1、临床微生物学检验,湖北文理学院医学院李智山,Preface绪论,掌握有关微生物及微生物学的概念，了解微生物学的发展简史。 教学内容：一、微生物与微生物学二、医学微生物学的发展简史三、临床微生物学检验,教学目的：,SARS Severe Acute Respiratory Syndrome,AIDS：Acquired Immune Deficiency Syndrome,乙肝(Hepatitis B)是危及亚洲人民生命的致命杀手之一,全世界有3.5亿慢性乙肝病携带者，其中75在亚洲,微生物（Microorganism） ：是一群个体微小，结构简单，肉眼不能直接看到，必须借助显微镜放大数百倍至数千
2、倍才能观察到的微小生物的总称。微生物学（Microbiology）是生物学的一个分支，是研究微生物的类型、分布、形态结构、生命活动及规律、遗传、进化以及与人类、动物、植物等相互关系的一门科学。,Department of Microbiology, Hebei North University,微生物的分类,1.非细胞型微生物 无典型细胞结构，无产生能量的酶系统，只能在活细胞内生长增殖。核酸类型为DNA或RNA。病毒属之。2.原核细胞型微生物 核呈环状裸DNA团块结构，无核膜、核仁。细胞器很不完善，只有核糖体。DNA和RNA同时存在。分为古生菌（archaea）和细菌（bacterium）二大
3、类。细菌的种类繁多，包括细菌、支原体、衣原体、立克次体、螺旋体和放线菌等。3.真核细胞型微生物 细胞核分化程度高，有核膜和核仁。细胞器完整。真菌属此类。,微生物的三种类型特点,原核生物,真核生物,非细胞型微生物,非细胞型微生物,腺病毒,乙肝病毒,噬菌体,流感病毒,HIV,Ebola病毒,原核细胞型微生物,螺旋体,立克次体,支原体,衣原体,真核细胞型微生物,单细胞型真菌,多细胞型真菌,微生物与人类的关系,微生物无处不在无菌操作多数对人有益正常菌群（normal flora) 存在与人体体表与体内与外界相同腔道与黏膜中对人体无致病作用的细菌称为正常菌群。但当机体体抗力低下时，那些平时对人体不致病的
4、细菌表现对人致病，被称为条件致病菌(conditioned pathogen)。少数对人有害病原微生物 pathogenic microorganism 能引起人类或动植物发生疾病的微生物称为病原微生物,是医学微生物的研究主体。,医学微生物学（medical microbiology)： 是研究与医学有关的病原微生物的生物学特性、致病性、免疫性，以及特异性诊断和防治措施的学科，以控制和消灭感染性疾病和与之有关的免疫损伤，以达到保障和提高人类健康水平的目的。,微生物学发展简史,经验微生物学时期实验微生物学时期现代微生物学时期,微生物在地球上存在了30多亿年，人类并不知道一直和微生物生死共处我国公
5、元2000多年前的夏禹时代就有了仪狄造酒的传说。许多疾病是由微生物引起的：宋朝刘真人提出肺痨由虫引起。,微生物学的经验时期,Department of Microbiology, Hebei North University,微生物学的经验时期,古人虽未观察到具体的微生物，但早已将微生物知识用于工农业生产和疾病防治之中。 制醋、酒、酱、沤粪积肥等。 每种传染病由独特的活物所引起；传染病的传播有直接、间接和通过空气等数种途径；鼠疫的流行环节等。 将水煮沸后饮用；病人的衣服蒸过再穿就不会感染到疾病。,古代人早已认识到天花是一种烈性传染病。已康复者去护理天花病人，则不会再得天花，我国祖先开创了预防天
6、花的人痘接种法。是我国预防医学上的一大贡献。,实验微生物学时期,第一个通过自制显微镜观察到细菌的人荷兰科学家列文虎克(Antony van leeuweenhoek),列文虎克的显微镜,列文虎克和他自制的显微镜 （放大266倍）,列文虎克观察到的微生物,发明巴氏消毒法的法国科学家巴斯德（Louis Paster),微生物生理学时代医学微生物成为一门独立的学科,细菌性传染病病原的证实,郭霍（Robert Koch),创立了固体培养基，使许多病原体相继被发现。发现了肺结核病的病原体结核杆菌，这是当时死亡率极高的传染性疾病，因此郭霍获得了1905年的诺贝尔奖；提出了证明某种微生物是否为某种疾病病原体
7、的基本原则郭霍原则。特殊的病原菌应在同一疾病中查见，在健康人中不存在；该特殊病原菌能被分离培养得纯种；该培养物接种至易感动物，能产生同样病征自人工感染的实验动物体内能重新分离得该病原菌纯培养,由于郭霍在病原菌研究方面的开创性工作，自19世纪70年代至20世纪20年代成了发现病原菌的黄金时代，所发现的各种病原微生物不下百余种，其中还包括植物病原细菌。,病毒的发现,1886年，在荷兰工作的德国农艺学家迈尔（AMayer）把患有花叶病的烟草植株的叶片加水研碎，取其汁液注射到健康烟草的叶脉中，可使大多数健康的烟草植株染病，首先证明烟草花叶病具有传染性。麦尔认为烟草花叶病是由细菌引起的。,1892年俄国
8、的伊凡诺夫斯基（Ivanowski）不仅重复了麦尔的试验，而且进一步发现，患病烟草植株的叶片汁液，通过细菌过滤器（细菌滤器细菌所不能通过的过滤器，其滤孔孔径小于细菌的大小，可以将液体中存在的细菌除去 ）后，滤液还能引发健康的烟草植株发生花叶病。这种现象可以说明，病原体不是细菌。但生活在巴斯德的细菌致病学说的极盛时期，伊凡诺夫斯基未能做进一步的思考，从而错失了一次获得重大发现的机会。,Ivanowski,滤膜,滤液致病,细菌滤器,滤膜,病原物质,滤膜上物质不致病,1898年，荷兰微生物学家贝杰林克（Beijerinck）重复和肯定了伊凡诺夫斯基的实验结果并且证明引起烟草花叶病的致病因子是一种不能
9、用普通光学显微镜看到，也不能在细菌培养基上生长，而能够通过细菌滤器，并且只能在活的植物体组织中繁殖的有机体，是一种新的感染性物质。贝杰林克把这种有别于细菌的有机体称为 “病毒”。贝杰林克打破了当时人们普遍信奉的疾病菌源说的传统观念，是人类认识病因过程中的一次重大突破。,免疫学的兴起,爱德华琴纳,于1796年应用研制的牛痘苗预防天花是人类运用人工自动免疫方法预防疾病的开始。,德国学者贝林格 (Emil Adolf von Behring,18451917年) 在1891用含有白喉抗毒素的动物免疫血清成功治愈一白喉女孩，此为被动免疫的先例。,化学疗剂的发明及抗生素的发现,1929年英国人弗莱明 (
10、Alexander Fleming,18811955年) 发现青霉菌产物青霉素能抑制金黄色葡萄球菌的生长。1940年Florey等提取出青霉素的结晶纯品，并证实了其临床应用价值，给感染疾病的临床治疗带来了一次大的革命。青霉素的发现带动了抗生素的寻找和生产。,36,现代微生物学时期,近30年来，随着分子生物学等学科的发展，微生物学得到极为迅速的发展。,（1）新病原微生物的发现：军团菌，幽门螺杆菌，人类免疫缺陷病毒(HIV)， 朊粒(prion)、SARS冠状病毒等。,（2）微生物全基因组的研究 1995年，第一个细菌流感嗜血杆菌的全基因组DNA测序完成。目前已有150多种细菌完成测序。我国先后完
11、成6种细菌测序工作。（3）新型疫苗的研究 脑膜炎 乙肝 百日咳 破伤风 白喉（4）诊断技术快速发展 DNA杂交 PCR 氨基酸序列分析 基因探针 等 （5）新药的研究有突破性进展,目前，由病原微生物引起的多种传染病仍严重威胁人类的健康，传染病发病率和死亡率在所有疾病中居第一位。,1）新现和再现的微生物感染不断发生；2）迄今仍有一些感染性疾病的病原体未发现；某些病原体致病和免疫机制还未阐明；3）大量广谱抗生素滥用，使许多菌株发生变异，导致耐药性产生，人类健康受到新的威胁；4）某些微生物快速变异给疫苗设计和治疗造成了很大障碍。,微生物学发展中的重大事件,微生物学发展中的重大事件,临床微生物学：属于
12、医学微生物学的范畴。又称诊断微生物学，是研究病原微生物检查及微生物与宿主相互作用的一门医学专业和应用学科。,临床微生物学检验:是检验医学中的重要专业课之一，它是利用微生物学的基础理论、技能、和临床微生物学的基本知识，掌握各类与临床有关的微生物的特性，通过系统的检验方法，及时、准确地对临床标本做出病原学诊断和抗微生物敏感性报告，为临床感染性疾病的诊断、治疗和预防提供科学依据。,临床微生物学的任务,临床微生物学的任务 研究感染性疾病的病原体特征 提供快速准确的病原学诊断 指导临床合理使用抗生素 对医院感染进行监控,临床微生物检验的思路和原则,确保分析前质量全面了解机体正常菌群保证检验质量微生物学定
13、性、定量和定位分析加强与临床联系,临床微生物检验的现状、发展和展望,感染性疾病的现状：易感人群不断增加新病原体不断出现、已控制的病原体死灰复燃感染因子在非感染性疾病中的作用越来越明显细菌耐药和医院感染的问题日趋严重,快速诊断方法的进展：改变流程、缩短报告周期：重视涂片检查、实行分级报告制度非培养快速检验：免疫荧光（IF）、放射核素（RIA）、酶联免疫吸附检测（ELISA）、质谱技术（MS）等,分子生物学技术飞速发展：微生物鉴定与分型病原微生物的基因组计划计算机的发展：数字编码技术愿景和展望：微生物检验人员培训知识更新，实验室重新组合，成立病原生物学检验中心，引进现代化、自动化仪器，开展分子生物学检验，生物芯片技术，开展细菌耐药机制研究。,THANK YOU FOR YOUR ATTENTION!,
