1、血细胞比容(Hct或PCV),以前称为红细胞压积,是指在一定条件下经离心沉淀压紧的红细胞在全血标本中所占体积的比值。 HCT的高低与红细胞数量及平均体积、血浆量有关,1,任务四 血细胞比容测定,1.常量法(Wintrobe法)和微量法(microhematocrit) 将抗凝血液标本置于孔径统一的温氏管或毛细玻璃管中,以一定转速离心一定时间后,计算红细胞层占全血的体积比。 5层:血浆层、血小板层、白细胞和有核红细胞层、还原红细胞层和氧合红细胞层。2.血液分析仪法 由红细胞平均体积和红细胞计数两项指标后导出,Hct红细胞计数红细胞平均体积。,检测原理,4,1.操作规范化 避免操作误差,如抗凝量不
2、准,混匀不充分,离心速度不均等。 2注意干扰因素 假性增高:红细胞形态异常和红细胞增多时应注明, (细胞变形性减低和数量增多 血浆残留量增加); 高网织红细胞或高白细胞等 假性降低:体外溶血、自身凝集等。,质量保证,参考值,男性:0.3800.508;女性:0.3350.450,临床意义,HCT的临床意义与红细胞计数相似。HCT减低是诊断贫血的指标, HCT的高低与红细胞数量及平均体积、血浆量有关主要用于贫血、真性红细胞增多症和红细胞增多的诊断、血液稀释和血液浓缩变化的测定、计算红细胞平均体积和红细胞平均血红蛋白浓度等。,临床意义,1临床补液量的参考 各种原因导致脱水时,HCT都会增高,补液时
3、可监测HCT,HCT恢复正常表示血容量得到纠正。 2真性红细胞增多症诊断指标 当HCT大于0.7,RBC为(7-10)X1012L, Hb大于180gL,即可诊断。,临床意义,3红细胞平均指数计算的基础数据 红细胞平均值(MCV、MCHC)可用于贫血的形态学分类。 4血液流变学指标 HCT增高表明红细胞数量偏高, 全血黏度增加,严重者表现为高黏滞综合征, 微循环障碍、组织缺氧。 HCT与其他血液流变学指标联合应用,可对一些血栓前状态进行监测。,10,任务五 红细胞平均指数计算,红细胞平均容积(mean corpuscular volume,MCV),指每个红细胞平均体积的大小,以飞升(f1)为
4、单位; 红细胞血平均红蛋白含量(mean corpuscular he-moglobin,MCH),指每个红细胞内平均所含血红蛋白的量,以皮克(pg)为单位;红细胞平均血红蛋白浓度(mean corpuscular Hemoglobin concentration,MCHC),指平均每升红细胞中所含血红蛋白浓度(gL)。,(1)MCV=每升血液中红细胞体积/每升血液中红细胞个数=Hct/RB(f1)(2)MCH=每升血液中血红蛋白含量/每升血液中红细胞个数=Hb/RBC(pg)(3)MCHC=每升血液中血红蛋白含量/每升血液中红细胞比容= Hb/ Hct,11,检测原理 1手工法 同时计数红细
5、胞,测定血红蛋白和血细胞比容,计算出红细胞3个平均指数。例:RBC为3.50X1012L,Hct为0.36,Hb为120g/L Hct 0.36MCV (fl) 103(fl) RBC 3.50X1012L Hb HbMCH (pg), MCHC( gL ) RBC Hct,检测原理2血液分析仪 能直接导出MCV的值,再结合仪器直接测定的RBC和Hb,计算出MCH和MCHC MCHHbRBC, MCHCHb(RBCMCV)。,14,参考值,临床意义,作为贫血的红细胞形态学分类,红细胞体积分布宽度,(一)检测原理红细胞体积分布宽度(RDW)反映样本中红细胞体积大小的异质程度,即反映红细胞大小不等
6、客观指标,常用变异系数(CV)表示,由血液分析仪的红细胞体积直方图导出。(二)方法学评价RDW是对红细胞体积大小的评价,比血涂片红细胞形态大小的观察更为客观和准确。(三)质量控制RDW异常受样本中红细胞碎片、红细胞凝集、双相性红细胞的影响。 (四)临床意义1.贫血形态学分类:根据红细胞形态大小不同,将贫血分成6类,红细胞体积分布宽度,1983年由Bessman提出的新贫血分类法对贫血病因鉴别诊断具有更大意义。MCV和RDW联合检测对贫血形态学鉴别诊断灵敏度为86.7%100%,特异度为83.4%100%。 2.作为缺铁性贫血(IDA):筛选诊断和疗效观察的指标:RDW增大对IDA的诊断灵敏度达
7、95%以上,特异性不强,可作为IDA的筛选诊断指标。当铁剂治疗有效时,RDW开始增大,随后逐渐降至正。3.鉴别缺铁性贫血和-珠蛋白生成障碍性贫血:RDW增大对IDA的诊断灵敏度达95%以上,特异性不强,可作为IDA的筛选诊断指标。当铁剂治疗有效时,RDW开始增大,随后逐渐降至正常。,18,任务六 网织红细胞计数,网织红细胞(reticulocyte,Ret)是晚幼红细胞脱核后到完全成熟红细胞间的过渡细胞胞质中残存嗜碱性物质核糖核酸(RNA),经煌焦油蓝等活体染色后,嗜碱性物质凝聚成蓝黑色颗粒,连缀成线,线连接成网。属于尚未完全成熟的红细胞(当嗜碱性物质消耗殆尽后才被视为成熟红细胞),一般为89
8、.5m。,19,20,检测原理 1.普通光学显微镜法 活体染色(新亚甲蓝或煌焦油蓝)的碱性着色基团 网织红细胞RNA的磷酸基(带负电荷) RNA胶体间的负电荷减少而发生凝缩, 蓝色的点状、线状或网状结构 , 显微镜下计数1000个红细胞中所占的网织红细胞数,以百分比或分数数表示。,检测原理 流式细胞仪法2仪器法 网织红细胞计数仪 血液分析仪法。 荧光染料与网织红细胞中RNA结合, 发出特定颜色的荧光进行RNA定量精确计数网织红细胞占成熟红细胞的百分数(Ret)。将网织红细胞分成高、中、低荧光强度网织红细胞 比率(HFR 、MFR、 LFR)并计算网织红细胞其他参数。,血液分析仪法 提供与网织红
9、细胞相关的多个参数, 网织红细胞绝对值、 网织红细胞百分比、 网织红细胞平均体积、 网织红细胞血红蛋白分布宽度、 网织红细胞血红蛋白浓度、 网织红细胞平均血红蛋白浓度、 LFR、MFR、HFR、 网织红细胞成熟指数。,24,【质量保证】 以手工计数法为重点。 1染料选择,【质量保证】 2正确辨认网织红细胞 外周血中网织红细胞主要为型,凡含有2个以上网织颗粒的红细胞均应计为网织红细胞。 3网织红细胞计数方法 (1)Miller窥盘: (2)显微成像系统:计算机和细胞形态分析软件, HFR:粗颗粒堆积成网状。 MFR:粗颗粒在10个以上,或细小颗粒超过15个。 LFR:细胞内含15个以下细小颗粒,
10、网织红细胞百分数: 成人和儿童:0.0050.025 新生儿: 0.020.06网织红细胞绝对数: 成人和儿童: (2484)X109L,参考值,临床意义,1评价骨髓增生能力,判断贫血类型。(1)网织红细胞增多:表示骨髓造血功能旺盛, 各种增生性贫血 (2)网织红细胞减少:常见于再生障碍性贫血 (3)鉴别贫血:,临床意义,2评价疗效 (1)观察贫血疗效:贫血随访缺铁贫或巨幼贫有效治疗后,23d后Ret开始上升,710d达到最高峰(约10),2周后渐降至正常。 (2)骨髓移植后监测骨髓造血恢复:骨髓移植后第21天,如Ret大于15X109L,常表示无移植并发症;若骨髓开始恢复造血功能,首先HFR和MFR上升,其次为网织红细胞计数值上升。,临床意义,3放疗和化疗的监测 指导临床适时调整治疗方案,避免造成严重的骨髓抑制。机体接受放、化疗后,如出现骨髓抑制,早期HFR和MFR降低,而后网织红细胞数值降低;停止放、化疗,骨髓功能恢复后,这些指标依次上升。,临床意义,