1、本科毕业设计（20_届）热处理对枇杷果实低温冷害和品质的影响所在学院专业班级食品质量与安全学生姓名学号指导教师职称完成日期年月I目录1前言12材料与方法121实验材料与处理122实验仪器123测定项目与方法2231失重率2232腐烂指数2233果心褐变指数2234硬度（TPA）2235可溶性固形物SSC和可滴定酸TA含量测定2236果实的出汁率2237超氧化物歧化酶SOD活性测定2238过氧化氢酶CAT活性测定3239抗坏血酸过氧化物酶APX活性的测定32310谷胱甘肽还原酶GR活性的测定32311丙二醛（MDA）32312细胞膜透性33结果与分析331贮前热处理对枇杷果实贮藏期间品质的影响3
2、311热处理对枇杷果实失重率的影响3312热处理对枇杷果实可溶性固形物（SSC）、可滴定酸（TA）的影响4313热处理对枇杷果实硬度、果实难剥离程度的影响5314热处理对果实果心褐变指数的影响632热处理对活性氧相关酶活性的影响6321热处理对枇杷果实SOD活性的影响6322热处理对枇杷果实CAT活性的影响7323热处理对枇杷果实APX活性的影响7324热处理对枇杷果实GR活性的影响8325热处理对枇杷果实MDA含量的影响8326热处理对枇杷果实膜透性的影响94讨论95总结10致谢错误未定义书签。参考文献11摘要本研究以大红袍枇杷（ERIOBOTRYAJAPONICALINDLCVDAHONG
3、PAO）为试材，研究枇杷在45不同时间（2H、3H、4H）热空气处理对枇杷低温4冷藏期间品质和冷害的影响。通过分析并测定贮藏期间枇杷果实失重率、腐烂指数、褐变指数、硬度、可溶固形物SSC、可滴定酸TA、出汁率等品质指标的变化，筛选合适的处理条件。并进一步分析热处理对果实活性氧（ROS）代谢相关酶（超氧化物歧化酶SOD、过氧化氢酶CAT、抗坏血酸过氧化物酶APX、谷胱甘肽还原酶GR）活性、丙二醛（MDA）含量和细胞膜透性的影响。研究发现，45热处理3H枇杷果实硬度下降，可溶性固形物上升，酸含量下降，风味更好，且果实不易褐变及失水皱缩，能保持良好的外观，适合与枇杷的采后处理。该处理能显著增加SOD
4、、CAT、APX、GR活性，降低膜透性和MDA的增加，从而减少活性氧的积累、减轻对细胞膜的损失，减轻枇杷果实冷害。关键词枇杷；热处理；低温冷害。（1FACULITYOFLIFESCIENCEANDBIOTECHNOLOGY,NINGBOUNIVERSITY,315211）ABSTRACTINTHISSTUDY,DAHONGPAOLOQUATERIOBOTRYAJAPONICALINDLCVDAHONGPAOWASUSEDTOSTUDYTHEEFFECTSOFCHILLINGINJURYINFLUENCEAFTER45HOTAIRTREATMENTINDIFFERENTTIME2H、3H、4HA
5、T4ITWASDETERMINEDBYANALYZINGTHECHANGESOFWEIGHTLOSS,DECAYINDEX,BROWNINGINDEX,HARDNESS,SOLUBLESOLIDSSC,TITRATABLEACIDITYTAANDJUICEYIELDDURINGSTORAGE,SELECTEDSUITABLECONDITIONSANDFURTHERANALYZEDTHEEFFECTSOFRELATEDENZYMESSUPEROXIDEDISMUTASESOD,CATALASECAT,ASCORBATEPEROXIDASEAPX,GLUTATHIONEREDUCTASEGRACT
6、IVITYOFREACTIVEOXYGENSPECIESROSMETABOLISM,THECONTENTOFMALONDIALDEHYDEMDAANDTHEPERMEABILITYOFCELLMEMBRANESAFTERHOTAIRTREATMENTITWASFOUNDTHAT45HOTAIRTREATMENT3HCANINCREASEDSOLUBLESOLIDS,DECREASEDCONTENTOFACID,THEFLAVORISBETTER,ANDITWASNOTEASYTOOCCURTHEFRUITBROWNINGANDDEHYDRATIONSHRINKAGE,CANMAINTAINAG
7、OODAPPEARANCE,WASSUITABLEFORPOSTHARVESTHANDLINGOFLOQUATTHISTREATMENTINCREASEDSOD,CAT,APX,GRACTIVITY,DECREASEDMEMBRANEPERMEABILITYANDTHEINCREASEOFMDASIGNIFICANTLY,TOREDUCETHEACCUMULATIONOFREACTIVEOXYGENSPECIES,REDUCETHELOSSOFCELLMEMBRANEANDREDUCECHILLINGINJURYOFLOQUATFRUITKEYWORDSLOQUATCHILLINGINJURY
8、HOTAIRTREATMENT缩略词表ABBREVIATIONS缩略词英文名称中文名称TPATEXTTUREPROFILEANALYSIS质地剖面分析SSCSOLUBLESOLID可溶性固形物TATITRATABLEACIDITY可滴定酸ROSREACTIVEOXYGENSPECIES活性氧分子MDAMALONDIALDEHYDE丙二醛SODSUPEXOXIDEDISMUTASE超氧化物歧化酶CATCATALASE过氧化氢酶APXASCORBATEPEROXIDASE抗坏血酸过氧化物酶GRGLUTATHIONEREDUCTASE谷胱甘肽还原酶FIGFIGURE图TABTABLE表CENTIGR
9、ADE摄氏度GGRAM克HHOUR小时WWEEK周NBTNITROTETRAZOLIUMBLUECHLORIDE氯化硝基四氮唑蓝EDTAETHYLENEDIAMINETETRAACETICACID乙二胺四乙酸RNARIBONUCLEICACID核糖核酸RHRELATIVEHUMIDITY相对湿度PBSPHOSPHATEBUFFEREDSALINE磷酸盐缓冲液METMETHIONINE甲硫氨酸PVPPCROSSLINKINGPOLYVINYLPYRROLIDONE交联聚乙烯吡咯烷酮11前言枇杷果实是热带亚热带水果，果肉柔软多汁、酸甜适口、风味鲜美、营养丰富，且具有止咳润肺等医疗功效，倍受消费者的
10、喜欢1。但是，枇杷果实成熟于高温多湿季节，采后生理代谢旺盛，品质下降快。常温下贮藏极易失水皱缩和腐烂；低温25C贮藏虽可抑制果实腐烂，但易发生冷害，出现木质化败坏现象2。冷害是指植物活体在0以上的温度环境条件下植物体所遭受的低温伤害，是一种因低温而造成的代谢失调和生理病害，是冷敏感果实在低温贮藏过程中造成损失最严重的原因之一3。不同的果实对冷害表现出的症状不同，主要表现为表面凹陷、水溃状斑点增多；表面或内部褐变；果肉粘稠、木质化败坏，出汁率下降；果实不能正常成熟、着色，甚至组织崩溃，产生异味和腐烂等。减轻或降低低温冷害的方法很多，通过变温处理、贮前热处理、激素控制等方法可以减轻枇杷果实或其他相
11、关冷敏感果实的冷害症状4。随着人们对食品质量和环境问题的日益重视，化学杀菌剂残留问题备受质疑，而热处理技术以其能有效控制果蔬采后的病虫害，部分取代化学药剂对果蔬采后病害的控制、调节果蔬的生理生化代谢，且无污染和残留5。本研究通过研究采后枇杷果实冷藏前热处理之后，枇杷果实各项生理指标的变化，旨在研究热处理对枇杷果实冷害以及品质的影响，且何种条件下的热处理能最好的保存枇杷果实的品质。2材料与方法21实验材料与处理供试用的枇杷果实为大红袍（ERIOBOTRYAJAPONICALINDLCVDAHONGPAO），产地是宁波。色泽相近，大小一致，无机械损伤，无自然病害侵染。分组编号，进行处理。果实随机分
12、为4组，每组40个果实，整个实验重复2次。设对照组果实套普通聚乙烯保鲜袋，不扎口，直接进入4C贮藏。3个热空气处理组45C热空气处理2H、3H、4H，枇杷果实套普通聚乙烯保鲜袋，不扎口，置于4505C、相对湿度RH905并稳定的恒温恒湿箱中进行热处理，处理结束之后置于4C贮藏。贮藏后的果实每隔7天取样测定各项指标。每次取8个果实，每个指标重复3次6。22实验仪器仪器型号厂家通风柜3HE浙江三和科教仪器有限公司高速冷冻离心机H2050R湘仪离心机仪器有限公司电热恒温水槽DK8D上海一恒科技有限公司玻璃仪器气流烘干器诗圣牌C型郑州杜甫仪器厂电热恒温鼓风干燥箱DHG9108A上海精宏实验设备有限公司
13、电子天平JY12001上海民桥精密科学仪器有限公司电子分析天平PL403上海梅特勒托利多仪器有限公司微型漩涡混合仪WH3上海沪西分析仪器厂有限公司摩尔纯水机元素型1820A上海摩勒科学科学仪器有限公司紫外分光光度计CARY50VARIAN食品物性测试仪TAXTPLUSVIENNACOURE,LAMMASROAD,GODALMING,SURREYGU71YL,UK可见分光光度计KD723上海科登精密仪器有限公司2紫外可见分光光度计WFZUV2800AH上海龙尼科仪器有限公司双向定时恒温磁力搅拌器903上海沪西分析仪器厂有限公司酸度计PHS3C上海盛磁仪器有限公司手持式折射仪WZ108北京万成北增
14、精密仪器有限公司电热恒温水浴锅DKS26宁波江南仪器厂电导率仪DDS11P上海精密科学仪器有限公司超低温冰箱DW40L262青岛海尔特种电器有限公司恒温恒湿培养箱HWS智能型宁波海曙赛福实验仪器厂23测定项目与方法231失重率称重法，失重率（起始重量测定时重量）/起始重量100。232腐烂指数自然腐烂，参照郑永华等的方法7，取20个果实，将果实按腐烂面积大小分为4级，即，0级无腐烂；1级腐烂面积小于果实面积的10；2级腐烂面积占果实面积的1030；3级腐烂面积大于果实面积的30。按下式计算腐烂指数腐烂指数（）级别该级果数/3测定总果数100。在14天后统计果实的腐烂指数。233果心褐变指数参照
15、蔡冲等的方法8，按褐变面积分为5级，即0级没有褐变；1级褐变面积50。结果计算按照下面的公式果心褐变指数级别每一级别的果实数/4所有的果实数。冷藏35天后统计果心褐变指数。234硬度（TPA）参照蔡冲等方法。用TAXTPLUS型质构仪英国STABLEMICROSYSTEMLTD测去皮果肉硬度，测定硬度时下压距离为5MM，探头直径为5MM，取平均值，结果以G表示。235可溶性固形物SSC和可滴定酸TA含量测定WZ108型手持糖量仪测定可溶性固形物（SSC）含量，GB1229390电位滴定法测定可滴定酸含量（TA），两者的比值作为固酸比。236果实的出汁率随机称取果肉M08L0G，打浆后以一定量的
16、水M1转移至离心管中，经10,000G冷冻离心10MIN，取出上清液，称重M2，以M2M1M0比值表示果肉出汁率，用表示。237超氧化物歧化酶SOD活性测定参照姜爱丽9的方法1）提取液的制备取1G去皮果肉，加5ML005M磷酸缓冲溶液PH78，含3PVPP、01MMEDTA、125MM聚乙二醇，冰浴研磨，4冷冻离心12000R/MIN离心20MIN，取上清液测定酶活性。2）SOD酶活性的测定反应体系25MLPBS02ML195MMMET01MLEDTA20UL粗酶液02ML1125MMNBT01ML006MM核黄素。用缓冲液作空白；试剂全部加完后充分混匀。做3支空白管，其中1支置于暗处，其它2
17、支及测定管均在光强为3000LUX的2盏日光灯下光照10MIN，然后立即遮光停止反应，以暗处放置的空白管调零，测定OD560。以不加酶液的试管为最大还原管，以10MIN反3应时间内抑制NBT光还原50的酶液量为一个酶活力单位，按下面的公式计算酶活力AAODMAXODV1/ODMAXV2WT50其中A酶活力UG1FWH1；ODMAX最大还原管的光密度值；OD测定管的光密度值；V1粗酶提取液体积ML；V2一个酶活力单位的酶液量ML；W样品鲜重；T反应时间。238过氧化氢酶CAT活性测定参照姜爱丽的方法1提取液的制备取1G去皮果肉，加5ML005M磷酸缓冲溶液PH70，含3PVPP，冰浴研磨，4冷冻
18、离心12000R/MIN离心20MIN，取上清液测定酶活性。2CAT酶活性的测定反应体系01ML粗酶提取液3ML磷酸缓冲溶液02ML075H2O2，记录初始的OD240，然后置于温度为30的水浴锅中反应40MIN，再记录反应后的OD240，以每分钟每克果肉能降解H2O2的酶量为一个活性单位U1MOLH2O2/MIN。239抗坏血酸过氧化物酶APX活性的测定参照谢小群等的方法10并作调整1）提取液的制备取1G去皮果肉，加5ML005M磷酸缓冲溶液PH70，含3PVPP，冰浴研磨，4冷冻离心12000R/MIN离心20MIN，取上清液测定酶活性。2）APX酶活性的测定反应体系01ML粗酶提取液28
19、ML磷酸缓冲溶液01ML9MMOLASA01ML075H2O2。扫描2MIN内OD290的变化，酶活性以OD290MIN1G1FW表示，重复3次。2310谷胱甘肽还原酶GR活性的测定谷胱甘肽还原酶（GR）活性使用试剂盒来测定2311丙二醛（MDA）参照李合生的方法11提取液的制备取2G样品加5TCA（三氯乙酸腐蚀）10ML，研磨后所得匀浆在3000R/MIN下离心10MIN。取上清液2ML加2ML067TBA用5TCA配制，混合后在100水浴上煮沸30MIN。分别测定反应液的A450、A532和A600，并按下面的公式计算MDA含量NMOLG1FW645A532A600056A450ADF/W
20、其中A反应液总量ML；DF稀释度；W样品重G。2312细胞膜透性参照李合生等的测定方法，用削皮器在枇杷上取厚2MM、直径10MM的果皮圆片，用去离子水把圆片清洗3次左右，吸水纸吸干，称取2G放在盛有20ML蒸馏水（测定电导率）的小烧瓶里振荡3H（测定电导率）。DDS11P型电导仪测定提取液的电导度。烧瓶沸水浴30MIN（补水到先前标记的刻度）后再次测定。以煮沸前后电导率比值所得的相对电导率表示细胞膜透性。3结果与分析31贮前热处理对枇杷果实贮藏期间品质的影响311热处理对枇杷果实失重率的影响经过热处理和未处理的枇杷果实，在贮藏期间失重率显著增加（图1）。贮藏的前1W，每种处理方式4的果实失重率
21、都大幅增加，其中热处理3H的一组明显低于其他3组，2W后未经热处理的试验组失重率开始明显增加，而3H热处理和4H热处理则增加较缓。经过热处理的果实可以很好的减缓或抑制果实失重的增加，其中经过热处理3H的果实表现出最好的抑制效果。CK对照组（未经热处理）；2H45热处理2小时；3H45热处理3小时；4H45热处理4小时图1热处理对失重率的影响312热处理对枇杷果实可溶性固形物（SSC）、可滴定酸（TA）的影响枇杷果实在贮藏过程中，由于呼吸消耗，果实可溶性固形物含量会不断下降。由表1可知，随着贮藏时间的增加，除了经过热处理3H处理组在5W枇杷果实的可溶性固形物含量有轻微上升外，各组份的果实都不同程
22、度的表现出可溶性固形物的下降，且下降幅度较明显，由表可以看出，经过热处理的各组份的可溶性固形物含量的下降速度明显低于未经过热处理的试验组。说明热处理减弱了贮藏期间SSC含量下降的趋势，这可能与热处理抑制了果实贮藏期间的呼吸速率有关。其中经过热处理3H处理组抑制作用最强。随着贮藏时间的增加，果实中的可滴定酸逐渐下降，由表1可知，贮藏4W时，未经热处理的试验组可滴定酸含量最高，下降的最慢，经过热处理3H处理可滴定酸含量（TA）下降最快。到5W时，3H处理组显著低于其他组别，说明热处理可以明显的加快可滴定酸的减少，从而使果实获得更好的风味品质。表1不同热空气处理对枇杷果实SSC和TA的影响TABLE
23、1EFFECTSOFDIFFERENTHOTAIRTREATMENTSONSSCANDTAOFLOQUATFRUITDURINGSTORAGE冷藏时间STORAGETIME（WEEK）045SSCCK111A944D853C45C2H111A1011B988B45C3H111A1056A1076A45C4H111A994C953BTACK056A0375A027B545C2H056A0325B028A45C3H056A0295C026C45C4H056A03C028A注不同的字母代表显著差异（P005），下同。NOTEDIFFERENTLETTERSMEANSIGNIFICANTDIFFERE
24、NCE（P005）313热处理对枇杷果实硬度、果实难剥离程度的影响随着果实贮藏时间的增加，果实硬度有上升的趋势（图2）。第1W时，除了经过热处理3H处理组硬度略有下降外，其他各组都有不同程度的增加，其中又以对照组增加最严重，5W后，对照组硬度最大，2H处理组次之，整个贮藏阶段，3H处理组硬度一直增速较慢，由图2可以看出，热处理有助于降低果实硬度的增加。CK对照组（未经热处理）；2H45热处理2小时；3H45热处理3小时；4H45热处理4小时图2热处理对枇杷果实硬度的影响从表2可以看出，随着贮藏时间的延长，果皮越不容易剥离，其中以对照组和处理2H处理组最为严重，热处理组的果皮难剥离程度显著低于对
25、照组，3H处理组则显著低于其他热处理组。5W时热处理3H和4H处理组显著优于其他组别，可以看出热处理明显降低了果皮难剥离程度的发生。表2不同热空气处理对枇杷果皮难剥离指数的影响TABLE2EFFECTSOFDIFFERENTHOTAIRTREATMENTSONDEGREEOFDIFFICULTYPEELINGSKINOFLOQUATFRUITDURINGSTORAGE冷藏时间贮藏时间（周）045果皮难剥离程度DEGREEOFDIFFICULTYPEELINGSKINCK0A61A4B45C2H0A53B11A45C3H0A0D25C45C4H0A1C0D6314热处理对果实果心褐变指数的影响从
26、图3可知，随着贮藏时间的延长，果心褐变指数都有不同程度的增加，且增加幅度都很大。1W时对照组的褐变程度显著高于热处理组。2W时褐变指数急剧增加，贮藏到3W时2H处理组褐变指数显著高于其他组别，而其他热处理组与对照组基本持平。4W后热处理组的褐变程度显著低于对照组，但3H、4H处理组显著低于2H处理组，可以看出热处理可以降低或抑制果心褐变指数的增加。CK对照组（未经热处理）；2H45热处理2小时；3H45热处理3小时；4H45热处理4小时图3热处理对果心褐变指数的影响经过第一部分2H、3H、4H的优化阶段，3H和4H处理组之间存在的差异不大，再根据能耗的原因考虑，得出热处理3小时是热处理最好的方
27、法，有效的减少了硬度的增加，抑制了褐变的发生，延缓了果皮难剥离的发生等，显著的增强了枇杷果实的品质，以下直接使用热处理3H作为热处理的代表与CK组对比。32热处理对活性氧相关酶活性的影响321热处理对枇杷果实SOD活性的影响由图4可知，在整个贮藏过程中，试验组和对照组枇杷果实刚开始贮藏时SOD活性有一快速应激升高的过程，这可能是冷藏枇杷在低温下的一种保护性反应，而在贮藏后期阶段中SOD酶活性均呈现下降趋势，其中对照CK组下降更显著，这说明热处理延缓了SOD活性的下降，或者提高了冷藏过程中SOD酶的活性，进而提高低温条件下膜的稳定性和清除自由基的能力。7CK对照组（未经热处理）；3H45热处理3
28、小时。图4热处理对超氧化物歧化酶（SOD）活性的影响322热处理对枇杷果实CAT活性的影响由图5可知，整个贮藏阶段，除了第一周和第四周，其他贮藏时间都是热处理组的CAT活性显著高于对照组。急剧上升可能是因为枇杷果实对低温持续作用的适应性反应，进而诱发体内一些抗氧化保护酶的活性增加的结果。由图可知，热处理的枇杷果实在贮藏后期阶段CAT活性均高于未经热处理的对照组，说明了热处理有保持或提高贮藏后期阶段CAT活性的作用。CK对照组（未经热处理）；3H45热处理3小时。图5热处理对过氧化氢酶（CAT）活性的影响323热处理对枇杷果实APX活性的影响由图6可知，在整个贮藏期间APX活性呈现一个上升的趋势
29、，经过热处理的试验组在贮藏前期APX活性就呈现比较明显的升高，2W后有所下降，3W之后又开始上升，在4W的时候达到顶峰并开始下降，而对照组枇杷果实APX活性的变化幅度不是很大，这说明了热处理可以提高枇杷果实APX活性。8CK对照组（未经热处理）；3H45热处理3小时。图6热处理对抗坏血酸过氧化物酶（APX）活性的影响324热处理对枇杷果实GR活性的影响由图7可知，在整个贮藏期间GR活性呈现一个上升的趋势，其中经过热处理的试验组在贮藏前期就GR活性就开始上升，并在第3W的时候达到顶峰，并开始下降，但最后的GR活性还是高于对照组。而对照组在贮藏前期枇杷果实GR活性有大幅的下降，这可能与低温冷藏对酶
30、活性的影响有关，贮藏1W后对照组枇杷果实GR活性也开始上升。这说明热处理可以增加枇杷果实GR的活性，GR酶主要作用于抗坏血酸谷胱甘肽循环，从而清除自由基。CK对照组（未经热处理）；3H45热处理3小时。图7热处理对谷胱甘肽还原酶（GR）活性的影响325热处理对枇杷果实MDA含量的影响从图8可知，在整个贮藏期间，MDA含量随着贮藏时间的延长呈现增加的趋势，在贮藏后期CK组MDA含量显著高于热处理3H热处理组，说明热处理可以有效的降低或抑制MDA的产生。9CK对照组（未经热处理）；3H45热处理3小时图8热处理对丙二醛（MDA）含量的影响326热处理对枇杷果实膜透性的影响从表3可以看出，不同处理枇
31、杷果实组织的相对电导率在整个贮藏阶段均呈持续上升的变化趋势，说明冷害胁迫不同程度的破坏了细胞膜，其中对照组枇杷组织电导率随着贮藏时间的延长增加幅度更大，到贮藏后期，3H、4H处理组和2H、3H处理组的膜透性增加分别显著低于其他组别，发现3H处理组在整个过程中膜透性的增加趋势显著优于其他组别，说明了热处理降低了低温冷害对细胞膜的损伤，细胞膜受伤害程度较低。表3不同热空气处理对枇杷果实膜透性的影响TABLE3EFFECTSOFDIFFERENTHOTAIRTREATMENTSONLONLEAKAGEOFLOQUATFRUITDURINGSTORAGE冷藏时间贮藏时间（周）045膜透性LONLEAK
32、AGECK52A67A80A45C2H52A69A72C45C3H52A62B73C45C4H52A60B76B4讨论枇杷果实无后熟作用，只有在植株上成熟后采收才能获得最佳的食用品质。果实采后虽无呼吸跃变现象，但在室温下呼吸速率仍处于较高水平，物质分解代谢旺盛，很快失去枇杷果实特有的风味，而且易腐烂变质12。低温冷藏能是其贮藏保鲜的主要方式之一，但枇杷果实对低温比较敏感，4的贮藏温度对枇杷果实而言则属于低温胁迫条件，因此会造成果实呼吸速率异常升高和细胞膜透性增加，从而导致果实冷害发生13。褐变是测定果实品质的重要指标之一，不仅影响风味，而且降低营养价值。果皮难剥离程度是枇杷果实反生冷害的一个现
33、象14。可滴定酸是果实品质的重要构成性状之一，是影响果实风味品质的重要因素，10高糖中酸风味最佳15。从结果可以看出，经过热处理，枇杷果实的品质得到了很好的改善，主要表现在果实硬度，果心褐变，果皮难剥离程度都得到了显著的降低，可滴定酸也有所下降，且可溶固形物的降低和失重率的增加得到了很好的抑制作用，可以看出热处理对保持枇杷果实品质具有一定的作用。丙二醛MDA是膜脂过氧化分解的产物，是过氧化产物，与超氧阴离子一起反应了热处理对活性氧代谢的效果16。通常将MDA作为膜脂过氧化的重要指标，用来表示细胞膜脂过氧化程度和逆境伤害的强弱17。细胞膜透性大小是植物衰老或受胁迫程度的重要指标之一18。枇杷果在
34、25冷害低温胁迫下能引发MDA含量的急剧增加，加速了果肉膜脂过氧化的发生。热处理能在一定程度上降低了低温胁迫对细胞膜的敏感性和膜脂过氧化的程度，使电导率下降，细胞膜受伤害的程度较低19。SOD能催化超氧阴离子歧化生成H2O2，H2O2代谢过程中产生的废物，能造成膜系结构中脂肪酸氧化，从而破坏膜系结构，膜透性增加，内容质流出，导致果蔬皱缩。H2O2主要通过抗坏血酸谷胱甘肽循环脱毒生成H2O，以及CAT的催化作用分解为H2O。在抗坏血酸谷胱甘肽循环中，抗坏血酸过氧化物酶利用抗坏血酸将H2O2还原成H2O。氧化型谷胱甘肽在谷胱甘肽还原酶的催化下还原成谷胱甘肽，而谷胱甘肽可以作为底物，在脱氢抗坏血酸还
35、原酶的作用下将脱氢抗坏血酸生成抗坏血酸。SOD、CAT、APX和POD等调控代谢酶是植物组织细胞内清除自由基和活性氧的主要酶类20。通过这些酶防御体系清除自由基对膜的攻击，抑制过氧化，维护膜的结构和功能，提高枇杷的低温适应能力和抗冷性，同时这些酶防御系统还能延缓植物的衰老使枇杷果实维持正常的生长代谢21。从研究可以看出进过热处理的试验组MDA等过氧化产物明显低于对照组，相关活性氧代谢酶的活性也显著得到了提高，超氧阴离子的产生速率明显降低，且试验组细胞膜透性明显优于对照组，这说明热空气处理后贮于4的枇杷果实细胞膜抗冷性增加，有效的减轻或避免冷害发生，从而使枇杷果实获得了更长的货架期和良好的品质。
36、热空气处理低温下贮藏枇杷果，能明显地提高贮藏期间各调控酶的活性。热处理虽然相比其未经热处理对照，在对低温适应性的反应时间和程度方面存在着差异，但是却能始终保持着较高的调控酶的活性，以清除果肉组织内部的自由基和降低活性氧代谢，尽可能地延缓过氧化，降低果肉的衰老劣变和受低温胁迫冷害的程度22。5总结本文研究了45热空气处理2H、3H、4H对低温保藏枇杷的冷害影响。其中3H和4H可以有效的抑制枇杷果实的硬度和褐变指数的增加，延缓失重率、SSC的下降。虽然热处理3H和4H都可以达到减轻枇杷冷害的效果，但是从低耗能角度，本实验选择3H热处理作为最佳研究条件。45热处理3H可有效增加SOD、CAT、APX
37、和GR酶活性，从而减少超氧阴离子等对细胞膜的攻击，显著抑制膜透性的增加，同时也防止了膜的过氧化产物MDA的大量积累，有效延缓了冷害的发生，有利于货架期的增加。11参考文献1龚明金3个枇杷品种果实的贮藏性和品质变化比较D浙江大学,2006年2陈德碧,朱建勇,王大平水杨酸对冷藏期枇杷品质的影响研究J安徽农业科学,2008,361039503951,39533倪照君,沈丹婷,章镇等枇杷果实发育过程中糖积累及相关酶活性变化研究N西北植物学报,2009,293048704934蔡冲枇杷果实采后木质化与品质调控D浙江大学,2006年5鞠国志,原永冰,刘成连等低温对苹果贮藏过程中H2O2水平的影响J果树学报
38、,1994,11（1）11136刘瑾,张海霞,伍利芬等采前赤霉素处理对李果冷害的抑制及膜脂过氧化和品质的影响N甘肃农业大学学报,2010,4511341377郑永华,席与芳枇杷果实采后膜透性,呼吸强度及乙烯产生变化与耐贮性的关系J江西农业大学学报,1999,12180828蔡冲枇杷和水蜜桃果实主要采后生理变化及其相关调控措施研究D浙江大学,2003年9姜爱丽甜樱桃果实采后生理,耐藏性及褐变机理的研究D中国科学院植物研究所2002年10谢小群,高山林黄芩过氧化酶同工酶电泳和抗坏血酸过氧化物酶活性分析M中国药科大学2010年11李合生,孙群,赵世杰等植物生理生化实验原理和技术M北京高等教育出版社,
39、20009899；22923112CHONGCAI,CHANGJIEXU,LANLANSHANETALLOWTEMPERATURECONDITIONINGREDUCESPOSTHARVESTCHILLINGINJURYINLOQUATFRUITJPOSTHARVESTBIOLOGYANDTECHNOLOGY41200625225913吴锦程,谭莉,林德贵等谷胱甘肽对冷藏枇杷果实木质化相关生理指标的影响J云南农业大学学报,2008,23565265714张四奇枇杷果实低温冷害机理及热处理对减轻冷害效应的研究D集美大学,2007年15CHONGCAI,KUNSONGCHEN,WENPINGXUAN
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