1、毕业论文开题报告生物技术三疣梭子蟹蜕皮周期中甲基法尼酯浓度的变化一、选题的背景与意义三疣梭子蟹（PORTUNUSTRITUBERCULATUS），隶属于甲壳纲、十足目、梭子蟹科，是中国沿海的重要经济蟹类。其生长迅速，养殖利润丰厚，已经成为中国沿海地区重要的养殖品种。梭子蟹一般在35米深海底生活及繁殖，冬天移居到1030米的深海，喜在泥沙底部穴居。1987，LEROUX首次在甲壳动物中提出了大颚器MANDIBULARORGAN，M0这个概念，主要描述的是组织结构中类似于昆虫咽侧体的一个内分泌腺它主要的分泌产物是甲基法尼酯METHYLFARNESOATE，MF，可以调节甲壳动物中蜕皮、生长发育等活
2、动。而且大颚器也被证明是甲壳动物中唯一合成MF的内分泌器官。目前国内外都有人对甲壳动物中一些蟹类的超微结构做了研究。叶海辉等采用组织切片和电镜技术，对锯缘青蟹大颚器的形态结构进行了观察；赵维信等也对克氏原螯虾大颚器的超微结构进行了研究；赵维信等人同样对克氏原螯虾大颚器在卵巢发育周期中的组织结构变化做了研究；杜育哲等人用透射电镜对中华绒螯蟹大颚器的超微结构及眼柄切除后M0的变化进行了研究。对三疣梭子蟹大颚器的显微结构和超微结构的研究国内也有出现，秦昆、康现江对三疣梭子蟹大颚器显微及超微结构做了研究。作为一种经济类的蟹类，三疣梭子蟹同样会遇到目前蟹类中普遍存在的性早熟的问题，这就给很多养殖户早成了
3、重大的经济损失。所以研究清楚性早熟的机理然后解决这个问题刻不容缓。LAUFER很早以前就提出过大颚器的分泌物甲基法尼酯具有促性腺激素的作用，所以研究三疣梭子蟹中大颚器在蜕皮周期中的变化来确定其对性早熟有没有影响及影响的强弱。可以进一步的研究三疣梭子蟹性早熟的机制，以便尽早的解决该问题。二、研究的基本内容与拟解决的主要问题研究的基本内容1三疣梭子蟹蜕皮周期中甲基法尼酯浓度的变化拟解决的问题2甲基法尼酯浓度的测定三、研究的方法与技术路线（一）研究方法1、实验材料三疣梭子蟹在宁波宁海长街得水育苗场购得。2、三疣梭子蟹蜕皮周期中甲基法尼酯浓度的变化（1）大颚器的提取用解剖器材获取三疣梭子蟹中不同蜕皮时
4、期（蜕皮后期、蜕皮间期、蜕皮前期、蜕皮期四个大期）游泳足基部抽取血淋巴，加入含有1000L乙腈和1000L09NACL及10L内标（十二烷酸甲酯）的15ML的玻璃离心管内，超声波清洗5MIN,涡旋震荡2MIN，加入1ML正己烷，涡旋震荡2MIN，3000R/MIN离心10MIN，吸取上层正己烷（含有甲基法尼酯）于已作记号的4ML干净色谱瓶中，下层重复提一次，合并正己烷在冰箱下层20保存一周（2）一周内将正己烷旋转蒸发，蒸发后加100L色谱正己烷定容，进行气相色谱质谱分析（3）根据样品中甲基法尼酯特征离子响应强度与内标十二烷酸甲酯的特征离子响应强度比值，由标准曲线方程求得样品中甲基法尼酯的含量。
5、（4）根据统计学原理，绘制图表四、研究的总体安排与进度201010毕业论文选题201010201011进行文献查阅和资料收集201011201012完成任务书、开题报告、综述，进行开题答辩加入1ML正己烷，涡旋震荡2MIN15ML的玻璃离心管内，超声波清洗5MIN，涡旋震荡2MIN加100L色谱正己烷定容，进行气相色谱质谱分析计算获得甲基法尼酯的含量获取血淋巴1000L乙腈1000L09NACL10L内标3000R/MIN离心10MIN吸取上层正己烷，于已作记号的4ML干净色谱瓶中下层重复提一次，合并正己烷在冰箱下层20保存一周2011120112完成两篇外文文献的翻译2011220114进行
6、论文实验，然后再把实验的数据整理，完成毕业论文20115进行毕业答辩五、主要参考文献1LAUFERH,BORSTD,BAKERFC,ETA1IDENTIFICATIONOFAJUVENILEHORMONELIKECOMPOUNDINACRUSTACEANJSCIENCE,1987,23547852022052LAUFERH,SAGIA,AHLJBS,ETA1METHYLFARNESOATEAPPEARSTOBECRUSTACEANREPRODUCTIVEHORMONEJINVERTEBRAREPRODDEV,1992,2217203RIDDIFORDLMCELLULARANDMOLECULAR
7、ACTIONSOFJUVENILEHORMONEGENERALCONSIDERATIONANDPREMETRAMORPHICACTIONSJADVINSECTPHYSIOL,1994,242132734赵维信,陆剑锋中华绒螯蟹大颚器激素生物合成与性早熟的关系J水产学报,2003,2742892945杜育哲,顾景龄,吕宪禹,等中华绒螯蟹大颚器分泌物的HPLC分析J水产科学,2004,23610136袁春营,崔青曼,赵艳珍,等中华绒螯蟹大颚器对卵巢发育的影响J大连水产学院学报,2007,2221491527叶海辉,李少菁,黄辉洋,等锯缘青蟹大颚器的显微和超微结构J海洋学报,2005,2711201
8、248TOBESS,YOUNGDA,KHOOHWPRODUCTIONOFMETHYLFARNESOATEBYTHEMANDIBULARORGANSOFTHEMUDCRABSCYLLASERRATAVALIDATIONOFARADIOCHEMICALASSAYJGENCOMPENDOCRINO1,1989,733423539LEROUXADESCRIPTIONDORGANESMANDIBULAIRESMOMVENAUXCHEZLESCRUSTACESDECAPODESJCRHEBDACDSCISERDSCINAT,1968,2661414141710赵维信,李胜克氏原螯虾大颚器的超微结构研究J水
9、产学报,1998,22430330811上官步敏,刘正琮,李少菁锯缘青蟹卵巢发育的组织学观察J水产学报1991,152961012陆剑锋,万全,丁凤琴,等克氏原螯虾大颚器促性腺发育作用研究J安徽农业科学,2009,3731130113313赵维信,李胜克氏原螯虾大颚器的超微结构研究J水产学报，1998，22（4）30330814李胜,赵维信克氏原螯虾大颚器在卵巢发育周期中的组织结构变化J上海水产大学学报,1999,81121815赵维信,白桦克氏原螯虾大颚器合成甲基法尼酯的研究J水产学报,2001,25319319616张列士,徐琴英自然及养殖水体河蟹性成熟和性早熟的研究J水产科技情报,200
10、1,28310611117黄辉洋,叶海辉,李少菁,等锯缘青蟹大颚器对卵巢发育的调节作用J台湾海峡,2003,22329529818赵维信,陆剑峰早熟和正常中华绒螫蟹大颚器官发育及超微结构J上海水产大学学报,2004,1315819杜育哲,顾景龄,郭世宜,等中华绒螯蟹超微结构的研究J南开大学学报,2OO0,33210711020叶海辉,李少菁,王桂忠十足目甲壳动物促雄性腺研究概述J动物学杂志,2001,361434721陆剑锋,赵维信十足目甲壳动物生殖激素对卵巢的作用及其调控J上海水产大学学报,2001,10216617122赵维信,贾江,安苗外源激素和服柄提取物对梦氏沼虾卵母细胞的离体诱导作用
11、J上海水产大学学报,1996,5422122523罗永婷,袁维佳,马勇杰,等锯缘青蟹复眼的形态和超微结构J动物学研究,2003,24322022624陆剑锋,白桦孕酮对克氏原螯虾大颚器激素生物合成的体外调控J中国水产科学,2006,13347147425赵维信,白桦,陆剑锋克氏原螫虾大颚器生物合成甲基法尼酯的调控J水产学报,2002,26增1726蔡生力,赵维信,李德尚,等中国对虾肝胰腺、卵巢及血淋巴中的孕酮和雌二醇含量的生殖周期变化J水产学报,2001,25430431027黄辉洋,李少菁锯缘青蟹大颚器发育的组织学研究J研究报告,2003,272495228李胜，赵维信甲壳动物的大颚器和甲基法尼酯J。上海水产大学学报，2000,9（3）233129陆剑锋，常国亮，吴旭干,等甲壳动物大颚器及其合成甲基法尼酯的放射化学测定法J。水产科学，2009,28（2）3243
