1、毕业论文文献综述生物工程菊酯类农药微生物降解菌的筛选及初步鉴定研究概况摘要简单介绍了拟除虫菊酯农药的应用及其对水产养殖环境的危害。重点综述了国内外菊脂类农药降解菌的筛选及鉴定方面的研究进展,阐述了生物修复对于减少农药危害的重要性。提出了课题研究的发展思路。关键词拟除虫菊酯;降解菌;水产养殖;生物修复正文拟除虫菊酯农药是一类结构中含有苯氧基环丙烷酯的农药,主要包括三氟氯氰菊酯、溴氰菊酯、甲氰菊酯等1。开发于20世纪70年代出来,主要用于茶树、蔬菜、果树、棉花、花卉、林木及卫生害虫的防治等,为杀虫剂中第三大类,是仅次于有机磷、氨基甲酸酯的一类杀虫剂,此类农药对农作物害虫高效、低毒的特性,及对环境稳
2、定和降解速度慢的特点2,对昆虫有特异的杀伤力,对哺乳动物有中等毒性,对鱼类等水生生物高毒,仅10NG/L拟除虫菊酯就能导致河流或湖泊中的无脊柱动物全部死亡35。1菊脂类农药对水产养殖环境的影响拟除虫菊酯类农药不仅广泛应用于农作物中,还可用于渔业生产上杀灭寄生虫6拟除虫菊酯中只有氟氯氰菊酯又名百树得、百树菊酯、氟氰戊菊酯在渔业生产中被禁用7,但该类化合物具有亲脂性和环境持久性,能直接进入鳃和血液中,对鱼类产生强烈的毒性,若农药蓄积在水产品中,将对食用的消费者的健康造成影响。市售养殖水产品不同程度存在拟除虫菊酯类农药污染8。蒋长征、戎江瑞等9采用GB/T5O091622003动物性食品中有机氯农药
3、和拟除虫菊酯多组分残留量的测定的方法对宁波市养殖水产品拟除虫菊酯类农药残留进行调查,结果氯氰菊酯检出范围ND99014MG/KG,超标率30;氰戊菊酯检出范围ND03800MG/KG,超标率13,溴氰菊酯检出范围ND36340MG/KG,超标率09。鱼、虾、蟹类中以虾类中拟除虫菊酯超标率最高。2菌株的分离、筛选及降解性能的研究一直以来,用微生物来降解除草剂、杀菌剂、石油、塑料、多环芳烃等,对受污染的土壤和水体的生物进行修复,是环境科学研究的热点。而用微生物降解方法解决农药残留问题的研究,却是个较新的领域。由于农药残留所带来的食品安全问题越来越受到人们的关注,用微生物降解方法解决农药残留问题可为
4、绿色食品生产提供一条新的途径。可降解农药的微生物的研究是国内外的研究热点,随着研究的发展,被发现的降解农药的微生物种类不断增多,对其降解机理的了解也日趋深入,降解效果稳定也日趋提高。国内已报道过多种具有降解菊酯类农药的能力的微生物,如红球菌属RHODOCOCCUSSP芽孢杆菌属BACILLIUSSP、假单胞菌属PSEUDONOMONASSP等1011。有关农药微生物降解的研究,在对有机磷和有机氯的降解方面的研究较多,而对于菊酯类可降解菌的研究,主要在农作物中,对于水产环境中的研究比较少。目前对于菊脂类农药微生物降解菌的研究主要集中在从多种农作物或土壤中筛选菊脂类农药降解菌以及可降解不同种类菊脂
5、类农药的微生物和其降解机理的研究。张建云12等通过富集筛选的方法,从农药污染的土壤中筛选到1株氟氯氰菊酯降解菌,并对其进行了分类鉴定和降解性能的初步研究,为进一步利用该菌对氟氯氢菊酯农药污染的治理奠定基础。张丽萍等13从农药厂废水排放口附近的污泥中分离到1株能降解氯氰菊酯的细菌LQ3,在有酵母粉、蛋白胨、葡萄糖等营养物质存在的条件下,以共代谢方式降解氯氰菊酯,5D内对20MGL氯氰菊酯的降解率达到721。该菌株还能降解功夫菊酯、甲氰菊酯、联苯菊酯和溴氰菊酯。王兆守等14分离出1株能以拟除虫菊酯类杀虫剂为唯一碳源和能源的降解菌WL0JL5,经鉴定为阴沟肠杆菌,该菌对100MGL的联苯菊酯、甲氰菊
6、酯和氯氰菊酯的降解率分别5243、5076和5689,对有机磷农药也有一定的降解能力。廖敏15等将两株可同时降解联苯菊酯、甲氰菊酯、氯氰菊酯的高效菌株M6R9和M5R1进行单一菌和混合菌对比实验,发现单菌及混合菌对联苯菊酯、甲氰菊酯、氯氰菊酯的降解率均与接种量OD呈正相关,且混合菌对联苯菊酯、甲氰菊酯、氯氰菊酯的降解率分别比单一菌M6R9和M5R14提高25、34、23和145、146、155,半衰期分别缩短81H、148H、131H和403H、507H、464H,表明混合菌对联苯菊酯、甲氰菊酯、氯氰菊酯的降解存在协同作用,即混合菌可提高3种菊酯类农药残留的去除率。3降解菌的鉴定目前,国内外很
7、多有关农药残留降解菌研究的报道,但对拟除虫菊酯类农药的降解菌报道相对较少。国外报道的菌株有蜡状芽孢杆菌属BACILLUSCEREUS1619等一些菌,而国内则集中在产碱菌属ALCALIGENESSP的一株菌2022。许育新等23从农药厂污泥中分离到一株降解氯氰菊酯的放线菌命名为CDT3,并对该菌进行了鉴定,研究了其生理特性。结果表明,CDT3能以共代谢的方式降解氯氰菊酯,经16SRDNA序列分析,鉴定为红球菌属RHODOCOCCUSSP。生理生化特征革兰氏染色阳性,不能发酵葡萄糖产酸,严格呼吸型代谢,氧化酶阴性,接触酶阳性,VP反应阴性,甲基红反应阴性,不能利用淀粉,可液化明胶,还原硝酸盐到亚
8、硝酸盐,可氧化乙醇到乙酸。张建等24通过对污泥样品中的微生物分离和纯化,得到一株功夫菊酯降解菌GFL。GF1在LB培养基平板上菌落乳白色、圆形、不透明、边缘整齐、表面隆起、湿润光滑,培养48H后可产生血红色色素。菌体呈长杆状,周生鞭毛。其生理生化结果如下革兰氏染色阳性,甲基红和VE反应阳性,过氧化氢酶和接触酶测定阳性,氧化酶测定阴性,不能利用硝酸盐和淀粉,能水解明胶,不能利用柠檬酸盐,吲哚实验呈阳性,蔗糖、葡萄糖发酵不产气。4小结与展望对于水产养殖环境中的菊酯类农药微生物降解菌筛选的实验可参照微生物学实验25和常见细菌系统鉴定手册,从水产养殖环境中采集水样和沉积物,用2216E培养基培养并进行
9、筛选和初步鉴定26。生物修复是降解农药的一种有效手段,具有高效、安全、费用低等优点。由于菊脂类农药的广泛使用,对水产环境不可避免的会造成一定的影响。降解菌可用于降解、去除拟除虫菊酯类农药残留27。减少或去除菊酯类农药对鱼类、蚌类等水生生物的危害。尽管农药降解菌运用于水产环境比较少,但随着水环境污染引起的水产品安全质量问题越来越受到人们的关注,这方面的研究将会得到更好的发展。参考文献1邹明强,杨蕊,金钦汉,等农药与农药污染大学化学,2004,19(6)25342GRANTRJ,BETTSWBBIODEGRADATIONOFTHESYNTHETICPYRETHROIDCYPERMETHRININU
10、SEDSHEEPDIPJAPPLIEDMICROBIOLOGY,2003(36)1731763COLLINSP,CAPPELLOSCYPERMETHRINTOXICITYTOAQUATICLIFEBIOASSAYSFORTHEFRESHWATERPRAWNPALAEMONETESARGENTINESJARCHENVIRONCONTAMTOXICO,2006,5179854MANNAS,BHATTACHARYYAD,BASAKDK,ETA1SINGLEORALDOSETOXICITYSTUDYOFACYPERMETHRININRATSJINDIANJPHARMACO,2004,36(1)2528
11、5翟良安,姚爱侵,赵小春,等溴氰菊酯对鱼类毒性的研究J淡水渔业,1990(4)10136张征,李今,梁威,等拟除虫菊酯杀虫剂对水生态系统的毒性作用J长江流域资源与环境,2006,15(1)1251297温学,等常用渔药及各类养殖禁药J农家之友,2007(3)45468王朝辉,尹伊伟,林小涛,等拟除虫菊酯农药对水生态系统的生态毒理学研究综述J暨南大学学报自然科学版,2000,21(3)121279蒋长征,戎江瑞,等宁波市养殖水产品拟除虫菊酯类农药残留调查卫生研究,2007,36(6)69269310MALONYSE,SMITHARWPURIFICATIONANDPRELIMINARYCHARAC
12、TERIZATIONOFPERMETHRINASEFROMPYRETHROIDTRANSFORMINGSTRAINOFBACILLUSCEREUSJAPPLENVIONMICROBIO1,1993,59(7)2007201311GRANTRJ,DANEILLTJ,BETTSWB,ETA1ISOLATIONANDIDENTIFICATIONOFSYNTHETICPYRETHROIDDEGRADINBACTERIAJJAPP1MICROBIOL,2002,9253454012张建云,崔树军,武秀琴,等1株氟氯氰菊酯降解菌GZ3的分离和鉴定安徽农业科学,2010,38(13)66356636,664
13、013张丽萍,徐莲,吴莹,等氯氰菊酯降解茵的筛选鉴定及其降解特性研究J生态与农村环境学报,2009,25(3)697214王兆守,林淦,李秀仙,等拟除虫菊酯降解菌的分离、筛选及鉴定J福建农林大学学报自然科学版,2003(2)17618015廖敏,张海军,马爱丽,等两株拟除虫菊酯类农药高效降解茵混合降解性能研究J农药学学报,2009,11(4)47247916PONNALARAGHAVENDRASCREENING,SELECTIONANDCHARACTERIZATIONOFPHYTICACIDDEGRADINGLACTICACIDBACTERIAFROMCHICKENINTESTINEJINTE
14、RNATIONALJOURNALOFFOODMICROBIOLOGY,2009,13312913417MALONYSE,MAULEA,SMITHARWAPPLENVIRONMICROBIOL,1988,54112874287618MALONYSE,MAULEA,SMITHARWARCHMICROBIO1,1992,15828228619MALONYSE,MAULEA,SMITHARWAPPLENVIRONMICROBOL,1993,5972007201320虞云龙,宋凤鸣,郑重,等一株广谱性农药降解菌的分离与鉴定J浙江大学学报,1997,23(2)11111521虞云龙,盛国英,傅家谟,等杀灭
15、菊酯的微生物降解及酶促降解J环境科学,1997,18(2)5822虞云龙,陈鹤鑫,樊德方,等拟除虫菊酯类杀虫剂的酶促降解J环境科学学报,1998,18(2)20821123许育新,戴青华,李晓慧,等氯氰菊酯降解菌卡朱CDT3的分离鉴定及生理特性研究J农业环境科学学报,2004,23(5)95896324张建,张振华,黄星,等功夫菊酯降解菌GF1的分离鉴定及其降解特性研究J土壤SOILS,2009,41(3)45445825赵斌,何绍江,等微生物学实验M北京科学出版社,200219021026东秀珠,蔡妙英,等常见细菌系统鉴定手册M北京科学出版社,200124239827LAZAROELEUTERIOBIODEGRADATIONSTUDIESANDSEQUENCINGOFMICROCYSTINLRDEGRADINGBACTERIAISOLATEDFROMADRINKINGWATERBIOFILTERANDAFRESHWATERLAKEJTOXICON,2010,55314341442