1、毕业论文开题报告生物工程产纤维素酶的海洋细菌的筛选及初步鉴定一、选题的背景与意义纤维素酶是一组能够降解纤维素生成葡萄糖的酶的总称。从酶的作用特性出发，纤维素酶可分为2大类碱性纤维素酶和酸性纤维素酶。根据酶的作用方式又可分为3类外切1,4葡聚糖苷酶简称CBH、内切1,4葡聚糖苷酶简称EG和1,4葡萄糖苷酶简称BG纤维素酶在自然界分布极为广泛，昆虫、软体动物、高等植物、细菌、放线菌和真菌都能产生纤维素酶，反刍动物的瘤胃及猪大肠中也有分解纤维素的细菌存在。纤维素酶的应用很广泛，在食品、饲料、医药、纺织、洗涤剂、造纸、能源和中药提取等领域都有广泛的应用价值海洋中盐分较高，所以海洋细菌纤维素酶一般在高盐
2、条件下他仍具有较高的活性，同时还具有耐高温，耐极端PH、可以在室温下长时间保持高活性等特性。这些特性将可以在很大程度上解决工业上的因高温、高盐、强酸或强等使没失活的问题。因此，筛选和研究产纤维素酶的海洋细菌就显得非常必要且有意义。在现今的海洋水产养殖业中，有一些是以海带、海藻、海草等海洋植物为主要饲料，然而以植物性为主的饲料中含有较多的纤维素、半纤维素和果胶等不易消化的和阻碍消化的物质，且植物细胞存在细胞壁，回影响动物对保内营养物质的吸收，因此在饲料中添加纤维素酶可以使海洋动物更好的吸收营养物质并且消化良好。宁波地处海边，水产养殖业发达，海产品种类繁多，并且海洋资源广泛，所以就更有必要也更应该
3、筛选和研究产纤维素酶的海洋细菌。二、研究的基本内容与拟解决的主要问题基本内容1、从实验室已有海洋细菌资源库中进行高产纤维素酶的菌株筛选2、对获得的产酶菌株进行鉴定三、研究的方法与技术路线技术路线菌株活化平板初筛复筛目的菌株鉴定初筛刚果红染色法。在2216E培养基中添加05羧甲基纤维素钠，纤维素酶能催化分解羧甲基纤维素钠。室温培养72H后往培养基中加入01的刚果红溶液，染色1H；弃去废液，加入1MOL/LNACL洗脱，浸泡1H。由于刚果红能与羧甲基纤维素钠发生结合，无法洗脱，所以若菌落周围出现透明圈，则说明该菌株能产纤维素酶。复筛3,5二硝基水杨酸法（DNS）。将初筛得到的菌株接种到羟甲基纤维素
4、钠发酵培养基中培养后得到胞外和胞内的粗酶液，采用DNS法用紫外可见分光光度计与540NM处测定OD值，规定每分钟产生1微克葡萄糖的酶量为一个酶单位（U）。U越大则说明酶活性越强，所对应的菌株也就越优良鉴定16SRDNA法。对复筛得到的菌株16SRDNA进行扩增，再通过测序对菌株进行鉴定四、研究的总体安排与进度201011201012进行文献查阅和资料收集，完成开题报告及任务书，制定具体研究计划和实验方案。2011120112完成2篇外文翻译2011220114正式进入实验的操作阶段2011420115论文撰写、提交并答辩。五、主要参考文献1高伦江，董全，唐春红纤维素酶的研究进展及前景展望江苏食品与发酵,2007,35414172李荣杰纤维素酶高产菌的分离筛选与培养基优化畜牧与饲料科学,2009,30（6）9113韩韫，蔡俊鹏产纤维素酶海洋菌株的筛选及鉴定现代食品科技,2005,21336444孙凯，孟宁，冯琳，李师翁产纤维素酶菌株的筛选鉴定及产酶条件研究食品与科学,2009,2841591625吴琳，景晓辉，黄俊生产纤维素酶的分离刷选及酶活性测定安徽农业科学,2009,3717785578577859
