1、毕业论文开题报告生物技术鳗弧菌卵黄抗体的制备一、选题的背景与意义鳗弧菌是一种对水产鱼类具有严重危害性的细菌病原。目前，鳗弧菌引起的水产养殖动物疾病在世界范围内广泛流行，可感染鱼、虾、鳖类，并常给水产养殖业造成巨大的经济损失。鳗弧菌在危及水产鱼类的同时，也会通过食物链危害人类健康。因此，研究由鳗弧菌等弧菌引起的细菌性疾病的相关治疗方法具有重要的意义。目前在动物细菌性疾病防治上使用抗生素过多，造成药物残留。破坏环境的同时极大的打击了消费者的信心。而近些年来卵黄抗体的发展为弧菌病的治疗提供了良好建议。卵黄抗体，是指从免疫禽蛋中提取出的针对特定抗原的抗体。当用某种抗原免疫产蛋母鸡时，母鸡经免疫应答后，
2、可从其不断产出的鸡卵黄中得到大量均一高效的卵黄抗体IGY。它能预防和治疗多种细菌性和病毒性疾病,无任何毒副作用,在很大程度上可替代抗生素和化学合成药物,同时还具有促生长的作用。卵黄抗体已成为特异性抗体最方便、最廉价的来源，在动物疾病防治上取得了喜人成绩。本实验的目的是借鉴陆生人、畜、禽相关研究的成功经验，以纯培养的鳗弧菌作为抗原，探讨鳗弧菌卵黄抗体的制备技术,并研究其对人工感染的保护作用，以期对水产鱼类的细菌性疾病提供良好的治疗建议，并为水产鱼类的养殖生产提供指导意义。二、研究的基本内容与拟解决的主要问题基本内容1、培养鳗弧菌，制作灭活疫苗。2、用鳗弧菌疫苗对蛋鸡多点注射，经初免和加强免疫后，
3、收集鸡蛋。3、由收集的鸡蛋纯化卵黄抗体4、检测纯化的卵黄抗体效价；拟解决的问题借鉴陆生畜禽病原相关研究的成功经验，经多次免疫制备出抗鳗弧菌的高免鸡蛋，建立简易、高效的由鸡蛋纯化鳗弧菌卵黄抗体的技术，建立ELISA鳗弧菌卵黄抗体的技术。三、研究的方法与技术路线1、取实验室已分离、鉴定后保存的鳗弧菌菌种,经活化后扩大培养，离心沉淀、用PBS清洗后悬浮、计数；2、用甲醛对鳗弧菌进行灭活，经涂板检测确定灭活即为抗原鳗弧菌卵黄抗体的制备；3、选择健康蛋鸡，用上述抗原多点注射免疫，免疫34次；4、收集高免鸡蛋，用水稀释法和硫酸铵沉淀法纯化卵黄抗体；5、用ELISA进行卵黄抗体的效价检测。技术路线四、研究的
4、总体安排与进度201010201012查阅资料，撰写开题报告和综述。201101201102抗原的制备、蛋鸡免疫。201103201104抗鳗弧菌卵黄抗体的纯化和效价检测。201104201105实验数据的整理、分析，撰写论文，结题、答辩。五、主要参考文献1杨菲菲卵黄抗体研究进展及应用J现代农业科技，2008，（20）2312322王金洛，徐福州卵黄抗体研究进展J农业新技术，2003，（06）36383张心如，杜干英卵黄抗体的应用与问题J四川畜牧兽医，1996，（01）51524陈连颐卵黄抗体的特性、应用及开发前景J中国禽业导刊，2007，24（21）36375易全茂，谢艳霞鸡卵黄抗体研究进展
5、J动物科学与动物医学，2004，21（02）44456闫佩毅，张立煌卵黄抗体及其在抗感染中的应用J国际流行病学传染病学杂志，2006，33（06）4064087谢献胜，周新民，王锋免疫鸡卵黄抗体研究进展J中国家禽，2005，27（10）41428朱晓东，陈大健，郭永刚等卵黄抗体的提纯及应用J家禽科学，2007，（03）41439房祥军，邹晓庭卵黄抗体的特性及其在仔猪腹泻防治上的应用J中国兽药杂志，2005，（394）2427多点注射免疫蛋鸡收集高免鸡蛋清洗、灭活水稀释法和硫酸铵沉淀法纯化抗鳗弧菌卵黄抗体ELISA法检测卵黄抗体效价鳗弧菌活化、培养10李沁光，李孟潮，姚金水用免疫方法防治仔猪黄、
6、白痢效果J福建畜牧兽医，1997，5711雷勇，徐有良，李文平WSSV卵黄抗体的制备及在螯虾中的应用J河北渔业，2006，（05）151612詹丽娥，乔忠，孙世兴鸡三联蛋黄抗体研制及应用J中国兽医科技，1994，24（11）303113汪铭书，程安春，陈孝跃应用高免卵黄抗体防治鸭病毒性肝炎的研究J中国畜禽传染病，1997，5141614张毓金，吕殿红，黄庚明番鸭花肝病高免卵黄抗体试验初报J广东畜牧兽医科技，20001242515李肖梁，马有智，方维焕特异性卵黄抗体添加剂对中华鳖摄食和生长的影响J水产学报，2006，（03）42542816周常义，陈晓凤，刘章锦牛蛙嗜水气单胞菌病的病原研究J集美大学学报（自然科学版）2003，8（4）31732117POLSONAISOLATIONOFVIRALIGGANTIBODIESFROMYOLKOFIMMUNIZEDHENSJIMMUNOLCOMMUN,1980,9547518杨帆，张连峰卵黄抗体的分离提取和纯化方法J中国比较医学杂志，2007，（11）6719KIMH,NAKAISSIMPLESEPARATIONOFIMMUNOGLOBULINFROMEGGYOLKBYULTRAFILTRATIONJJFOODSCI,1998,63348549020陈天豹一步洗脱离子交换色谱分离纯化蛋黄中IGYJ福州大学学报，2000，28（2）811
