1、毕业论文开题报告生物技术曼氏无针乌贼的染色体研究一、选题的背景与意义曼氏无针乌贼（SEPIELLAMAINDRONI），俗称墨鱼，是一年生的中型乌贼，是一种重要的经济渔业资源，在中国海洋资源产量中占有重要的位置。曼氏无针乌贼由于具有重要的经济价值而为人们所熟知，乌贼本身不仅具有营养价值高、生活周期短、生长快等特点其生物学意义以及科研价值也越来越为人们重视。目前有关曼氏无针乌贼的研究大多涉及组织学研究（蒋霞敏等，2007；蒋霞敏等，2008；王春林等，2008）和养殖学研究（王春林等，2006）等方面，而对于核型分析的研究国内外还没有相关报道。因此具有一定的进步意义，本实验对曼氏无针乌贼的染色体
2、数目与核型进行研究，以期为其染色体资料的积累及今后遗传图谱，育种等研究提供理论依据。二、研究的基本内容与拟解决的主要问题（一）研究的基本内容1利用成体以及不同时期的胚胎制作曼氏无针乌贼染色体标本。2制作曼氏无针乌贼染色体标本时秋水仙素处理的浓度及时间。3制作曼氏无针乌贼染色体标本时低渗的浓度及时间。4染色体组成分析。主要目标（二）拟解决的主要问题曼氏无针乌贼染色体标本制备中秋水仙素的处理时间浓度，低渗的时间及浓度及成体PHA的处理方法。三、研究的方法与技术路线（一）研究的方法通过染色体标本制备和观察，查阅文献资料，数据处理分析等研究方法。1样品采集成体取自宁海得水育苗场人工养殖的曼氏无针乌贼。
3、胚胎取自宁海得水育苗场人工养殖的曼氏无针乌贼产下的不同发育阶段的胚胎。2染色体标本制备（1）秋水仙素处理方法对成体进行直接注射成体还需要PHA处理，对胚胎剥去卵膜后秋水仙素浸泡。对秋水仙素的浓度与处理时间设置梯度。（2）低渗KCL溶液，对于浓度和处理时间设置梯度。（3）固定及染色CARNOY液甲醇冰乙酸31固定。GIEMSA染色液染色。（4）关于滴片冷滴片法或热滴片法（5）显微拍摄对染色体标本进行显微拍摄，照片处理，投影。3数据的统计，计算与分析选取一定数目中期分裂相染色体，对染色体数目进行计数，取众数确定曼氏无针乌贼的染色体数，计算得到染色体相对长度，臂率，臂数，并对染色体进行分类。（二）技
4、术路线四、研究的总体安排与进度2010年3月4月查阅相关文献资料。2010年5月6月完成开题报告和一篇2000字以上的综述及亲本培养。2010年7月12月多次采集成体及亲本产下的胚胎制作染色体标本。2011年1月2月翻译两篇外文。2011年3月5月完成一篇科技论文，准备毕业答辩。亲本培养成体四季采样不同发育阶段的胚胎（PH、温度、盐度、溶氧）一定浓度秋水仙素浸泡注射一定浓度PHA低渗注射一定浓度秋水仙素固定滴片干燥染色产卵及孵化干燥显微拍照染色体分析数据处理及论文撰写五、主要参考文献1曹伏军，李长玲，罗杰等。管角螺、细角螺的核型研究J广东海洋大学学报，2008,28（1）15182常建波,魏利
5、平,杨建敏,等文蛤染色体核型及三倍体诱导的初步研究J水产学报,1996,2032692743顾若波,徐钢春,华丹太湖似刺鳊鮈染色体组型分析及细胞核DNA含量J水产学报,2009,33（1）9144管云雁，韩雅丽。两种荔枝螺染色体核型以及性畸变个体染色体研究J海洋环境科学，2004,23321225蒋霞敏,符方尧,李正,等人工养殖曼氏无针乌贼生殖系统的解剖学与组织学研究J中国水产科学，2008,163726蒋霞敏,符方尧,李正,等曼氏无针乌贼的卵子发生及卵巢发育J水产学报,2007,314,6076177李雅娟,毛连菊,李霞,等三倍体皱纹盘鲍活体倍性鉴定用上足触手、外套膜活体组织制备染色体标本J
6、遗传学报,2002,2965145188林明敏,朱香萍,华丹石蝶染色体核型分析J青岛农业大学学报,2009,2631281309陆荣茂,柴学良,董迎辉,等宽壳全海笋的核型分析J台湾海峡,2008,271434610沈亦平,刘汀,姜海波，等近江牡蛎染色体核型的研究J武汉大学学报自然科学版,1994410210611孙振兴中国海洋贝类染色体研究进展J海洋通报,2004,206778312孙振兴,郭胜超,邵雁群,等三种海产帘蛤目贝类的核型研究J海洋学报,2004,261889413王梅林,郑家声我国海洋鱼类和贝类染色体组型研究进展J青岛海洋大学学报,2000,30227728414王妍妍,柳学周,徐
7、永江条半星鲽染色体核型分析J渔业科学发展,2009,30281315王桂云,马庆惠,王志先皱纹盘鲍的染色体研究J动物学杂志，1988,9（2）17117416王春林,樊晓旭,余红卫,等曼氏无针乌贼墨囊组织学及墨汁形成的超微结构J动物学报,2008,54236637217王春林,蒋霞敏,邱勇敢曼氏无针乌贼海水围塘养殖技术J中国水产,2006,8515218闻海波,顾若波,徐钢春,等两种淡水贝类的核型分析J大连水产学院学报,2007,221424519吴萍,董建萍,倪建国,等文蛤染色体的研究J上海水产大学学报,2002,11210610920许崇任动物生物学M北京高等教育出版社,200898111
8、21袁美云,毛连菊,周炜岩牡蛎的染色体核型分析J大连水产学院学报,2008,23（4）31832022张涛,程宝林,张贤刚,等澳洲宝石鲈染色体核型分析J淡水渔业,2008,382767923周岭华,张晓华,相建海鹰爪虾染色体数目与核型的研究J海洋与湖沼,1999,303,25025324周丽青,杨爱国,柳学周,等半滑舌鳎染色体核型分析J水产学报,2005,29341741925朱冬发,王春林,李志强三疣梭子蟹核型分析J水产学报,2005,29（5）64965326PAPANF,EBRAHIMIPOURM,EBRAHIMIPOURMTHESTUDYOFPERSIANGULFCUTTLEFISHSEPIAPHARAONISCHROMOSOMEVIAINCUBATIONOFBLOODCELLSJJOURNALOFAMERICANSCIENCE,2010,6215216427NAKAMURA,HKAREVIEWOFMOLLUSCANCYTOGENETICFORMOLLUSCANCHROMOSOMEBIVALVIA,POLYPLACOPHORAANDCEPHALOPODA,VENUSJAPENSJOURNALMALACOLOGY198544193226
