1972）公式CRV/NLNCTLNCTF/T、IRCRCTFC0/LNCTFLNC0计算褶皱臂尾轮虫的
4、虑水率CR和摄食率IR。2、在预实验基础上，设置不同的温度和光照梯度，研究褶皱臂尾轮虫对赤潮微藻的滤水率CR和摄食率IR。3、褶皱臂尾轮虫对2种赤潮微藻种群增长率的影响采用公式R（LNNTLNN0）/T来计算种群增长率。（二）技术路线三、研究的总体安排与进度2010年9月到2010年10月查阅文献、资料，准备实验中要用的材料和仪器。2010年11月到2011年2月进行实验和外文文献的翻译。2011年3月到2011年4月完成毕业论文。2011年5月接种藻轮虫饥饿24H计数轮虫、计算V轮虫计数藻细胞、V母液配制藻液黑暗培养24H计算CR、IR计数藻细胞准备毕业论文答辩。四、主要参考文献1张美如,万
5、夕和日本轮虫培养技术的现状与展望J科学养鱼,2004858592王堉褶皱臂尾轮虫繁殖培养的研究J海洋水产研究,1980127453张道南,白莉平,张毅,等利用啤酒酵母活菌株培养褶皱臂尾轮虫的研究J水产学报,1982,721131234田景波,孙广德,张庆文不同饵料对褶皱臂尾轮虫种群生长繁殖的影响J中国水产科学,1982,721131235王金秋,李德尚,董双林面包酵母添加光合细菌和VC后培养轮虫的效果J水产科学情报,1999,26125276李元广,许璞,魏万权,等轮虫培养过程中生长及环境变化特征分析J水平养殖,2000323267曾国权,褶皱臂尾轮虫室内高密度技术培养技术J科学养育,1998
6、436378廖永岩褶皱臂尾轮虫室内高密度培养及在远海梭子蟹育苗中的运用J海洋科学,2003,27468719王金秋,李德尚,曹吉祥5种藻和2种酵母对萼花臂尾轮虫饵料效果的比较研究J水生生物学报,2003,27547648610张才学,郑文凯,林玉凤,等4种金属离子及其混合液对壶状臂尾轮虫的急性毒性试验J湛江海洋大学学报,2005,251565911冯蕾,肖慧,王仁君,等两种海水轮虫对UVB辐射敏感性的比较J海洋环境科学,2006,253252812王丽平,颜天,谭志军,等塔玛亚历山大藻和东海原甲藻对褶皱臂尾轮虫种群数量的影响J应用生态学报,2003,1471151115513韩红蕾,冯蕾,李鑫
7、,等UVB辐射增强对褶皱臂尾轮虫种群增殖的影响J海洋环境科学,2007,26653053314徐晓平,席贻龙,储昭霞,等溴氰菊酯对萼花臂尾轮虫实验种群动态的影响J动物学报,2005,51225125615冯蕾,肖慧,孟祥红,等UVB辐射增强对褶皱臂尾轮虫实验种群动态的影响J武汉大学学报理学版,2006,52222522916冯蕾,韩红蕾,唐学玺UVB辐射增强对褶皱臂尾轮虫摄食的影响J海洋环境科学,2007,26322923117王小东,孙军,刘东艳,等海洋中型浮游动物的选择性摄食对浮游植物群落的控制J海洋科学进展,2005,23452553518王学峰,李纯厚,等微型浮游动物摄食生态学研究进展
8、J南方水产,2005,15707619周明江,朱明远中国赤潮的发生趋势和研究进展J生命科学,2001,132545920韩希福,王荣海洋浮游动物对浮游植物水华的摄食与调控作用J海洋科学,2001,2510313221谢志浩,唐学玺,陆开宏藻类种类和浓度对中华哲水蚤CALANUSSINICUS摄食和消化酶活性的影响J生态学报,2009,29261361822谢志浩,肖慧,蔡恒江,等赤潮藻塔玛亚历山大藻对褶皱臂尾轮虫生活史特征的影响J应用生态学报,2007,18122865286923NAVAVARRO,NURIAFEEDINGBEHAVIOUROFTHEMTIFERSBRACHIONUSPLIC
9、ATILISANDBRACHIONUSROTUNDIFORMISWITHTWOTYPESOFFOODLIVEANDFREEZEDRIEDMICROALGAEJJOURNALOFEXPERIMENTALMARINEBIOLOGYANDECOLOGY,1999,237758724HEERKLOSSR,HLAWASFEEDINGBIOLOGYOFTWOBRACHIONIDROTIFERSBRACHIONUSQUADRIDENTATUSANDBRACHIONUSPLICATILISJOCEANOGRAPHICLITERATUREREVIEW,1996,4390725BENNIH,THOMASWM,LO
10、UISEWPARTICLEGRAZINGEFFICIENCYANDSPECIFICGROWTHEFFICIENCYOFTHEROTIFERBRACHIONUSPLICATILISMULLERJJOURNALOFEXPERIMENTALMARINEBIOLOGYANDECOLOGY,1997,21521723326COWLESTJ,OLSONRJ,CHISHOLMSWFOODQUALITYJMARINEBIOLOGY,1988,100414927HUNTLEYME,SYKESP,ROHANS,ETALCHEMICALLYMEDIATEDREJECTIONOFDINOFLAGELLATCPREYB
11、YTHECOPEPODSCALANUSPACIFICUSANDPARACALANUSPARVUSMECHANISM,OCCURRENCEANDSIGNIFICANCEJMARINEECOLOGYPROGRESSSERIES,1986,2810512028TEEGARDENGJ,CEMBELLAADGRAZINGOFTOXICDINOFLAGLLATES,ALEXANDRINMAPP,BYADULTCOPEPODSOFCOASTALMARINEIMPLICATIONSFORTHEFATEOFPARALYTICSHELLFISHTOXINSAMARINEFOODWEBSJJOURNALOFEXPE
12、RIMENTALMARINEBIOLOGYANDECOLOGY,1996,19614517629FROSTBWEFFECTSOFSIZEANDCONCENTRATIONOFFOODPARTICLESONTHEFEEDINGBEHAVIOROFTHEMARINEPLANKTONICCOPEPODCALANUSPACIFICUSLIMNOLOGYANDOCEANOGRAPHY,1972,1780581530SHENGY,ZHENGZ,XIAOJLEFFECTSOFSEVERALENVIRONMENTALFACTORSONTHECLEARANCEANDINGESTIONRATESOFCALANUSP
13、ACIFICUSJOURNALOFXIAMENUNIVERSITYNATURALSCIENCE,1965,1229910031VIDALJPHYSIOECOLOGYOFZOOPLANKTONEFFECTSOFPHYTOPLANKTONCONCENTRATION,TEMPERATUREANDBODYSIZEONTHEGROWTHRATEOFCALANUSPACIFICUSANDPSEUDOCALANUSSPMARINEBIOLOGY,1980,5611113432HARRISRPZOOPLANKTONGRAZINGONTHECOCCOLITHOPHORIDEMILIANIAHUXLEYANDIT
14、SROLEININORGANICCARBONFLUXMARINEBIOLOGY,1994,119431439毕业论文文献综述生物技术浮游动物对浮游植物选择性摄食的研究摘要赤潮是海洋中某些浮游藻类、原生动物和细菌在一定的环境条件下爆发性繁殖或聚集而引起海洋水体变色的一种有害生态异常现象。它是全球性的海洋灾害的讯号，因此赤潮的研究成为了当今世界的重大科研课题。本文就浮游动物对浮游植物的选择性摄食以及浮游动物的摄食对浮游植物现存量的影响进行了综述。关键词浮游动物；浮游植物；摄食；赤潮1引言浮游动物（ZOOPLANKTON），是指漂浮的或游泳能力很弱的小型动物，浮游动物的种类极多，从低等的微小原生动物
15、、腔肠动物、栉水母、轮虫、甲壳动物、腹足动物等，到高等的尾索动物，几乎每一类都有永久性的代表，此外，也包括阶段性浮游动物，如底栖动物的浮游幼虫和游泳动物（如鱼类）的幼仔、稚鱼等。近年来，有害赤潮爆发的频率和规模都在逐渐增加，造成的危害越来越大，赤潮现象有在全球蔓延的趋势13。而浮游动物在海洋生态系统中起着承上启下的作用，其动态变化控制着初级生产力的节律、规模和归宿4，并同时控制着鱼类等高营养级生物资源的变动5；海洋生态系统中主要的初级生产者是单细胞藻类（如硅藻和甲藻），它们的产量占海洋初级生产量的90以上6，而它们也是主要的赤潮生物。赤潮发生时，浮游微藻的种类组成以及丰度均会发生变化；同时赤潮
16、发生时环境条件的改变又会影响到主要的初级消费者浮游动物的摄食，并最终影响到物质和能量沿海洋食物链的传递。因此，进行浮游动物对浮游动物选择性摄食的研究对了解有害微藻水华发生的动力学机制具有重要意义。2浮游动物与浮游植物的摄食关系21浮游动物对浮游植物的选择性摄食长期以来，对于浮游动物的选择性摄食存在着争议。部分学者不支持浮游动物摄食具有选择性这一观点。HUNTLEY，TURNER7和TESTER8认为，桡足类对自然混合食物没有选择性。TURNER和ANDERSON9发现桡足类对有毒的塔玛亚历山大藻（ALEXANDRIUMTAMARENSE）、无毒的三角异孢藻（HETEROCAPSATRIQUET
17、RA）和砂壳纤毛虫的摄食没有选择性。BATTEN等10认为，不同的桡足类种类，其摄食种类并没有表现出太大的差别，尤其是小型桡足类，更没有显示出对某些藻类的偏爱。但更多的研究结果却表明，浮游动物具有不同程度的选择食物的能力。TURRIFF等的研究表明，飞马哲水蚤相对于无毒的脱壳亚历山大藻（ALEXANDRIUMEXCAVATUM），更倾向于捕食无毒的威氏海链藻（THALASSIOSIRAWEISSFLOGII）和塔玛亚历山大藻无毒株系。而ENGSTROM等11研究了波罗的海2种桡足类（EURYTEMORAAFFINIS和ACARTIABIFILOSA）对有毒和无毒的蓝菌的摄食，发现EURYTEM
18、ORAAFFINIS可以有效地摄食无毒蓝菌，对有毒蓝菌仅具有中等活力的摄食，而ACARTIABIFILOSA总是躲避摄食有毒和无毒蓝菌，表明这2种桡足类具有选择性摄食。22浮游动物选择性摄食对浮游植物的影响浮游动物的摄食是影响海洋中浮游植物数量的一个重要原因。浮游动物因其捕食细菌及小型浮游植物而在能量从低级向高级流动中扮演重要角色。绝大多数现场研究发现微型浮游动物每天消费初级生产力很显著。微型浮游动物不仅控制浮游植物种类的大小，也通过其有选择性的摄食来控制某些藻类的生长和营养盐的重新利用。因此，微型浮游动物的摄食也很可能影响春季在温带水域经常发生的水华12。23有害赤潮对浮游动物摄食的影响藻华
19、是指水体中藻类大量繁殖的一种现象，有时这种浮游植物的爆发性增殖会造成海洋生物死亡，生态环境恶化，通过藻毒素污染海洋产品，从而对人类健康甚至生命构成威胁，国际科技界目前称这类藻华（赤潮）为有害藻华（HARMFULALGALBLOOMSHABS），也称有害赤潮13。大多数浮游动物的摄食具有明显的选择性4，而且这种选择性受很多因素影响，包括非生物因素（如温度、盐度）和生物因素（如食物质量、食物密度）14。赤潮发生时由于环境条件（非生物因素）以及藻种类组成和密度及生理状况（生物因素）的改变，浮游动物的摄食必然受到影响。有害赤潮藻与它们的浮游动物捕食者之间的关系非常复杂，浮游动物针对不同的变化作出不同的
20、反应，表现为无选择性、拒食、减少摄食量和增加摄食量1518。24关于浮游动物和浮游植物相互作用的科学假设（1）浮游植物水华带来了基础生产率的大幅度提高，超出了浮游动物对基础生物量的摄食能力。导致了巨大的生物现存量的出现。（2）某些浮游植物种类难被浮游动物摄食，而有些被摄食后。浮游动物很难同化利用。使大量的初级生产力难以及时转移。（3）全球气候变暖条件下，温度升高会提高浮游动物对浮游植物的摄食水平，因此浮游动物的撮食会减小浮游植物的水华规模19。3结语浮游生态系中浮游植物与浮游动物的摄食关系研究是海洋生态系统中一个关键的过程研究。浮游动物的摄食受各营养阶层组成粒级结构的影响。在大细胞浮游植物占优
21、势的海区，浮游植物被中型浮游动物摄食的经典食物链较重要，而在以小细胞植物为主的生态系统中，则以微型浮游动物对小细胞的浮游植物及细菌摄食的微食物环为主。因此，评估微型浮游动物的摄食对浮游植物现存量的影响，对了解有害微藻水华发生的动力学机制有重要意义。王学峰20等研究发现，摄食者对被摄食者的清除率（CLEARANCERATE）随着被摄食者的浓度增加会达到一个最大值，但随后就降低。这反映微型浮游动物在控制浮游植物生长方面有重要作用，但若浮游植物的密度过高时，浮游动物是无法控制浮游植物生长的，具体阈值有待进一步研究20。参考文献1ANDERSONDMTOXICALGALBLOOMSANDREDTIDE
22、SAGLOBALPERSPECTIEAOKAICHIT,ANDERSONDM,NEMOTOTREDTIDESBIOLOGY,EVERIMENTALSCIENCE,ANDTOXICOLOGYCNEWYORKELSEVIERSCIENCEPUBLISHINGCO1989,11162SMAYDATNOVELANDNUISANCEPHYTOPLANKTONBLOOMSINTHESEAEVIDENCEFORAGLOBALEPIDCMICAGRANELIESUNDSTROMB,EDLERL,ETALTOXICMARINEPHYTOPLANKTONCNEWYORKELSCVIER,1990,29403HAL
23、LEGRAEFFGMAREVIEWOFHARMFULALGALBLOOMSANDTHEIRAPPARENTGLOBALINCREASEJPHYCOLCGYA,1993,32279994王小东,孙军,刘东艳,等海洋中型浮游动物的选择性摄食对浮游植物群落的控制J海洋科学进展,2005,2345255355王荣,范春雷桡足类摄食研究及其东海颗粒碳垂直转移的贡献J海洋与湖沼,1997,2865795876沈国荣,施并章海洋生态学M厦门厦门大学出版社,19961207HUNTLEYMENONSELECTIE,NONSATURATEDFEEDINGBYTHREECALANARIDCOPEPODSPECIE
24、SINTHELABRADORSEAJLIMNOL,OCEANOGR,1981,268318428TURNERJTANDTESTERPAZOOPLANKTONFEEDINGECOLOGYNONSELECTIVEFEEDINGBYCOPEPODSACARTIATONSADANA,CENTROPAGESVELIFICATUSDEOIVEIRAANDEUCALANUSPLEATUSGIESBRECHTINTHEPLUMEOFTHEMISSISSIPPIRIVERJJEXPMARBIOLECOL,1989,12621439TURNERJTANDTESTERRAZOOPLANKTONGRAZINGDURI
25、NGDINOFLAGELLATCBLOOMSINACAPECODEMBAYMENTWITHABSERVARIONSOFPREDATIONUPONTINTINNIDSBYCOPEPODSJMARECOL,1983,4435937410BOTTENSD,FILEMANESANDHALVORSENETHECONTRIBUTIONOFMICROZOOPLANKTONTOTHEDIETOFMESOZOOPLANKTONINANUPWELLINGFILAMENTOFFTHENORTHWESTCOASTOFSPAINJMARECOLINOCEANOR,1983,4435937411ENGSTROMJ,KOS
26、KIM,VIITASALOM,ETALFEEDINGINTERACTIONSOFTHECOPEPODSEURYTEMORAAFFINISANDACARTIABIFILOSAWITHTHECYANOBACTERIANODULARIAAPJJPLANKTONRES,2000,221403140912王学峰,李纯厚,等微型浮游动物摄食生态学研究进展J南方水产,2005,15707613周明江,朱明远中国赤潮的发生趋势和研究进展J生命科学,2001,132545914COWLESTJ,OLSONRJ,CHISHOLMSWFOODQUALITYJMARINEBIOLOGY,1988,100414915H
27、UNTLEYME,SYKESP,ROHANS,ETALCHEMICALLYMEDIATEDREJECTIONOFDINOFLAGELLATCPREYBYTHECOPEPODSCALANUSPACIFICUSANDPARACALANUSPARVUSMECHANISM,OCCURRENCEANDSIGNIFICANCEJMARINEECOLOGYPROGRESSSERIES,1986,2810512016HANSENPJGROWTHANDGRAZINGRESPONSEOFCILIATEFEEDINGONTHEREDTIDEDINOFLAGELLATEGYRODINIUMANREOLEUMINMON
28、OCULTUREANDINMIXTUREWITHANONTOXICALGAEJMARINEECOLOGYPROGRESSSERIES,1995,121657217TURRIFFN,RUNGEJA,CEMBELLAADTOXINACCUMULATIONANDFEEDINGBEHAVIOROFTHEPLANKTONICCOPEPODCALANUSFONMARCHICUSEXPOSEDTOTHEREDTIDEDINOFLAGELLATEALEXANDRIUNEXCAVATUMJMARINEBIOLOGY,1995,123556418TEEGARDENGJ,CEMBELLAADGRAZINGOFTOX
29、ICDINOFLAGLLATES,ALEXANDRINMAPP,BYADULTCOPEPODSOFCOASTALMARINEIMPLICATIONSFORTHEFATEOFPARALYTICSHELLFISHTOXINSAMARINEFOODWEBSJJOURNALOFEXPERIMENTALMARINEBIOLOGYANDECOLOGY,1996,19614517619韩希福,王荣海洋浮游动物对浮游植物水华的摄食与调控作用J海洋科学,2001,2510313220王学峰,贾晓平,等大亚湾冬春季微型浮游动物摄食研究J海洋环境科学,2006,2514447本科毕业设计（20_届）褶皱臂尾轮虫对2
30、种赤潮微藻的摄食研究目录摘要13关键词13ABSTRACT13KEYWORDS131引言142实验材料与方法1421实验材料1422实验方法和条件15221褶皱臂尾轮虫对赤潮微藻的摄食试验15222光照对褶皱臂尾轮虫对赤潮微藻摄食的影响15223温度对褶皱臂尾轮虫对赤潮微藻摄食的影响1523摄食率和滤水率的计算153结果1531褶皱臂尾轮虫对赤潮微藻的摄食15311轮虫对东海原甲藻的摄食15312轮虫对中肋骨条藻的摄食1632光照对褶皱臂尾轮虫对赤潮微藻摄食的影响16321光照对褶皱臂尾轮虫对东海原甲藻摄食的影响16322光照对褶皱臂尾轮虫对中肋骨条藻摄食的影响1733温度对褶皱臂尾轮虫对赤潮
31、微藻摄食的影响18331温度对褶皱臂尾轮虫对东海原甲藻摄食的影响18332温度对褶皱臂尾轮虫对中肋骨条藻摄食的影响194讨论1941褶皱臂尾轮虫对赤潮微藻的摄食1942光照对褶皱臂尾轮虫对赤潮微藻摄食的影响2143温度对褶皱臂尾轮虫对赤潮微藻摄食的影响215小结22致谢错误未定义书签。参考文献23摘要通过饵料浓度差法，在实验条件下研究了褶皱臂尾轮虫对中肋骨条藻和东海原甲藻的摄食率和滤水率的影响。结果表明轮虫对中肋骨条藻和东海原甲藻具有一定的摄食潜力，对中肋骨条藻的摄食率相对较高，对东海原甲藻的摄食率相对较低。光照和温度二种环境因子对轮虫对2种赤潮微藻的摄食具有较明显的影响，影响作用的大小与赤潮
32、微藻的种类和藻密度有关。关键词褶皱臂尾轮虫；中肋骨条藻；东海原甲藻；藻密度；摄食ABSTRACTEFFECTSOFDIFFERENTDENSITIESOFSKELETONEMACOSTATUMANDPROROCENTRUMDONGHAIENSEONTHEFEEDINGOFBRACHIONUSPLICATILISWERESTUDIEDBYTHEBATCHCULTUREFEEDINGEXPERIMENTUNDERCONTROLLEDLABORATORYCONDITIONSRESULTSSHOWEDTHATTHEROTIFERBPLICATILISHADAPOTENTIALFEEDINGABILIT
33、YONSCOSTATUMANDPDONGHAIENSETHEINGESTIONRATEIROFROTIFERBPLICATILISONSCOSTATUMWASRELATIVELYHIGHERTHANTHATOFPDONGHAIENSETHEIRSOFROTIFERBPLICATILISONTWOSPECIESOFREDTIDEMICROALGAEWERELARGELYAFFECTEDBYILLUMINATIONANDTEMPERATUREANDTHESEINFLUENCESRELATETOSPECIESANDDENSITIESOFREDTIDEMICROALGAEKEYWORDSBRACHIO
34、NUSPLICATILISSKELETONEMACOSTATUMPROROCENTRUMDONGHAIENSEALGALDENSITIESFEEDING1引言浮游动物是渔业生产和浮游植物的中间连接环节，它们在海洋生态系统中扮演重要的角色，浮游动物直接捕食藻类等浮游植物，影响着海洋的初级生产力，同时它们还为较高营养级的消费者提供食物。所以导致赤潮发生的赤潮藻一定会对浮游动物造成影响，进而影响到较高级消费者，以至于最终影响整个生态系统。浮游动物的数量变化和摄食会直接影响浮游植物的数量和生长，这与有害赤潮的发生和它们的生态效应有着密切的关系；同时有害赤潮微藻对浮游动物的摄食、繁殖与生长亦会产生直接或
35、间接的影响，从而造成浮游生物在食物链中的能量和物质传递、流动的障碍。TURNER等1认为许多特定赤潮的形成与发生都是由于浮游植物的生长和它们的摄食者之间失去了平衡而造成的，某些有毒的甲藻对浮游动物的生长和发育的抑制影响了其种群的数量，从而降低了它们对藻类的摄食压力，进而导致有毒的赤潮藻水华持续时间的增长。因而，对于有害赤潮微藻与浮游动物的关系的深入研究对于我们了解其对海洋生态系统的作用机制与影响具有重要意义。褶皱臂尾轮虫BRACHIONUSPLICATILIS是一种微型浮游动物，由于轮虫具有分布广、世代时间短、在水体中易悬浮、大小适中、易培养等特点而被广泛应用于多种海洋有鳍鱼类和甲壳动物幼体的
36、培育中，成为鱼类、甲壳类极为重要的生物饵料2。另外，褶皱臂尾轮虫作为较为敏感的指示生物被广泛地用于监测河口和海水毒物。浮游动物对于不同藻类食物的摄食研究报道较多，但是关于褶皱臂尾轮虫对于赤潮微藻的摄食研究目前的报道很少。在海洋环境中浮游动物对于赤潮微藻的反应复杂而又多变，主要表现在浮游动物对其选择性摄食、逃避、拒绝等3。目前的研究发现，浮游动物对于某些赤潮微藻有着一定的、潜在的调控作用；反之，有害赤潮藻也会对浮游动物的摄食、产卵力和卵的孵化率、生长和发育等造成影响。本实验中，我们选择了2种海洋赤潮微藻甲藻DINOFLAGELLATE东海原甲藻PROROCENTRUMDONGHAIENSELU和
37、硅藻DIATOM中肋骨条藻SKELETONEMACOSTATUM，研究了褶皱臂尾轮虫对赤潮微藻的摄食及光照和温度对其摄食的影响。2实验材料与方法21实验材料实验所用的藻类为东海原甲藻和中肋骨条藻，它们都来自于中国海洋大学微藻培养室，属于赤潮藻种。藻类培养液使用的是F/2营养盐配方，取处于指数生长期的微藻藻液接种在250ML培养液中。培养温度201，光照强度3000LX，光暗周期12L12D。供试褶皱臂尾轮虫由山东省海水养殖研究所提供，为实验室常年培养种，饲养于500ML烧杯中，以2104CELLSML1小球藻CHLORELLASP投喂，培养条件与藻类相同。实验中所用的海水是经过煮沸的045M滤
38、膜海水，通过加蒸馏水使盐度调节到301。22实验方法和条件221褶皱臂尾轮虫对赤潮微藻的摄食试验实验所用藻细胞均在指数生长中期取样，鲁哥氏液固定，血球计数板计数并计算细胞密度。取指数生长期的藻液，用灭菌海水稀释至实验密度。在预实验的基础上，中肋骨条藻密度设置为25104,7104,10104,30104和40104CELLSML1；东海原甲藻密度设置为5104,9104,13104,17104和21104CELLSML1。每个密度梯度设3个平行样，一个不加轮虫的对照组2个平行样。实验之前先将轮虫放于灭菌的海水中饥饿1224H，使之将肠道排空。实验体积为30ML，在50ML烧杯中进行。每只烧杯中
39、放入300只轮虫实验前先计算每毫升培养液中轮虫个体数，INDSML1，实验时吸取适当体积加至烧杯中，然后加入适量藻液和灭菌海水使轮虫最终密度为10INDSML1，即300INDS/烧杯，藻细胞达到实验所需密度。实验温度为201，实验烧杯均用黑布罩住，放于恒温振荡器上以防藻细胞的沉淀与生长。于黑暗状态下培养24H。222光照对褶皱臂尾轮虫对赤潮微藻摄食的影响实验所用藻细胞的密度设置、轮虫数量和实验方法同221。光照条件设置为0黑暗、1000、4000和8000LX光暗周期12L12D。实验温度为201，实验烧杯置于恒温振荡器上，以防止藻细胞的沉淀。培养时间为24H。223温度对褶皱臂尾轮虫对赤潮
40、微藻摄食的影响实验所用藻细胞的密度设置、轮虫数量和实验方法同221。中肋骨条藻的温度条件设置为15、20、25、30和35，东海原甲藻的温度条件设置为15、20、25和30通过预实验发现35条件下东海原甲藻藻细胞不能存活。实验在黑暗条件下进行，实验烧杯置于恒温振荡器上，以防止藻细胞的生长和沉淀。培养时间为24H。23摄食率和滤水率的计算24H之后，用鲁哥氏液将藻液固定，显微镜下用血球计数板计数藻液并计算出藻细胞的密度。按照FROST4的公式计算轮虫对微藻的摄食率CELLSIND1H1与滤水率MLIND1H1IRCRCTFC0/INCTFINC0CRV/NINCTINCTF/T公式中，IR代表摄
41、食率INGESTIONRATE，CELLSIND1H1，是指每只浮游动物在单位时间内过滤的饵料细胞数；CR代表滤水率CLEARANCERATE，MLIND1H1，是指在一定的水样中，浮游动物个体或者总的个体数在单位时间内滤过的含有一定数量的浮游植物的水样量；C0代表起始饵料浓度104CELLSML1；CT代表对照瓶中最终饵料的浓度104CELLSML1；CTF代表实验瓶中最终饵料浓度104CELLSML1；V代表实验所用水样的体积ML；N代表每只实验瓶中浮游动物的个体数目IND；T为摄食时间H。3结果31褶皱臂尾轮虫对赤潮微藻的摄食311轮虫对东海原甲藻的摄食不同藻细胞密度下轮虫对东海原甲藻的
42、摄食率和滤水率见图1A。藻细胞密度为5104CELLSML113104CELLSML1时，轮虫对于东海原甲藻的滤水率和摄食率随着藻细胞密度的增加而降低，藻细胞密度达到5104CELLSML1时，滤水率最大，为00057MLIND1H1；当藻细胞密度大于13104CELLSML1时，摄食率和滤水率随藻细胞密度的增加又逐渐上升，藻细胞密度达到21104CELLSML1时，摄食率达最大值，该最大值为161CELLSIND1H1。312轮虫对中肋骨条藻的摄食不同藻细胞密度下轮虫对中肋骨条藻的摄食率和滤水率见图1B。藻细胞密度在25104CELLSML130104CELLSML1范围内，轮虫对于中肋骨条
43、藻的摄食率随藻细胞密度的增大而上升，藻细胞密度达30104CELLSML1时，摄食率上升到最大，最大值为403CELLSIND1H1；藻细胞密度大于30104CELLSML1时，摄食率又开始下降，呈现下降趋势。图1褶皱臂尾轮虫对赤潮微藻的摄食FIG1FEEDINGABILITYOFROTIFERBPLICATILISONSCOSTATUMANDPDONGHAIENSEA东海原甲藻B中肋骨条藻滤水率变化的规律和摄食率基本是同步的，也呈现出一个先上升后下降的趋势，不同之处在于，滤水率的最大值（00031MLIND1H1）出现在藻细胞密度为1075104CELLSML1时。32光照对褶皱臂尾轮虫对赤
44、潮微藻摄食的影响321光照对褶皱臂尾轮虫对东海原甲藻摄食的影响不同光照强度下轮虫对东海原甲藻的摄食率见图2A。藻细胞密度为5104CELLSML1和00102030405060759131721滤水率CR,102MLIND1H1005115225摄食率IR,102CELLSIND1H1B0005010150202503035257103040藻细胞密度,ALGALCELLDENSITY104CELLSML1滤水率CR,102MLIND1H1012345摄食率IR,102CELLSIND1H1CRIRDAB9104CELLSML1时，在04000LX范围内摄食率随着光照强度的增加而上升，在400
45、0LX达到最大值173CELLSIND1H1，当光照强度增加为8000LX时，摄食率却下降至最低；藻细胞密度为13104CELLSML1时，摄食率最大值和最低值出现在光照强度为4000LX和3000LX时，分别为148CELLSIND1H1和75CELLSIND1H1；藻细胞密度为17104CELLSML1时，摄食率最大值和最低值出现在光照强度为1000LX和3000LX时，分别为126CELLSIND1H1和116CELLSIND1H1；藻细胞密度为21104CELLSML1时，摄食率随着光照强度的增加而下降。本实验中，摄食率的最大值出现在藻细胞密度为17104CELLSML1，光照强度为1
46、000LX时，为226CELLSIND1H1，最低值出现在藻细胞密度为9104CELLSML1，光照强度为8000LX时，为57CELLSIND1H1。322光照对褶皱臂尾轮虫对中肋骨条藻摄食的影响不同光照强度下轮虫对中肋骨条藻的摄食率见图2B。藻细胞密度为25104CELLSML1时，在实验光照强度范围内，摄食率的变化很小；藻细胞密度为7104CELLSML1时，摄食率随着光照强度的增加而上升；藻细胞密度为10104CELLSML1和30104CELLSML1时，摄食率最大值出现在光照强度为4000LX时，分别为326CELLSIND1H1和415CELLSIND1H1，最低值出现在黑暗条件
47、下，分别为182CELLSIND1H1和167CELLSIND1H1；藻细胞密度为40104CELLSML1时，摄食率最大值和最低值分别出现在光照强度为3000LX时和黑暗条件下。本实验中，摄食率的最大值出现在藻细胞密度为30104CELLSML1，光照强度为4000LX时，为326CELLSIND1H1，最低值出现在藻细胞密度为25104CELLSML1，黑暗条件下，为63CELLSIND1H1。图2光照对轮虫对赤潮微藻摄食的影响005115225359131721摄食率IR,102CELLSIND1H1B0123456257103040藻细胞密度,ALGALCELLDENSITY104CE
48、LLSML1摄食率IR,102CELLSIND1H101000LX3000LX4000LX8000LXCABFIG2EFFECTOFAMBIENTILLUMINATIONONFEEDINGABILITYOFROTIFERBPLICATILISONSCOSTATUMANDPDONGHAIENSEA东海原甲藻B中肋骨条藻33温度对褶皱臂尾轮虫对赤潮微藻摄食的影响331温度对褶皱臂尾轮虫对东海原甲藻摄食的影响不同温度下轮虫对东海原甲藻的摄食率见图3A。藻细胞密度为5104CELLSML1时，摄食率分别在20和30时较高，为133CELLSIND1H1和114CELLSIND1H1；藻细胞密度为910
49、4CELLSML1时，摄食率在20时较低，为104CELLSIND1H1，在25时稍有下降，30时达到最大值178CELLSIND1H1；藻细胞密度为13104CELLSML1和17104CELLSML1时，摄食率随着温度的升高而上升；藻细胞密度为21104CELLSML1时，摄食率随着温度的升高而上升，当温度超过25时，摄食率又呈下降趋势。不同温度下，轮虫对东海原甲藻的摄食率以15时为最低。00511522559131721摄食率IR,102CELLSIND1BA图3温度对轮虫对赤潮微藻摄食的影响FIG3EFFECTOFTEMPERATUREONFEEDINGABILITYOFROTIFERBPLICATILISONSCOSTATUMANDPDONGHAIENSEA东海原甲藻B中肋骨条藻332温度对褶皱臂尾轮虫对中肋骨条藻摄食的影响不同温度下轮虫对中肋骨条藻的摄食率见图3B。藻细胞密度为25104CELLSML1时，在实验温度范围内，摄食率相对较小，变化也很小，温度对摄食率几乎没有影响；藻细胞密度为7104CELLSML1时，摄食率在15时最小，20时摄食率明显上升，超过20时摄食率变化不明显；藻细胞密度为10104CELLSML1时，摄食率随着温度的升高而上升，当温度超过30时又呈下降趋势；藻细胞密度为301
