1、毕业论文开题报告食品科学与工程水产品中产组胺微生物的分离与生物学特性一、选题的背景与意义自从中国加入世界贸易组织，对外开放制度不断加强，大力发展对外贸易，特别是发展出口贸易，其中水产品的出口也不断增加。但是水产品的安全问题，一直是制约其出口的主要瓶颈。这主要是由于水产品卫生指标控制不到位及国内外对水产品微生物控制的栅栏技术应用研究缺乏充分的微生物分类鉴定研究证据，从而不能从根本上解决产品卫生安全问题和建立有效的控制方法。组胺是水产品贮藏或加工过程中体内组氨酸经过生物化学过程（部分消化酶分解）和外源性微生物污染后产生的蛋白酶类（蛋白酶主要是脱羧酸酶类）降解鱼肉组织后产生的对产品品质（感官指标）劣
2、化或人体有一定毒害的化学物质。海产鱼类如鲐鱼、鲣鱼、青鱼、沙丁鱼、竹夹鱼、金枪鱼、秋刀鱼、沙丁鱼、朝鲜方鱼等由于体内含有组氨酸，被组胺无色杆菌，摩根氏变形杆菌等微生物污染后，会产生一定数量的组胺类成分。而组胺是人体引起炎症和过敏性疾病的主要物质，它可使病人支气管收缩和粘液分泌，患者接触变性原后，血清和支气管肺泡灌洗液中可见组胺水平增高。严重的组胺中毒是由于食用含有一定数量组胺的某些鱼类以及其他动物而引起的过敏性食物中毒。由于组胺产生的事物过敏，甚至中毒的现象屡见不鲜。迄今为止，国内对组胺控制研究一直不够深入，大部分仅仅局限于测定组胺含量的层面上，只有少数人对组胺的形成和控制做了研究。据文献报道
3、,对水产品中组胺的产生机理，以及影响组胺产生的因素（包括温度、PH值、贮藏时间、含盐度、供氧量以及添加剂）分别做了概述。另外，还有文献报道，不同种类的海鱼在不同发酵温度、不同腐败程度、以及不同NACL含量的条件下，对组胺产生规律做了详细研究，但并未对产组胺菌进行鉴定，并给出相应控制方法。本课题就从微生物角度研究入手，采用现代微生物分离鉴定技术，找到特定水产品中产生组胺的主要微生物，研究它们的生理生化特性、产酶条件，脱羧酶酶学特性，组胺扩散机制等，通过分析所得数据，再探讨它们之间的相互关系，制定出相应控制方法，为生产实践中组胺的控制提供技术支持。二、研究的基本内容与拟解决的主要问题1、水产品鱼类
4、原料的特性研究鱼肉PH值、水分活度、盐分的测定。2、产组胺脱羧酶微生物的研究（1）、产组胺微生物的单菌形态、分离、鉴定、数量、以及生长条件的研究。（2）、产酶活性研究根据产组胺含量间接反映该微生物的产酶活性。3、产组胺微生物的生长环境研究模拟产组胺微生物的生长环境（温度、盐分、PH值），测定对产组胺含量的影响。三、研究的方法与技术路线1、原料特性研究PH值、水分活度、盐分。2、产酶菌株的分离利用筛选培养基对原料进行产组胺菌株的进行初步筛选。菌株鉴定首先利用常镜检、生理生化等常规方法鉴定菌株基本特性。3、对初步筛选得到的菌种进行分类，取12组进一步确认，判断是否产生组胺，并且得到单个微生物菌种。
5、用高效液相色谱法确定组胺的产生将筛选得到的菌种接到液体培养基（含有组氨酸和胰酶大豆肉汤）上，与空白对照，判断是否是产组胺微生物。4、产酶活性研究将分离的不同菌株接种到相同培养基上，在同一条件下培养，并跟踪监测它们的组胺含量。根据产组胺含量的多少，间接判断不同菌株产组胺脱羧酶的活性大小。测定组胺含量的方法利用GB/T5009452003水产品卫生标准和高效液相色谱法。5、菌株的产酶条件分别对不同储藏温度、含盐量、PH值下，一定时期内，对鱼体内组胺含量进行跟踪检测。作出不同条件下，组胺含量的曲线图。研究技术路线图如下试验样品初步筛选得到产组胺菌种鉴定生理生化指标菌体及其菌落形态特征组胺含量变化水产
6、品中产组胺微生物分离与生物化学特性高效液相色谱法确定组胺的产生得到产组胺微生物单个菌种温度盐分PH根据菌落形态，经检验与生理生化结果分类，并分组四、研究的总体安排与进度201010820101130查阅资料，完成开题报告、文献综述、开题论证；20101212011420外文翻译2篇，完成实验研究，对分离出的微生物进行鉴定，以及其特性研究；20114212011510整理数据、书写论文，完成答辩。五、主要参考文献1LEHANEL,OLLEYJHISTAMINEFISHPOISONINGREVISITERJJFOODMICROBIOL,2000,581372刘霞,陈旭峰,乔莉,等食用马鲛鱼致急性组
7、胺中毒28例报告J江苏预防医学,2004,15427283张蕾蕾,何平食用炮弹鱼致组胺中毒31例报告J中国热带医学,2002,245134TAOZ,NAKANOT,YAMAGUCHIT,ETALPRODUCTIONANDDIFFUSIONOFHISTAMINEINTHEMUSCLEOFSCOMBROIDFISHESJFISHERIESSCIENCE,2002,68139413975曾艳,周朝虹58例扁舵鲣鱼所致组胺中毒的急救J中国热带医学,2009,947047056MOHANCO,RAVISHANKARCN,SRINIVASAGOPALTK,ETALBIOGENICAMINESFORMATI
8、ONINSEERFISHSCOMBEROMORUSCOMMERSONSTEAKSPACKEDWITHO2SCAVENGERDURINGCHILLEDSTORAGEJFOODRESEARCHINTERNATIONAL,2009424114167CHANGSC，KUNGHF，CHENHC，ETA1DETERMINATIONOFHISTAMINEANDBACTERIALISOLATIONINSWORDFISHFILLETSXIPHIASGLADIUSIMPICATEDINAFOODBORNEPOISONINGJFOODCONTROL,2008,1916218ARAIT,IKEUCHIY,KISHIM
9、OTOY,ETALCONTAMINATIONOFHISTAMINEFORMINGBACTERIAINRAWFISH,PROCESSEDFISHANDICEWATERFORFISHSTORAGEONMARKETJANNUALREPORTTOKYOMETROPILITANINSTITUTEOFPUBLICHEALTH,2007,582452469陶志华,佐藤实海水中组胺菌的分离及其理化性质分析J生物技术,2009，191424410MANUELAVDASILVA,OLIVIAPINHO,ISABELFERREIRA,ETALPRODUCTIONOFHISTAMINEANDTYRAMINEBYBAC
10、TERIAISOLATEDFROMPORTUGUESEVACUUMPACKEDCOLDSMOKEDFISHJFOODCONTROL,2002,1345746111TSAIYH,LINCY,CHIENLT,ETALHISTAMINECONTENTSOFFERMENTEDFISHPRODUCTSINTAIWANANDISOLATIONOFHISTAMINEFORMINGBACTERIAJFOODCHEMISTRY,2006,98647012陶志华,张宏梅,佐藤实鲭鱼鱼肉中组胺菌的分离及其理化性质分析J食品科学,2009，19133133213KIMURAB,KONAFAYAY,FUJIITHIST
11、AMINEFORMATIONBYTETRAGENOCOCCUSMURIATICUS,AHALOPHILICLACTICACIDBACTERIUMISOLATEDFROMFISHSAUCEJFOODMICROBILOGY,2001,70717714王永根,沈永伟,王剑波水产品中组胺检测方法的探讨J职业与健康,2007,4,23865715朱文慧,周德庆分光光度法测定鱼罐头中组胺的方法改进J食品科学,2008822322916金安宝水产品中组胺测定方法的改进J中国卫生检验杂志,2007,17114915017商军,华贤辉,昊剑平,等鱼粉中组胺测定方法的改进J中国饲料,2007,20374218何功
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13、RICFOODCHEM，1999，4751961196423蔡春平,王丹红,陈晓华,等高效毛细管电泳法快速测定鱼粉中的组胺含量J,2004,2330130324LIAOWENTA,PAEKHAN,MABUNICLAYTON,ETALUSEOFCAPILLARYELECTROPHORESISWITHUVDETECTIONASASCREENINGMETHODTODETERMINEHISTAMINEINFISHSAMPLESJJOURNALOFCHROMATOGRAPHY,199985354154425李佐卿,谢东华,王宇,等高效液相色谱荧光检测器快速测定水产品中的组胺J光谱实验室,2000,9559259526PREVIATIM,RASPADORIA,BERTOLASOL,ETALDETERMINATIONOFHISTAMINEINTHEWHOLEBLOODOFCOLONCANCERPATIENTSJJCHROMATOGRBANALTECHNOLBIOMEDLIFESCI,2002,7802331339
