1、毕业论文开题报告生物技术虎皮鱼PUNTIUSTETRAZONA暴发性死亡超微病理学研究一、选题的背景与意义虎皮鱼（PUNTIUSTETRAZONA）属鲤科，又名四间鱼、四间鲫鱼。原产地马来西亚，印尼苏门答腊岛、加里曼丹岛等内陆水域。它是一种饲养较普遍的鱼种。鱼长57厘米，呈纺锤形。身体匀称，色彩鲜艳，以金黄色做底色，头部、腹部、尾部前端贯有四条竖向黑条纹，随光线角度不同会闪现出金属般的光芒。成鱼的背鳍、胸鳍、腹鳍及尾部的边缘都呈现出亮丽的红色，很有观赏价值。近年来随着人们生活水平的提高，观赏鱼类越来越多的进入人们的日常生活和视线中。虎皮鱼是较重要的观赏鱼类，它美丽的外表和婀娜的形体给人们带来赏
2、心悦目的感觉与心情。虎皮鱼并不原产与中国，所以自它从马来西亚，印尼苏门答腊岛、加里曼丹岛等内陆水域被引进的那一刻起，不利的环境与条件无时无刻不在威胁着它的生存。随着养殖规模的扩大，养殖技术的不完善，病害侵袭的突发性和不确定性，许多地区及专业户遭受了沉重的打击。饲养用水的水温、酸碱度、化学成分、有害物质和溶氧量等常会发生变化。如果这些因素的变化超出了鱼体所能忍受的范围,则虎皮鱼就会发病,甚至死亡。如水太浑浊,溶氧量不足,鱼类就会出现缺氧的浮头现象,时间一长,会因严重缺氧而窒息死亡。有的因光线不足,也会引起鱼体新陈代谢紊乱,体色异常,体表粘液增多,为真菌、寄生虫的粘附寄生提供条件,久而久之就会很容
3、易发生各种病症。生物因素是引起虎皮鱼发病的主要因素，其病原体是各种微生物和寄生虫,它们体积小,肉眼看不见,需借助光学显微镜或电子显微镜放大几百倍或几万倍时才能看见。这些病原体大多数是单细胞生物,构造简单,种类繁多,繁殖速度快。它们引起的鱼病称为传染性病，这是观赏鱼疾病中最常见的。所以，要开发虎皮鱼的观赏价值，正确的养殖、合理的治疗和预防各类病害成为讨论的焦点，而对其病理的分析是这些工作的理论基础。本实验拟对暴发性死亡的虎皮鱼的超微病理学进行研究分别取健康与患病的虎皮鱼或暴发性死亡的虎皮鱼的各组织固定后，经超薄切片于电镜下观察，运用超微病理学的知识，对患病的虎皮鱼切片组织进行分析与研究，并与正常
4、个体进行比较，探讨引起虎皮鱼暴发性死亡的可能原因，查找文献，提出患病原因的几种可能，结合观察到的超微切片及超微病理学的理论内容，从超微病理学水平深入探讨虎皮鱼发病及死亡机制，为将来更深入的研究虎皮鱼的饲养与繁殖奠定坚实的基础，并且，此类研究也可以对虎皮鱼养殖者提供理论指导，具有重要意义。二、研究的基本内容与拟解决的主要问题基本内容1、健康及暴发性死亡或发病虎皮鱼组织的固定及超薄切片的制作2、超薄切片的电镜观察与拍照3、对病理的切片进行分析拟解决的主要问题1、熟悉主要观赏鱼发病原因及对应病症表现2、了解虎皮鱼生活习性及小量养殖技术3、掌握超微病理学理论知识并掌握超薄切片的制作流程4、掌握并会分析
5、所拍到的超微组织照片5、运用超微病理的知识，结合超微组织照片具体分析虎皮鱼的主要组织超微病理变化，探讨其死亡原因。6、思考如何预防关于虎皮鱼的病害三、研究的方法与技术路线研究方法1、取样取暴发性死亡的虎皮鱼，进行解剖，取组织器官用25的戊二醛PBS固定液固定。2、制作切片制作电镜超薄切片3、观察与拍照利用透射电镜对切片进行观察并拍照。4、分析结果运用超微病理学知识对超微病理图片进行分析，探讨细胞水平的致病机理。技术路线四、研究的总体安排与进度样品采集样品解剖样品固定超微病理图片分析超薄切片的制备观察与拍照201011201012查阅资料，撰写开题报告和综述201101201102仪器、药品的准
6、备和各种实验材料的准备201103201104虎皮鱼电镜超薄切片标本的制备虎皮鱼超薄切片电镜观察及拍照整理实验结果，挑选图片并分析图片201004201106外文翻译和论文的撰写五、主要参考文献1李融译观赏鱼养殖宝典M北京中国农业出版社,20032李亚彪观赏鱼产业发展五特点J农家参谋,2007,083王玉堂观赏渔业的发展概况J中国水产,2006,60115174郑宝大,李俊杰，姜景田观赏鱼的疾病防治J齐鲁渔业，2008，25（06）545王广军观赏鱼的一般饲养管理技术J北京水产,2000,120618216叶建生观赏鱼常见疾病的发病因素及其预防J河北渔业,2006,161048497张爱良观赏
7、鱼及其养殖中应注意的问题J特种经济动植物,2003,150718198史成银,王印庚人菱鲜病毒性疾病研究进展J高技术通讯,2003,1809991049孔杰PCR技术在对虾病原检测中的应用J生物工程进展,1994,1406434610李向勇,李娟观赏鱼类疾病及其诊断方法J河北渔业，2007，1111HEJG,WENGSP,ZENGK,ETALEXPERIMENTALTRANSMISSIONPATHOGENICITYANDPHYSICALCHEMICALPROPERTIESOFINFECTIONSSPLEENANDKIDNEYNECROSISVIRUSISKNVJJFISHDISEASES,20
8、02,231412井上洁,池谷文夫,前野幸男等养殖真鲷的虹彩病毒感染症J鱼病研究日本,1992,27192713陈在贤,郑坚川,江育林从患红脖子病甲鱼体分离到虹彩病毒J中国兽医学报,1998,18213513914廖志强福建省主要海水养殖鱼类疾病及其防治J福建水产,2003,1404303415葛慕湘,杨培培,张文香等嗜水气单胞菌对鲤鱼血液指标的影响J河北渔业,2006181016王琳娜嗜水气单胞菌感染导致群体性腹泻的病原学分析J中国卫生检验杂志,2007,17592192217CARLOSR16SRRNAGENESEQUENCEANALYSISOFPHOTOBACTERIUMDAMSELAE
9、ANDMETHEDPCRMETHODFORNESTEDPCRMETHODFORRAPIDDETECTIONOFTHECAUSATIVEANENTOFFISHPASTERUELLOSISJAPPLENVIRONMICROBIOL,1999,65072942294618王雪鹏分子生物学技术在水产动物疾病诊断中的研究进展J水利渔业,2004,24034619LARGODBIMMUNOFLUORESCENTDETECTIONOFICEICEDISEASEPROMOTINGBACTERIALSTRAINVIBRIOSPPIIOFTHEFARMEDMACROALGA,KAPPAPHYCUSALVAREZI
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