1、毕业论文开题报告生物技术壳聚糖对香鱼免疫力生理生化的影响一、选题的背景与意义香鱼PLECCOGLOSSUSALTIVELIS俗称石鱼、油香鱼、海胎鱼，为一年生小型经济鱼类，具有较高的营养价值和药用价值，其肉质细嫩多油，清香无腥，用火焙干呈金黄色，色、香、味俱佳，有它独特的风味，因而自明朝迄今一直被视为食用鱼中之珍品。近几年，随着人们生活水平提高，餐桌经济发展，对香鱼的需求越来越迫切。香鱼在国际市场上也很抢手，是日韩和东南亚诸国所喜食的水产品之一。从20世纪80年代开始，由于工业的发展及人为的滥捕，造成天然香鱼种群日益减少，目前不仅在华南地区如广州、深圳、珠海、佛山及海口等大中城市市场难见踪影，
2、而且在北京、上海等各大城市市场也都无货供应。香鱼现已被国家列为二级保护动物，目前已处于绝迹的状态，市场售价日益攀升。因此，香鱼开发人工养殖其发展前景相当诱人。香鱼是一种极易感病的鱼，主要病害有弧茵病、三代虫病、细菌性鳃病、冷水病和假单胞茵病等。在人工养殖过程中，由于水质一般，养殖密度又很大，因此往往容易爆发病害，而造成重大的经济损失。为了防治病害，养殖户往往采取“短平快”的解决办法，在水体或饲料中加入大量的抗生素，抗生素等化学药物对某些疾病确实有较好的治疗效果，但对病毒引起的疾病并无作用，且容易过量使用甚至滥用，一方面使致病病原体的抗药性不断增加，使机体的细胞免疫、体液免疫功能下降；另一方面，
3、药品在水产品中的残留会直接危害人体健康和我国贝类产品在国际市场上的竞争力。因此，寻求一类天然活性成分代替抗生素来抑制病原微生物生长就显得非常的重要。壳聚糖是甲壳素经化学法处理脱乙酰基后的产物，是一种天然的阳离子生物聚合物，它无毒、无害，安全可靠，易于生物降解，不污染环境，具有抗微生物活性、激活淋巴细胞、调节脂肪代谢、降低血脂和胆固醇等多种生理功能，是一种理想的免疫添加剂。近年来，壳聚糖在水产养殖中软体类、甲壳类、鱼类等得到了广泛的应用，在花鲈、中华鳖、异育银鲫、罗非鱼和暗纹东方鲀实验中,均起到提高存活率、促生长和提升鱼体非特性免疫力的作用，被证实能有效促进水产动物的免疫力，尤其是非特异性免疫力
4、。但国内外目前还没有关于饲料中添加壳聚糖对香鱼生长及非特异性免疫功能影响的报道，因此，选用壳聚糖来研究其对香鱼免疫力的影响具有很大的现实意义。二、研究的基本内容与拟解决的主要问题研究的基本内容；1、壳聚糖对香鱼生长及存活率的影响；2、壳聚糖对香鱼免疫生化指标的影响；3、壳聚糖对香鱼免疫功能的影响；拟解决的主要问题1、香鱼的养殖技术；2、通过查阅资料和预实验，初步筛选壳聚糖的投喂浓度；3、各项生理生化指标测定方法和技术；三、研究的方法与技术路线研究方法（1）前期准备养殖塑料器、捕鱼网等实验用具洗净，用高锰酸钾浸泡一天消毒，然后清水浸泡一天，彻底清洗，备用。（2）实验室养殖香鱼水温控制在1618，
5、养鱼用水必须经过处理，即先静止一天，再用充氧泵充氧过夜备用，每天早、晚换水1次，用网捞出水中杂物，保持水体干净。由于香鱼的活动能力较强，所以养殖密度不宜过大。（3）生长及存活率采用单因子浓度梯度法，投喂壳聚糖，留不投喂组做空白对照，实验组和对照组各设3个平行。投喂30D后，每组随机抽取香鱼测定其体长、体重，计算相对增长率、相对增重率和存活率。（4）免疫指标的测定取香鱼全血用生理盐水稀释200倍后，在NEUBAUER计数板上计红细胞数。取一定量抗凝血加入白细胞稀释液98ML蒸馏水加入冰醋酸2ML和3滴1亚甲兰的试管中，溶解全部红细胞后，取白细胞悬液，低倍镜下计数。采用南京建成生物工程研究所测试盒
6、测定香鱼血清、鳃丝、头肾、肝脏、脾脏和肌肉组织中溶菌酶活性、碱性磷酸酶活性、酸性磷酸酶活性等。技术路线香鱼养殖投喂不用浓度的壳聚糖免疫指标检测生长性能研究免疫器官指标脾脏肝脏溶媒菌的检测酸性磷酸酶碱性磷酸酶红、白细胞数数据分析四、研究的总体安排与进度201009201010查询与论文有关的资料，撰写实验计划，熟悉基本的实验操作。201010201103香鱼的养殖与壳聚糖的投喂；测定香鱼免疫相关的各项免疫指标。201103201105整理数据，撰写论文及准备答辩。五、主要参考文献1李牧壳聚糖的性质及应用研究J科技信息,2007,205253,1052童春,曹振杰,杨玲,秦玉广,孙栋壳聚糖对淡水白
7、鲳生长和非特异性免疫功能的影响J上海海洋大学学报,2010,1922192253那海秋,刘宝忠,张德智壳聚糖的性质、制备及应用J辽宁化工,1997,2441941964胡梦红,王有基壳聚糖对罗非鱼营养生理学作用的研究J广东饲料,2007,16128295周晓苏,王印庚我国海水养殖疾病防控策略J海洋与渔业,2005,817186沈锦玉,刘问,曹铮,尹文林,沈智华,钱冬,吴颖蕾免疫增强剂对中华绒螯蟹免疫功能的影响J浙江农业学报,2004,16125297WANGSH,CHENJCTHEPROTECTIVEEFFECTOFCHITINANDCHITOSANANAGAINSTVIBRIOALGINOL
8、YICSINWHITESHRIMPLITOPENAEUSVANNAMEIJFISHANDSHELLFISHIMMUNOLOGY,2005,191912048ANTHONYLM,RONALDJP,STEWARTWAEFFECTSOFVARIOUSFEEDSUPPLEMENTSCONTANININGFISHPROTEINHYDROLYSATEORFISHPROCESSINGBYPRODUCTSONTHEINNATEIMMUNEFUNCTIONSOFJUVENILECOHOSALMONJAQUACULTURE,2003,2206436539李爱珍,邵秀芝,陈阳楼壳聚糖天然保鲜剂对鲜肉保鲜效果的研究J
9、肉类研究,2009,737399许国焕,吴月嫦,何四旺微生物多糖对罗非鱼生长及非特异免疫功能的影响J水利渔业,2004,241525310张璐,艾庆辉,麦康森,郑石轩肽聚糖对鲈鱼生长和非特异性免疫力的影响J中国海洋大学学报,2008,38455155611肖伟伟,冯琳,刘扬,姜俊,李树红,周小秋壳聚糖对水生动物免疫能力的影响及其可能的调节机制J2010,22354455012苏广宇,刘四新,李从发甲壳素/壳聚糖的研究与应用概况J广东农业科学,2008,2107111,12313ELLISAEIMMUNITYTOBACTERIAINFISHJFISHANDSHELLFISHIMMUNOLOGY,
10、1999929130814杨铭铎,曲志华,李元瑞几丁质几丁聚糖及其衍生物在食品中的作用J食品科学,2001,225979915常青,梁萌青,王家林,孙静壳聚糖对花鲈生长和非特异性免疫力的影响J海洋水产研究,2006,275172216王树芹,周洪琪壳聚糖对异育银鲫溶菌酶和白细胞吞噬活性的影响J上海水产大学学报,2004,13212112517赵玉清,郑兆艳,王冰,阂玉梅壳聚糖复合物的制备与荔枝保鲜研究J大连民族学院学报,2004,61444618SHAHIDIF,ARACHCHIJKV,JEONYJFOODAPPLICATIONSOFCHITINANDCHITOSANSJTRENDSINFOO
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